實時熒光定量PCR
- 掌葉大黃4個MYB轉(zhuǎn)錄因子的分子克隆及脅迫表達
；實時熒光定量PCR轉(zhuǎn)錄因子在植物生長發(fā)育過程中發(fā)揮著不可或缺的作用，通常通過與靶基因啟動子區(qū)域中的相關(guān)順式作用元件相互作用，參與基因表達調(diào)控［1］。在眾多的轉(zhuǎn)錄因子中，MYB存在于所有真核生物中，功能多樣且廣泛參與到植物生長、發(fā)育、防御及次生代謝調(diào)控等生理過程。 ZmMYBC1是植物中第一個被發(fā)現(xiàn)的MYB轉(zhuǎn)錄因子［2］，與玉米花青素的生物合成密切相關(guān)。近年來，越來越多的植物MYB家族成員相繼被報道，如擬南芥［3］、過路黃［4］、辣椒［5］中分別鑒定出19
西北農(nóng)業(yè)學(xué)報 2024年7期2024-07-12
- 鐵皮石斛miR168分子進化特征及響應(yīng)藍激光表達分析
。實時熒光定量PCR結(jié)果表明，鐵皮石斛miR168a與其靶基因gene-MA16_Dca006149、gene-MA16_Dca020995、gene-MA16_Dca017821參與藍激光對鐵皮石斛的影響。關(guān)鍵詞? 鐵皮石斛；miR168；進化特性；激光；實時熒光定量PCR鐵皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）為蘭科石斛屬草本藥用植物，具有生津、潤肺、排毒，增強免疫力等功效［1］?，F(xiàn)代化學(xué)和藥理研究表明鐵皮石
西北農(nóng)業(yè)學(xué)報 2024年7期2024-07-12
- 氟脅迫條件下茶樹葉部實時熒光定量PCR分析中內(nèi)參基因的篩選與驗證
于實時熒光定量PCR（qRT-PCR）分析的內(nèi)參基因，以課題組前期篩選的低氟茶樹品種福鼎大白茶和高氟茶樹品種金觀音為試驗材料，利用qRT-PCR技術(shù)結(jié)合geNorm、NormFinder和BestKeeper軟件，分析氟脅迫條件下（0.42 mmol·L-1 NaF）8個候選內(nèi)參基因（CsACTIN、CsEF-1α、CseIF-4α、CsGAPDH、CsPP2A、CsTBP、CsTIP41和CsUBC）在茶樹不同葉位（新梢和老葉）、不同脅迫時間（0、1、3
茶葉科學(xué) 2024年1期2024-04-19
- 基于轉(zhuǎn)錄組測序的斑地錦內(nèi)參基因篩選及驗證
；實時熒光定量PCR斑地錦（EuphorbiamaculataL.）是一年生大戟科（Euphorbiaceae）大戟屬（EuphorbiaL.）草本植物，分布于江西、新疆、河南和浙江等地區(qū)[1]，具有清熱解毒功效，主治痢疾、泄瀉、尿血、便血、瘡癤癰腫、濕熱黃疸等[2]。斑地錦主要含有黃酮類、萜類、酚酸類和生物堿類等成分，目前已開發(fā)有腸炎寧片、三七止血片、瀉痢寧片等中成藥，其主要藥效成分之一為黃酮類物質(zhì)槲皮素[3]，研究槲皮素等藥用植物有效成分生物合成途徑基
熱帶作物學(xué)報 2023年11期2024-01-08
- 改良劑對酸性植煙土壤化學(xué)性質(zhì)、細菌群落結(jié)構(gòu)和豐度的影響
；實時熒光定量PCR；高通量測序中圖分類號：S156.2文獻標志碼：A文章編號：1002-1302（2023）16-0240-07收稿日期：2022-11-21基金項目：貴州省煙草公司銅仁市公司科技項目（編號：2022-03）；貴州省教育廳自然科學(xué)項目（編號：黔教合KY字［2019］175、黔教合KY字［2020］163）；銅仁市科技局項目（編號：2021-77）；銅仁學(xué)院碩士點及學(xué)科建設(shè)研究子項目（編號：trxyxwdxm-029）。作者簡介：譚智勇（1
江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2023年16期2023-12-11
- 蝴蝶蘭建蘭花葉病毒和齒蘭環(huán)斑病毒的實時熒光定量PCR檢測
；實時熒光定量PCR；病毒檢測中圖分類號：S436.8+1 文獻標志碼：A文章編號：1002-1302（2023）15-0021-08基金項目：云南省重大科技專項計劃（編號：202102AE090052）；云南大學(xué)專業(yè)學(xué)位研究生實踐創(chuàng)新基金（編號：ZC-22222419）。作者簡介：宋起萱（1999—），女，四川攀枝花人，碩士研究生，研究方向為觀賞植物研究。E-mail：songqixuan0218@126.com。通信作者：余蓉培，博士，副研究員，研究方
江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2023年15期2023-09-11
- 實時熒光定量PCR技術(shù)在湖南油菜根腫病菌檢測中的應(yīng)用
；實時熒光定量PCR;休眠孢子；檢測中圖分類號：S 432.44 文獻標識碼：A DOI： 10.16688/j.zwbh.2022282油菜作為湖南省的主要油料作物，其種植面積居全國首位[1]。近年來，由于油菜根腫病的發(fā)生和蔓延，嚴重影響油菜的產(chǎn)量和品質(zhì)，對湖南油菜產(chǎn)業(yè)構(gòu)成重大威脅。油菜根腫病是由蕓薹根腫菌Plas-modiophora brassicae侵染并引起的一種破壞性土傳病害[2]。該病害主要由帶菌土壤中的休眠孢子傳播，休眠孢子可在沒有寄主植物
植物保護 2023年4期2023-08-05
- 煙草花葉病毒實時熒光定量PCR檢測體系的構(gòu)建
；實時熒光定量PCR；TaqMan探針法中圖分類號 S 435.72? 文獻標識碼 A? 文章編號 0517-6611（2023）12-0171-05doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2023.12.039Establishment of Real-time PCR Detection Method of Tobacco Mosaic VirusWU Yan-hui， PU Tuan-wei， ZHANG Sheng-jie et
