舒然

【摘 要】 目的：探討三種檢測(cè)方法在結(jié)核感染診斷中的比較。方法：選取2017年02月至2018年10月的52例疑似結(jié)核感染患者作為研究對(duì)象，均采用抗酸特殊染色法、培養(yǎng)法及實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，且對(duì)檢測(cè)后標(biāo)本陽(yáng)性率進(jìn)行觀察及評(píng)估。結(jié)果：實(shí)時(shí)熒光定量PCR的陽(yáng)性率顯著高于抗酸特殊染色法，P<0.05;但與培養(yǎng)法相比無(wú)明顯差異，P>0.05。結(jié)論：抗酸特殊染色法、培養(yǎng)法及實(shí)時(shí)熒光定量PCR用于結(jié)核感染診斷中具有較高的臨床價(jià)值，但實(shí)時(shí)熒光定量PCR優(yōu)勢(shì)更大，不僅操作簡(jiǎn)單、快捷，并且診斷確診率高，值得應(yīng)用及推廣。

【關(guān)鍵詞】 抗酸特殊染色法;培養(yǎng)法;實(shí)時(shí)熒光定量PCR;結(jié)核感染

【中圖分類號(hào)】R840.5

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

【文章編號(hào)】1005-0019（2019）18-218-01

結(jié)核病是臨床上較為常見的一種慢性傳染病，具有極強(qiáng)的傳染性，通過(guò)結(jié)核分枝桿菌侵襲肺部組織所引起的一種疾病，若不及時(shí)進(jìn)行有效治療，能夠逐漸侵入機(jī)體全身各種器官，誘發(fā)嚴(yán)重并發(fā)癥，為此盡早進(jìn)行診治十分重要，對(duì)控制疾病發(fā)展具有重要意義[1];我院為了探討三種檢測(cè)方法在結(jié)核感染診斷中的比較，選取52例疑似結(jié)核感染患者作為研究對(duì)象，見正文描述：

1 資料與方法

1.1 臨床資料

本次選取2017年02月至2018年10月的52例疑似結(jié)核感染患者作為研究對(duì)象，均采用抗酸特殊染色法、培養(yǎng)法及實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，且對(duì)檢測(cè)后標(biāo)本陽(yáng)性率進(jìn)行觀察及評(píng)估;其中男性受檢人員共26例、女性受檢人員共26例;平均年齡值（42.32±2.05）歲，年齡范圍24-65歲。

1.2 方法

抗酸特殊染色法：先將標(biāo)本涂抹于載玻片上，其次進(jìn)行染色處理，染色完成后采用顯微鏡觀察載玻片，且根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告計(jì)數(shù)。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR：痰液樣本中加入4%NaOH溶液，隨后振蕩，以便于將兩者混勻，放置30min后，取液化后的標(biāo)本（500μl）進(jìn)行離心處理，12000rpm，離心3min，且將上清吸除干凈后加入生理鹽水（1ml）行離心處理，再吸除上清，加入核酸釋放劑（50μl），在100℃環(huán)境下處理，時(shí)間為10min，再行離心處理，其中將上清作為待測(cè)樣本，且加入處理后的5μl待測(cè)樣本與40μlPCR-mix，上機(jī)檢測(cè)。

痰培養(yǎng)法---采用酸性改良羅氏培養(yǎng)基，按照說(shuō)明書步驟執(zhí)行操作。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察及評(píng)估52例疑似結(jié)核感染患者經(jīng)三種檢測(cè)方法檢測(cè)后標(biāo)本陽(yáng)性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)

文中計(jì)數(shù)資料選擇SPSS21.00軟件分析，以（x±s）與百分比表示，卡方值與T值檢驗(yàn)，以P<0.05，表示統(tǒng)計(jì)學(xué)存在對(duì)比價(jià)值。

2 結(jié)果

標(biāo)本陽(yáng)性率觀察

實(shí)時(shí)熒光定量PCR的陽(yáng)性率顯著高于抗酸特殊染色法，P<0.05;但與培養(yǎng)法相比無(wú)明顯差異，P>0.05;見表1：