安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2023年12期2023-07-17
- 缺氮與恢復(fù)供氮后水稻銨轉(zhuǎn)運蛋白基因的表達特征分析
用實時熒光定量PCR檢測了水稻全部預(yù)測的12條銨轉(zhuǎn)運蛋白基因在缺氮及恢復(fù)供氮處理后的表達情況。結(jié)果表明：全部銨轉(zhuǎn)運蛋白基因在水稻根、莖和葉中都有表達，AMT1.1在葉中表達水平最高，其表達受到氮缺乏和氮源類型的影響。缺氮處理后，水稻根部的表達全部大幅下調(diào)，莖中多數(shù)下調(diào)，少數(shù)上調(diào)或波動，葉中大部分先上調(diào)再回落；恢復(fù)供氮后，水稻根部多數(shù)大幅上調(diào)，莖和葉中則有所分化，部分上調(diào)或先上調(diào)再回落。這一現(xiàn)象與水稻氮代謝途徑的整體銨轉(zhuǎn)運途徑有關(guān)，銨的吸收是由根到莖再到葉轉(zhuǎn)
福建農(nóng)業(yè)科技 2023年4期2023-07-13
- 枸杞實時熒光定量RT-qPCR內(nèi)參基因篩選與驗證
；實時熒光定量PCR；定量分析中圖分類號：S567.1+90.1??文獻標志碼：A??文章編號：1002-1302（2023）09-0041-11基金項目：國家自然科學(xué)基金（編號：32060359）；寧夏自然科學(xué)創(chuàng)新群體基金（編號：2021AAC01001）；寧夏回族自治區(qū)重點研發(fā)計劃（編號：2021BEF02002）；寧夏經(jīng)濟林遺傳改良創(chuàng)新團隊項目（編號：2022QCXTD04）。作者簡介：李浩霞（1977—），女，甘肅景泰人，副研究員，主要從事旱作農(nóng)業(yè)
江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2023年9期2023-06-04
- COS對抗菌蛋白ANG4在腸道表達的誘導(dǎo)作用
；實時熒光定量PCR；蛋白質(zhì)免疫印跡中圖分類號：Q78 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻標志碼：ADOI：10.3969/j.issn.1007-7146.2023.03.006Inducing Effects of COS on Expression of Antimicrobial Protein ANG4 in IntestineHE Yuwen2， TANG Guanyu1， 3， LI Chuchu1， LI Can1， JI
激光生物學(xué)報 2023年3期2023-04-12
- 馬達加斯加龍樹實時熒光定量PCR鑒定方法的研究
）實時熒光定量PCR鑒定方法。[方法]提取26份龍樹科植物基因組，并用內(nèi)源基因檢測DNA質(zhì)量;根據(jù)GenBank中已發(fā)表的馬達加斯加龍樹的PEPC基因序列，設(shè)計特異性引物與熒光探針，通過檢測26份供試樣本，檢測該方法的特異性;將樣品DNA進行10倍梯度稀釋，以檢測實時熒光定量PCR方法的靈敏度。[結(jié)果]只有3份馬達加斯加龍樹樣本出現(xiàn)典型的擴增曲線，其他23份龍樹科植物無典型的擴增曲線;核酸原液與10-1～10-4倍稀釋液樣本均能夠得到典型擴增曲線，標準曲線
安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2022年12期2022-07-06
- 實時熒光定量PCR特異性監(jiān)測曲線的表述方式探析
：實時熒光定量PCR技術(shù)已廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、制藥、農(nóng)業(yè)、食品安全等多個領(lǐng)域，各科技期刊涌現(xiàn)相關(guān)研究報道，但對該技術(shù)生成的特異性監(jiān)測曲線表述方式存在分歧。文章對該曲線的表述方式進行統(tǒng)計分析，并結(jié)合英文翻譯，借助各類詞典、高等教育教科書及全國科學(xué)技術(shù)名詞審定委員會的術(shù)語在線進行探析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該曲線在中文科技期刊中主要有兩種表述方式，分別為“熔解曲線”“溶解曲線”，且大多數(shù)期刊均使用過這兩種表述方式，經(jīng)分析推測“熔解曲線”為規(guī)范表述，由于“熔”和“溶”的拼音均為
新聞研究導(dǎo)刊 2022年10期2022-05-30
- 實時熒光定量PCR技術(shù)在本科實驗教學(xué)中的應(yīng)用探討
“實時熒光定量PCR分析不同氮肥施用量下煙葉團棵期葉片中NtCIPK8的定量表達”實驗，使學(xué)生了解不同施氮量下，相同組織中同一個基因的表達量不同的知識，還將基因表達的特點從一個抽象的概念轉(zhuǎn)化為了具體的數(shù)字圖形，同時使學(xué)生可以掌握實時熒光定量PCR技術(shù)的原理、方法和儀器的使用，為增強農(nóng)林專業(yè)學(xué)生的科研能力和綜合素質(zhì)提供了新的內(nèi)容。關(guān)鍵詞 聚合酶鏈式反應(yīng);實時熒光定量PCR;NtCIPK8;本科實驗教學(xué)中圖分類號：G642.0 文獻標志碼：A DOI：10.1
南方農(nóng)業(yè)·上旬 2022年4期2022-05-22
- 基于微生物學(xué)的速食食品致病菌檢驗研究
和實時熒光定量PCR 法進行檢驗。對兩種檢驗方法下的致病菌陽性檢出情況進行統(tǒng)計，計算出總陽性率。并對兩組檢驗所耗費的時間進行記錄，計算出平均用時結(jié)果。經(jīng)統(tǒng)計與組間比較，實時熒光定量PCR 法的樣本陽性檢出率為11.00%，較傳統(tǒng)細菌分離培養(yǎng)法的8.00%明顯較高，P關(guān)鍵詞：速食食品;致病菌;檢驗;實時熒光定量PCR 法;傳統(tǒng)細菌分離培養(yǎng)法中圖分類號：TS207 文獻標識碼：A 文章編號：1001-5922（2022）04-0084-04Abstract：?