3 討論

肺結(jié)核是臨床上較為常見疾病之一，同時(shí)也是一種傳染性疾病，即是由結(jié)核分枝桿菌侵襲肺部所引起的一種慢性疾病;經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)該病每年發(fā)病人數(shù)約占130萬(wàn)人次，且占全球總發(fā)病率14%左右，即在全球位居第二[2];該病早期無(wú)典型臨床表現(xiàn)，若是僅依據(jù)體征及癥狀進(jìn)行確診，極其容易發(fā)生誤診事件，即誤診為呼吸道感染，且在一定程度上耽誤疾病治療，為此早期進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)十分重要，有利于為臨床診治提供客觀依據(jù)，對(duì)控制病情發(fā)展及改善預(yù)后具有積極作用;目前臨床上采用抗酸特殊染色法、培養(yǎng)法及實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)患者機(jī)體是否存在結(jié)核分枝桿菌[3];第一種檢測(cè)方法雖然應(yīng)用較為廣泛，但是仍存在一定局限性，即非特異性，100余種的分枝桿菌同樣可呈抗酸染色陽(yáng)性，加上抗酸桿菌形態(tài)及大小變化不一致，可導(dǎo)致結(jié)果判斷存在差異性，與此同時(shí)還能在一定程度上受菌體分布不均勻等因素的影響，發(fā)生客觀漏診事件;第二種檢測(cè)方法是臨床上的金標(biāo)準(zhǔn)，通過(guò)專門的培養(yǎng)皿在特殊外界環(huán)境中培養(yǎng)菌群，但是培養(yǎng)周期較長(zhǎng)，無(wú)法在短時(shí)間內(nèi)給出結(jié)論，并且實(shí)驗(yàn)操作較為復(fù)雜，同樣可發(fā)生假陽(yáng)性率及假陰性率[4];第三種檢測(cè)方法則是將PCR、雜交及廣譜等技術(shù)相結(jié)合，且通過(guò)加入熒光標(biāo)記探針，實(shí)現(xiàn)檢測(cè)標(biāo)本中結(jié)核分枝桿菌的目標(biāo)，具有具有操作簡(jiǎn)單、方便、敏感度高、特異性高等優(yōu)勢(shì)，為此在臨床上得到廣泛應(yīng)用及推廣，但是經(jīng)調(diào)查發(fā)生不規(guī)則的實(shí)驗(yàn)室操作步驟仍可發(fā)生假陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果，為此操作人員在實(shí)驗(yàn)操作細(xì)節(jié)方法需特別注意以下幾點(diǎn)：①密封性、②加樣完全、③一次性耗材使用、④專區(qū)專用、⑤避免污染;只要做到規(guī)范操作就可避免假陽(yáng)性事件的發(fā)生，對(duì)提高檢測(cè)確診率具有積極作用[5]。

總而言之，抗酸特殊染色法、培養(yǎng)法及實(shí)時(shí)熒光定量PCR用于結(jié)核感染診斷中具有較高的臨床價(jià)值，但實(shí)時(shí)熒光定量PCR優(yōu)勢(shì)更大，不僅操作簡(jiǎn)單、快捷，并且診斷確診率高，值得應(yīng)用及推廣。

參考文獻(xiàn)

[1] 張志勇， 毛志方， 王芹. 三種檢測(cè)方法在結(jié)核感染診斷中的比較研究[J]. 基層醫(yī)學(xué)論壇， 2017， 21（7）：845-846.

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[3] 墻建軍， 夏飛， 雷應(yīng)軍，等. 3種檢測(cè)方法診斷結(jié)核性胸膜炎的對(duì)比分析[J]. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志， 2018， 27（9）：1002-1005.

[4] 李曉非， 黃山， 梁桂亮，等. 6種檢測(cè)方法在HIV合并結(jié)核分枝桿菌感染診斷中的應(yīng)用價(jià)值分析[J]. 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床， 2017， 14（3）：378-380.

[5] 滕曉梅. 結(jié)核感染T細(xì)胞、結(jié)核抗體、抗酸染色3種方法的臨床評(píng)價(jià)[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2016， 37（8）：1149-1150.