粘接 2022年4期2022-05-05
- 芒果VOZ轉(zhuǎn)錄因子基因家族成員鑒定及生物信息學(xué)分析
過實時熒光定量PCR檢測膠孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）與細菌性黑斑病菌（Xanthomonas citri pv. mangiferaeindicae）侵染下的相對表達量。【結(jié)果】從芒果全基因組中間鑒定出4個VOZ轉(zhuǎn)錄因子家族成員，分別為MiVOZ1、MiVOZ2、MiVOZ3和MiVOZ4基因，開放閱讀框（ORF）長度為1290～1482 bp，編碼氨基酸數(shù)量為429～493，蛋白分子量為47.26～54.96
南方農(nóng)業(yè)學(xué)報 2021年7期2021-11-03
- 實時熒光定量PCR在EB病毒DNA檢測中的應(yīng)用
究實時熒光定量PCR在EB病毒DNA檢測中的臨床效果。方法：選擇我院2019年5月至2021年6月間的191例感染患者作為研究對象，實時熒光定量PCR對191例已確診感染EBV的患者進行檢驗，對EBV-DNA外周血實施檢驗，包括白細胞（WBC）、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、肌酸激酶（CK）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）等指標進行檢驗，并選擇200例健康人群對以上各指標進行檢驗。結(jié)果：感染組的各項相關(guān)指標較之正常人群對比差異明顯，P<0.0
康頤 2021年17期2021-10-30
- 實時熒光定量PCR與細胞培養(yǎng)法在流感病毒檢測中的比較
討實時熒光定量PCR與細胞培養(yǎng)法在流感病毒檢測中的比較。方法：選取我院302例流感病毒樣本，在24h內(nèi)對標本送至實驗室進行檢驗，對于無法在24h內(nèi)檢驗者放置在-70°C環(huán)境中保存。對所有標本實施實時熒光定量PCR與細胞培養(yǎng)法。結(jié)果：細胞培養(yǎng)法陽性標本94例，陽性率為31.13%，實時熒光定量PCR法陽性標本132例，陽性率為43.71%;實時熒光定量PCR法A型H1亞型陽性率3.31%，A型H3亞型陽性率22.19%，B型陽性率17.88%，細胞培養(yǎng)法A型
醫(yī)學(xué)前沿 2021年13期2021-10-11
- 小麥TaARF20基因克隆及表達分析
用實時熒光定量PCR檢測TaARF20基因在普通小麥不同組織及普通小麥和多子房小麥不同發(fā)育時期幼穗中的表達模式?！窘Y(jié)果】TaARF20基因包含1個內(nèi)含子和2個外顯子，編碼區(qū)（CDS）長度為1116 bp，編碼371個氨基酸殘基，蛋白分子量約40.38 kD，理論等電點（pI）為4.96，脂溶性系數(shù)為19.80，疏水性系數(shù)為0.985，不穩(wěn)定系數(shù)為50.51，屬于不穩(wěn)定蛋白，定位在細胞核中，含有ARF家族蛋白的保守結(jié)構(gòu)域和B3 DNA結(jié)合域，主要由α-螺旋（
南方農(nóng)業(yè)學(xué)報 2021年9期2021-09-13
- 欽州市36656份上呼吸道標本新型冠狀病毒核酸檢測結(jié)果分析
;實時熒光定量PCR;檢測;分析Abstract： Objective： to understand the infection situation of COVID-19 in Qinzhou and to provide basis for epidemic prevention and control. Methods： real time fluorescence RT-PCR was used to detect COVID-19 nucleic
臨床醫(yī)學(xué)前沿 2021年4期2021-09-10
- CRISPR技術(shù)對發(fā)酵乳制品中嗜酸乳桿菌的檢測應(yīng)用
實時熒光定量PCR中圖分類號： Q 93.331??? 文獻標志碼： A??? 文章編號： 1000-5137（2021）02-0142-04Application of CRISPR technology in the detection ofLactobacillus acidophilusin fermented dairy productsMENG Dongqing， LI Linxian， WANG Jin， LIU Tingting， YU
上海師范大學(xué)學(xué)報·自然科學(xué)版 2021年2期2021-07-14
- 五指毛桃轉(zhuǎn)錄組及黃酮類化合物生物合成關(guān)鍵基因分析
;實時熒光定量PCR中圖分類號：S567.1 ? ? ?文獻標識碼：ATranscriptome Analysis of Ficus hirta Vahl and Expression Profiling of Key Genes Involved in Flavonoid BiosynthesisCHEN Rongzhu1， LI Zhen1， LIN Meizhen1， WANG Xiaoping1*， LAI Zhongxiong2*1. Depar
熱帶作物學(xué)報 2021年3期2021-05-19
- 苦蕎FtCAD-1和FtCAD-2基因克隆及組織表達分析
用實時熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測CAD基因在不同果殼厚度類型（厚果殼苦蕎和薄果殼苦蕎）不同組織的表達情況?！窘Y(jié)果】從薄果殼苦蕎和厚果殼苦蕎中均克隆獲得2條苦蕎CAD基因，且這2條基因序列在薄果殼苦蕎與厚果殼苦蕎中均完全一致，命名為FtCAD-1和FtCAD-2。FtCAD-1基因的開放閱讀框（ORF）長度為876 bp，編碼291個氨基酸殘基，為疏水性的穩(wěn)定酸性蛋白，定位于細胞核和細胞質(zhì);FtCAD-2基因的ORF長度為1083 bp，編碼360
南方農(nóng)業(yè)學(xué)報 2021年12期2021-04-15
- TAZmRNA在非小細胞肺癌組織中的表達及其臨床意義
用實時熒光定量PCR法檢測TAZmRNA表達量。 結(jié)果 ①實時熒光定量PCR法檢測到TAZ mRNA的表達量在非小細胞肺癌組織高于癌旁/肺良性腫瘤組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.027/0.016<0.05）。②非小細胞肺癌患者癌組織中TAZmRNA表達量在腫瘤大小、分化程度和p-TNM分期中差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.007/0.000/0.024<0.05）。結(jié)論 TAZ可能參與非小細胞肺癌的發(fā)生、發(fā)展;可作為NSCLC預(yù)后及轉(zhuǎn)移的評價指標、提供非小細胞
中國現(xiàn)代醫(yī)生 2021年36期2021-02-15
- 3433例圍產(chǎn)期婦女B族溶血性鏈球菌感染分析
用實時熒光定量PCR技術(shù)對標本GBS核酸檢測，并對核酸陽性的患者進行GBS培養(yǎng)確認和藥敏實驗。 結(jié)果 溫州地區(qū)3433例孕婦中檢出GBS感染399例，感染陽性率為11.6%;將20～45歲階段的孕婦按年齡分成5組，其GBS陽性感染率分別為10.3%、12.0%、11.6%、13.4%、9.6%。藥敏結(jié)果統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)耐藥率高的抗生素為四環(huán)素、氯霉素、紅霉素、克林霉素、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星，GBS的一線抗生素青霉素耐藥率為1.1%，未檢測到GBS對氨芐西林、萬古霉
中國現(xiàn)代醫(yī)生 2020年24期2020-10-13
- 澳洲堅果實時熒光定量PCR分析中內(nèi)參基因的篩選
果實時熒光定量PCR分析內(nèi)參基因的報道。選擇合適的內(nèi)參基因是提高實時熒光定量PCR分析準確性的先決條件。為篩選澳洲堅果實時定量PCR最適內(nèi)參基因，以澳洲堅果的根、莖、葉、果皮、果仁為材料，利用實時熒光定量PCR技術(shù)，對18S rRNA，Actin，CYP，EF1a，EF1b，GAPDH，MDH，TUBa，TUBb，UBQ，UBC等11個常用的內(nèi)參基因在澳洲堅果不同組織中的表達穩(wěn)定性進行了分析。geNorm軟件分析的最適內(nèi)參基因數(shù)目為2，最穩(wěn)定內(nèi)參組合為MD
熱帶作物學(xué)報 2020年8期2020-09-26
- 以RT-PCR為主題的“小綜合”分子生物學(xué)實驗課程設(shè)計與實踐
以實時熒光定量PCR（Real-time PCR，RT-PCR）為主題的“小綜合”實驗，以期通過課程的實施，激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，提高教學(xué)質(zhì)量，取得良好的教學(xué)效果。[關(guān)鍵詞] 分子生物學(xué)實驗;實時熒光定量PCR;綜合實驗[基金項目] 大連大學(xué)教改立項“虛擬仿真配套分子生物學(xué)實驗教學(xué)體系的設(shè)計與實踐”“‘互聯(lián)網(wǎng)+背景下學(xué)科平臺課‘分子生物學(xué)的混合式教學(xué)模式改革與實踐”;2018年度遼寧省教育廳教改立項“基于雙一流建設(shè)背景下生物技術(shù)專業(yè)課程體系的改革與探索”（遼
教育教學(xué)論壇 2020年23期2020-07-16
- 菠菜非生物脅迫下實時熒光定量PCR分析中內(nèi)參基因的選擇
用實時熒光定量PCR技術(shù)，通過geNorm、NormFinder、BestKeeper軟件分析和評價其在不同脅迫下菠菜幼苗中的表達穩(wěn)定性。結(jié)果表明，8個候選內(nèi)參基因在不同脅迫處理下菠菜幼苗中的表達豐度及穩(wěn)定性存在差異，NaCl和高溫脅迫下G6PD表達穩(wěn)定性最好，PEG脅迫下ELF1B表達穩(wěn)定性最好。本研究結(jié)果可為菠菜非生物脅迫下相關(guān)基因的功能分析和基因差異表達研究提供有效的校正工具。關(guān)鍵詞：菠菜;實時熒光定量PCR;非生物脅迫;內(nèi)參基因中圖分類號：S636
山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2020年5期2020-06-29
- 鋁脅迫下橡膠苗實時熒光定量PCR內(nèi)參基因的篩選
于實時熒光定量PCR分析，本研究選擇了Actin、Actin7、18S rRNA、40S rRNA、YLS8、UBC2、UBC4、GAPDH、FP和ADF等10種常見的基因作為候選內(nèi)參基因，通過qRT-PCR檢測，利用內(nèi)參基因評價軟件geNorm、NormFinder、BestKeeper、Delta Ct算法以及綜合評價軟件RefFinder對10個候選內(nèi)參基因的表達穩(wěn)定性進行評估。綜合評價結(jié)果表明，鋁脅迫后表達穩(wěn)定性排名前3的內(nèi)參基因依次分別為UBC4
熱帶作物學(xué)報 2020年5期2020-06-19
- 梅州地區(qū)柑橘黃龍病的常規(guī)PCR與實時熒光定量PCR檢測技術(shù)研究與應(yīng)用
針實時熒光定量PCR（qPCR）檢測技術(shù)對梅州地區(qū)疑似柑橘黃龍病樣品進行檢測，并與常規(guī)PCR檢測進行對比。結(jié)果表明，實時熒光定量PCR用于檢測柑橘黃龍病菌結(jié)果快速、準確、可靠且無污染。采用2種方法對梯度稀釋的陽性樣本進行檢測發(fā)現(xiàn)，實時熒光定量PCR的靈敏度較常規(guī)PCR更高，能夠檢出樣品中痕量的病原菌。本研究在梅州地區(qū)建立了以實時熒光定量PCR方法進行柑橘黃龍病疑似植株的檢測，可以為梅州地區(qū)提供更準確、更靈敏、快速的黃龍病檢測技術(shù)。關(guān)鍵詞? ? 柑橘黃龍病;
現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技 2020年8期2020-05-06
- 基于轉(zhuǎn)錄組測序的不同光學(xué)分光膜下生菜葉片的基因表達差異分析
;實時熒光定量PCR（qRT-PCR）中圖分類號：Q949.783.5;Q786???? 文獻標識碼：AAbstract： New photovoltaic agriculture can generate photovoltaic power under the light demand of crop growth. To study the differential gene expression in lettuce leaves under di
熱帶作物學(xué)報 2020年2期2020-03-23
- 甜瓜實時熒光定量PCR分析中內(nèi)參基因的篩選
過實時熒光定量PCR技術(shù)分析18s rRNA、TUA、EFla、Actinl、Actin2、Actin3、Actin4、CYC和UBI-ep共9個候選內(nèi)參基因在甜瓜不同組織器官及不同脅迫處理下的表達穩(wěn)定性，包括甜瓜根、葉、種子和果實4種不同組織材料，以及水分脅迫、肉桂酸脅迫、鹽堿脅迫和ABA脅迫4種處理。同時使用Best-Keeper、Norm Finder和ge Norm軟件對9個候選內(nèi)參基兇進行穩(wěn)定性分析?！窘Y(jié)果】對不同組織器官而言，Best-Keep
福建農(nóng)業(yè)學(xué)報 2020年11期2020-02-22
- 月季鹽脅迫響應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子基因RcMYB102的克隆及表達分析
和實時熒光定量PCR技術(shù)研究RcMYB102基因在鹽處理、激素處理、鹽加激素共處理下不同組織不同處理時間的表達特性。克隆得到一個MYB類轉(zhuǎn)錄因子基因，命名為RcMYB102，該基因全長為1 492 bp，開放閱讀框（ORF）為1 086 bp，編碼362個氨基酸。序列比對發(fā)現(xiàn)，RcMYB102在N端具有保守的R2R3-MYB結(jié)構(gòu)域。系統(tǒng)進化樹分析結(jié)果表明RcMYB102與梅花PmMYB6、桃PpMYB6、甜櫻桃PaMYB102、蘋果MdMYB74、枇杷Ej
江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報 2020年6期2020-02-22
- 紅麻谷胱甘肽還原酶基因（HcGR）的克隆及鹽脅迫下表達分析
用實時熒光定量PCR檢測HcGR基因在紅麻不同組織及不同鹽度脅迫[CK（0 mmol/L NaCl）、T1（50 mmol/L NaCl）、T2（100 mmol/L NaCl）和T3（200 mmol/L NaCl）]下的表達情況。【結(jié)果】克隆獲得的HcGR基因開放閱讀（ORF）長度為1698 bp，其編碼蛋白相對分子量為60 kD，由555個氨基酸殘基組成，理論等電點（pI）為8.46，為親水性蛋白，定位于葉綠體;HcGR蛋白二級結(jié)構(gòu)以無規(guī)則卷曲為主，
南方農(nóng)業(yè)學(xué)報 2020年10期2020-01-21
- 妊娠晚期孕婦B族鏈球菌實時熒光定量PCR檢測結(jié)果分析
用實時熒光定量PCR（realtime PCR）方法檢測妊娠晚期孕婦B族鏈球菌（GBS），了解妊娠晚期孕婦GBS的感染情況，為預(yù)防GBS感染提供依據(jù)。方法 選取2017年1月～2018年12月我院進行GBS檢測的10 691例孕婦。采用realtime PCR技術(shù)對孕婦陰道分泌物或陰道-直腸分泌物進行GBS檢測，并對檢測結(jié)果進行分析。結(jié)果 10 691例孕婦中GBS感染陽性1466例（13.71%）;陰道-直腸分泌物的陽性率（16.30%）高于陰道分泌物（
中國當(dāng)代醫(yī)藥 2019年30期2019-12-16
- 子宮內(nèi)膜息肉組織中FSHR和LHR的表達及意義
用實時熒光定量PCR方法（Real-time Quantitative polymerase chain reaction，real-time PCR）以及免疫印跡方法（Southwestern blotting，WB）從基因水平以及蛋白水平測定2016年12月～2017年11月在我院行宮腔鏡下子宮內(nèi)膜息肉摘除術(shù)患者子宮內(nèi)膜息肉及其旁正常子宮內(nèi)膜中FSHR、LHR的表達差異。 結(jié)果 通過real-time PCR結(jié)果顯示子宮內(nèi)膜息肉組織中FSHR基因表達量
中國現(xiàn)代醫(yī)生 2019年27期2019-12-12
- 三種檢測方法在結(jié)核感染診斷中的比較研究
及實時熒光定量PCR檢測，且對檢測后標本陽性率進行觀察及評估。結(jié)果：實時熒光定量PCR的陽性率顯著高于抗酸特殊染色法，P0.05。結(jié)論：抗酸特殊染色法、培養(yǎng)法及實時熒光定量PCR用于結(jié)核感染診斷中具有較高的臨床價值，但實時熒光定量PCR優(yōu)勢更大，不僅操作簡單、快捷，并且診斷確診率高，值得應(yīng)用及推廣?！娟P(guān)鍵詞】 抗酸特殊染色法;培養(yǎng)法;實時熒光定量PCR;結(jié)核感染【中圖分類號】R840.5【文獻標志碼】A【文章編號】1005-0019（2019）18-218
健康大視野 2019年18期2019-10-30
- 實時熒光定量PCR檢測人感染狂犬病病毒的分析報告
過實時熒光定量PCR技術(shù)對一例疑似人感染狂犬病病毒的病例分7個時段采集其尿液及唾液標本進行實驗室檢測。結(jié)果顯示，7個唾液樣本狂犬病病毒均為陽性，7個尿液樣本中5個樣本為陽性，2個樣本為陰性，唾液樣本Ct值明顯優(yōu)于尿液樣本。本試驗對實時熒光定量PCR技術(shù)應(yīng)用到臨床檢測狂犬病病毒具有重要的參考價值。關(guān)鍵詞：狂犬病病毒;實時熒光定量PCR;檢測中圖分類號：S852.65 ? ? ? ? ? ?文獻標識碼：A ? ? ? ? ? ? ? 文章編號：1004-734
大科技·C版 2019年1期2019-09-10
- 實時熒光定量RT-PcR在麻疹和風(fēng)疹病毒檢測中的應(yīng)用
]實時熒光定量PCR;麻疹病毒;風(fēng)疹病毒;酶聯(lián)免疫吸附試驗[中圖分類號]R440 [文獻標識碼]A [文章編號]2096-5249（2019）15-0223-01麻疹、風(fēng)疹是由麻疹病毒和風(fēng)疹病毒感染引起的急性呼吸道傳染疾病，在實驗室診斷技術(shù)上，主要是使用ELISA法（酶聯(lián)免疫吸附試驗）檢測血清當(dāng)中麻疹、風(fēng)疹的特異性IgM抗體，但該方法存在一定的漏檢缺陷。所以，本次實驗我們采用對比分析的方法，采用實時熒光定量PT-PCR技術(shù)檢測麻醉、風(fēng)疹病毒，匯報其應(yīng)用價值
醫(yī)學(xué)食療與健康 2019年9期2019-09-10
- 斜紋夜蛾蛋白二硫鍵異構(gòu)酶基因的發(fā)育表達分析
以實時熒光定量PCR研究SlitPDI基因在斜紋夜蛾2齡、4齡、6齡幼蟲及蛹和新羽化雌、雄成蟲共6個不同發(fā)育時期的相對表達量?！窘Y(jié)果】SlitPDI基因編碼494個氨基酸，預(yù)測該蛋白分子量約55.3 kD，理論等電點（pI）為4.52。氨基酸序列分析結(jié)果表明，SlitPDI蛋白序列具有PDI家族的典型特征：在序列的N端及C端均具有二硫鍵/巰基氧化還原位點-CGHC-。系統(tǒng)發(fā)育進化樹分析結(jié)果表明，SlitPDI蛋白與意大利蜜蜂（Apis mellifera）
南方農(nóng)業(yè)學(xué)報 2019年5期2019-09-10
- 產(chǎn)吡咯喹啉醌的生絲微菌內(nèi)參基因的篩選和驗證
用實時熒光定量PCR（Realtime quantitative PCR， RTqPCR）技術(shù)分析生絲微菌基因組中6個候選內(nèi)參基因的相對表達情況，通過Bestkeeper、geNorm和NormFinder軟件分析，評價各個生長時期候選內(nèi)參基因的表達穩(wěn)定性，確定最合適的內(nèi)參基因。結(jié)果表明：通過對生絲微菌4個不同生長時期的6個候選內(nèi)參基因（16S rRNA、gapdh、recA、ldh、rpoB和S5）的轉(zhuǎn)錄情況進行分析和評估，6個候選內(nèi)參基因均表現(xiàn)出較強的
福建農(nóng)業(yè)科技 2019年11期2019-09-10
- 不同濃度Cd2+脅迫下煙草實時熒光定量PCR內(nèi)參基因的篩選
用實時熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測不同濃度Cd2+脅迫處理下肌動蛋白基因（ACT）、微管蛋白基因（TUB）、蛋白磷酸酶2基因（PP2A）、18S rRNA、甘油醛-3-磷酸脫氫酶基因（GAPDH）及轉(zhuǎn)錄延伸因子基因（EF1a）6個候選內(nèi)參基因的表達情況，并利用geNorm和NormFinder綜合評價Ct各內(nèi)參基因表達的穩(wěn)定性?！窘Y(jié)果】以不同濃度Cd2+脅迫處理的本生煙草cDNA為模板均可PCR擴增出ACT、TUB、18S rRNA、PP2A、GA
南方農(nóng)業(yè)學(xué)報 2019年10期2019-09-10
- 2017—2018年張家界市手足口病病原學(xué)檢測結(jié)果分析
用實時熒光定量PCR方法檢測手足口病毒核酸。結(jié)果 321份咽拭子標本中，腸道病毒核酸總陽性檢出率為34.89%（112/321），其中EV71檢出率為3.12%，CoxA16檢出率為10.90%，未分型腸道病毒檢出率為20.87%。2017年、2018年未分型腸道病毒構(gòu)成比分別為64.71%、55.73%，所占比例明顯提高。病毒核酸陽性標本以[關(guān)鍵詞] 手足口病;病原學(xué);腸道病毒核酸;實時熒光定量PCR[中圖分類號] R725.1 [文獻標識碼] A [文
中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè) 2019年15期2019-08-15
- 天津市津南區(qū)2015~2018年兒童流感病原學(xué)監(jiān)測結(jié)果分析
用實時熒光定量PCR進行流感病毒檢測，對不同流感病毒的流行進行型別和年齡分布的統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果? 共采集1783份0～14歲ILI患兒咽拭子標本，核酸陽性549份，陽性率為30.79%。季節(jié)性甲型H1N1、季節(jié)性H3型、B（Victoria）系（BV）、B（Yamaga-ta）系（BY）病毒交替流行。不同年齡組病毒陽性率呈顯著上升又下降趨勢，以6～8歲年齡組陽性率最高數(shù)（41.90%），其次為3～5歲年齡組（35.37%）。結(jié)論? 天津市津南區(qū)2015～2
醫(yī)學(xué)信息 2019年13期2019-08-14
- 2013~2018年天津市津南區(qū)0~14歲兒童季節(jié)性甲型H1N1流感病原學(xué)監(jiān)測分析
;實時熒光定量PCR中圖分類號：R511.7? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼：B? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.11.046文章編號：1006-1959（2019）11-0142-02Abstract：Objective? To analyze the epidemic situation of seasona
醫(yī)學(xué)信息 2019年12期2019-07-17
- 實時熒光PCR技術(shù)在動物疫病診斷中的應(yīng)用
：實時熒光定量PCR;動物疫病;診斷近年來，隨著實時熒光定量PCR 技術(shù)日趨成熟，多重實時熒光定量PCR （MFQ-PCR）技術(shù)也得到進一步發(fā)展。多重實時熒光定量PCR 技術(shù)，即在同一個反應(yīng)體系中，同時加入多對引物以及相應(yīng)的不同熒光分子標記的探針或者熒光染料，一次反應(yīng)對多個靶基因進行實時定量檢測，大大提高了檢測效率，這一技術(shù)優(yōu)勢使之在臨床多種病原體混合感染的篩查上具有廣闊的前景。近幾年來實時熒光定量PCR 技術(shù)，特別是多重實時熒光定量PCR 技術(shù)在動物疫病
農(nóng)家科技中旬版 2019年5期2019-07-08
- 慢性乙型肝炎患者外周血TRECs與CD45+T淋巴細胞亞群檢測的臨床意義
與實時熒光定量PCR技術(shù)分別檢測32例輕度慢乙肝患者、42例中度慢乙肝患者、38例重度慢乙肝患者以及30例健康對照人群外周血中TRECs的含量以及CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+、CD8+CD45RA+、CD8+CD45RO+T淋巴細胞亞群表達。 結(jié)果 慢性乙型肝炎患者中輕、中、重組以及健康對照組間相比CD3+/CD4+/CD8+、CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+變化均無明顯差異（P>0.05）；CD8+CD45RA+均有不同程
中國現(xiàn)代醫(yī)生 2018年23期2018-12-18
- 菏澤市2013～2017年手足口病病毒學(xué)監(jiān)測分析
用實時熒光定量PCR進行病毒的核酸檢測；用描述性流行病學(xué)方法分析流行病學(xué)特征。 結(jié)果 2013～2017年共收集樣本2751份，其中陽性樣本2294份，陽性率為83.39%；EV71陽性樣本1111份，陽性率為40.39%；CA16陽性樣本387份，陽性率為14.08%；其他腸道病毒陽性樣本796分，陽性率為28.93%。2013年、2015年優(yōu)勢株為EV71；2014年優(yōu)勢株為CA16；2016、2017年以其他腸道病毒型為優(yōu)勢株。不同年齡組、性別、季節(jié)
中國現(xiàn)代醫(yī)生 2018年22期2018-12-04
- 肥厚型心肌病相關(guān)代謝基因NCX1對大氣混合污染物處理的表達響應(yīng)
用實時熒光定量PCR檢測NCX1基因表達量。 結(jié)果 SHR大鼠低中高劑量組中NCX1基因在不同時間段均為高表達，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P[關(guān)鍵詞] 大氣混合污染物；肥厚型心肌??；NCX1；實時熒光定量PCR[中圖分類號] R542.2 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2018）21-0030-04[Abstract] Objective To detect the expression of NCX1 gene in myocardium
中國現(xiàn)代醫(yī)生 2018年21期2018-11-28
- 苦瓜枯萎病生防木霉的篩選鑒定及其定殖的qPCR檢測
用實時熒光定量PCR技術(shù)對其在苦瓜植株及土壤中的定殖能力進行檢測。結(jié)果表明：篩選得到兩株防效較好的木霉菌株M2和MX，對苦瓜枯萎病的防治效果分別達54.63%和45.72%。結(jié)合形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定，確定M2菌株為綠木霉（Trichoderma virens），MX菌株為棘孢木霉（Trichoderma asperellum）。木霉菌株M2和MX均不能在苦瓜植株中定殖，但在土壤中可以穩(wěn)定定殖。兩個木霉菌株具有應(yīng)用于苦瓜枯萎病的田間生物防治潛力。關(guān)鍵詞：綠
山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018年8期2018-11-22
- 食品檢測中分子檢測技術(shù)的應(yīng)用及實驗室管理
，實時熒光定量PCR技術(shù)憑借著其高效、迅速、精準的優(yōu)勢已成為食品安全檢測技術(shù)中的中流砥柱，進入了新階段。本文對食品檢測中實時熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用以及分子生物學(xué)實驗室的安全隱患進行了分析與總結(jié)，提出了有效的管理對策，確保了檢測環(huán)境與數(shù)據(jù)的安全。關(guān)鍵詞：分子生物學(xué)檢測技術(shù) 實時熒光定量PCR 實驗室安全中圖分類號：TS20 文獻標識碼：A 文章編號：1672-3791（2018）04（b）-0133-03眾多數(shù)據(jù)顯示，實時熒光定量PCR技術(shù)由于其不可替代的
科技資訊 2018年11期2018-10-26
- 實時熒光定量PCR在HPV檢測中的應(yīng)用研究
討實時熒光定量PCR在HPV檢測中的應(yīng)用。方法 選取2016年6月～2018年2月我院接診的宮頸病變患者180例作為研究對象，均實施陰道鏡病理學(xué)活檢，根據(jù)患者的就診編號將其隨機分為觀察組與對照組，各90例，其中觀察組給予實時熒光定量PCR，對照組給予雜交捕獲Ⅱ代法，分別對兩組患者的宮頸脫落細胞樣本進行檢測，對兩組檢測方式的結(jié)果進行比較分析。結(jié)果 觀察組患者HPV DNA陽性檢出率為93.98%，對照組81.93%，觀察組患者檢測的特異度及敏感度分別為83.
中西醫(yī)結(jié)合心血管病電子雜志 2018年22期2018-09-12
- 不同溫度組合熱處理治療柑橘黃龍病的田間效果分析
過實時熒光定量PCR（qPCR）定量分析5次熱處理后病菌含量相對其參照組的倍數(shù)，分析柑橘黃龍病菌在經(jīng)過熱處理后的變化趨勢?！窘Y(jié)果】處理2和處理3的平均溫度均超過38.0 ℃，最高溫度分別為49.3和42.3 ℃；5次熱處理后病樹體內(nèi)病菌含量顯著下降（P關(guān)鍵詞： 柑橘黃龍??；熱處理；實時熒光定量PCR中圖分類號： S436.661.1 文獻標志碼：A 文章編號：2095-1191（2018）07-1346-050 引言【研究意義】柑橘黃龍病（Huanglon
南方農(nóng)業(yè)學(xué)報 2018年7期2018-09-10
- 玉米和牧草典型種植模式下不同土層中土壤微生物量分布差異的研究
；實時熒光定量PCR；PLFA中圖分類號：X171文獻標識碼：A文章編號：1008-0457（2018）04-0051-007 國際DOI編碼：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2018.04.008Study on Different Land Uses and Soil Layers on Soil Microbial Biomass Distribution of Maize and GuimuyihaoWANG Guihong1，2
山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報 2018年4期2018-09-10
- 麻瘋樹雌雄花中MADS—BOX基因的表達分析
實時熒光定量PCR中圖分類號： Q945.4， Q75文獻標識碼： A文章編號： 1000-3142（2018）02-0180-08Expression analysis on MADS-BOX genes in male and female flowers of Jatropha curcasLIAO Wang， YAN Xiaoxue， WU Jun， CHEN Fang*（ College of Life Sciences， Sichuan Un
廣西植物 2018年2期2018-09-10
- 不同時段尿標本檢測巨細胞病毒在小兒人巨細胞病毒感染中的應(yīng)用
用實時熒光定量PCR技術(shù)對不同時段尿標本人巨細胞病毒DNA水平進行檢查，對比兩組陽性檢出率。結(jié)果 晨尿組，27例檢出人巨細胞病毒陽性，檢出率為90.00%，隨機時段組，20例檢出人巨細胞病毒陽性，檢出率66.67%，晨尿組明顯高于隨機時段組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P[關(guān)鍵詞]人巨細胞病毒；小兒；實時熒光定量PCR；不同時段[中圖分類號] R446.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2018）4（c）-0119-03Detection o
中國當(dāng)代醫(yī)藥 2018年12期2018-06-16
- 熒光定量PCR技術(shù)的原理及其在植物研究中的應(yīng)用
要實時熒光定量PCR技術(shù)，因其具有操作簡單、重復(fù)性好、靈敏度高、定量準確、速度快等優(yōu)點，已廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)研究的多個領(lǐng)域。對實時熒光定量PCR技術(shù)的原理、定量方法以及在植物研究中的應(yīng)用等進行概述，以促進該技術(shù)的應(yīng)用。關(guān)鍵詞實時熒光定量PCR；原理；應(yīng)用中圖分類號S126文獻標識碼A文章編號0517-6611（2018）25-0036-05Principles and Applications of Fluorescent Quantitative PC
安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018年25期2018-05-14
- qRT-PCR法分析復(fù)發(fā)性SLE患者腸道雙歧桿菌、柔嫩梭菌數(shù)量的變化
;實時熒光定量PCR中圖分類號：R593.241 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻標識碼：A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.05.022文章編號：1006-1959（2018）05-0065-05Analysis of the Changes of Intestinal Bifidobacterium and Clostrid
醫(yī)學(xué)信息 2018年5期2018-04-20
- 在醫(yī)學(xué)檢驗中應(yīng)用實時熒光定量PCR的研究進展
，實時熒光定量PCR技術(shù)是醫(yī)學(xué)檢驗中重要的方法，實時熒光定量PCR技術(shù)也正在不斷地完善細節(jié)，是重要的實驗工具?！娟P(guān)鍵詞】醫(yī)學(xué)檢驗；應(yīng)用、實時熒光定量PCR；研究；進展【中圖分類號】Q503 【文獻標識碼】A 【文章編號】ISSN.2095-6681.2017.35..02實時熒光定位PCR由于測定速度快、測定結(jié)果精準，實時熒光定位PCR的敏感性強，因此適用于醫(yī)學(xué)檢測。實時熒光定位PCR是指在原有的PCR反應(yīng)體系當(dāng)中加入熒光基團，通過熒光基團實時的檢測和控制
中西醫(yī)結(jié)合心血管病電子雜志 2017年35期2018-03-29
- 血鸚鵡TYR基因表達qPCR分析的引物設(shè)計與評估
用實時熒光定量PCR（qPCR）技術(shù)分析血鸚鵡的酪氨酸酶（tyrosinase，TYR）基因的表達譜，通過Primer 5 軟件設(shè)計擴增血鸚鵡TYR基因片段的引物并進行qPCR評估研究。結(jié)果顯示，引物TYR2F-TYR2R在qPCR擴增時，融解曲線為單一尖銳峰；標準曲線分析顯示，引物的擴增效率為103.3%，R2值為0.994。上述結(jié)果說明該對引物具有良好的擴增特異性和擴增效率，滿足了qPCR擴增的要求，該研究結(jié)果可為血鸚鵡TYR基因表達的qPCR分析奠定
天津農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018年12期2018-01-15