卓訓(xùn)妮

摘要：目的：了解欽州市新型冠狀病毒肺炎感染情況，為疫情防控工作提供依據(jù)。方法：采用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法對(duì)欽州市2020年各縣（區(qū)）和海關(guān)送檢的標(biāo)本進(jìn)行新型冠狀病毒核酸檢測(cè)，收集陽(yáng)性病例流行病學(xué)調(diào)查資料，統(tǒng)計(jì)分析檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果：在36656份上呼吸道標(biāo)本中，共檢出新型冠狀病毒核酸陽(yáng)性10例，其中8例為無(wú)國(guó)外旅行史人員，檢出率為0.02%（8/36273），2例為輸入性外籍船員，檢出率為0.52%（2/383），兩類(lèi)人群檢出率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01，X2=34.760）。10例陽(yáng)性病例中，男性7例，女性3例，男女比為2.33∶1;最小年齡12歲，最大年齡50歲;輕型2例，普通型4例，無(wú)癥狀感染者4例，無(wú)死亡病例。本地8例病例中，6例為家庭聚集性病例。結(jié)論：入境船員是高危人群，應(yīng)密切聯(lián)系港口相關(guān)部門(mén)，加強(qiáng)監(jiān)測(cè)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和隔離陽(yáng)性病例，加強(qiáng)疫情防控知識(shí)宣傳，開(kāi)展群防群控，防止疫情爆發(fā)流行。

關(guān)鍵詞：新型冠狀病毒;核酸;實(shí)時(shí)熒光定量PCR;檢測(cè);分析

Abstract： Objective： to understand the infection situation of COVID-19 in Qinzhou and to provide basis for epidemic prevention and control. Methods： real time fluorescence RT-PCR was used to detect COVID-19 nucleic acids in samples collected from counties （districts） and customs in Qinzhou in 2020， and the epidemiological data of positive cases were collected， and the results were analyzed statistically. Results： among the 36656 upper respiratory tract specimens， 10 cases were found positive for COVID-19 nucleic acid， 8 of them were non foreign travel history personnel， the detection rate was 0.02% （8/36273）， 2 cases were imported foreign sailors， the detection rate was 0.52% （2/383）， and the detection rate of two groups was statistically significant （P< 0.01， x2=34.760）. Among the 10 positive cases， 7 were male and 3 were female， the ratio of male to female was 2.33∶1; The youngest was 12 years old and the oldest was 50 years old; There were 2 mild cases， 4 common cases， 4 asymptomatic cases and no death cases. Among the 8 local cases， 6 were family cluster cases. Conclusion： the entry crew is a high-risk group， we should closely contact the relevant departments of the port， strengthen monitoring， timely detect and isolate positive cases， strengthen the publicity of epidemic prevention and control knowledge， carry out group prevention and control， and prevent the outbreak of the epidemic.

Keywords： COVID-19; Nucleic acids; Real time fluorescence RT-PCR; Test; Analysis

一、前言

新型冠狀病毒肺炎（新冠肺炎，COVID-19）為新發(fā)急性呼吸道傳染病，由新型冠狀病毒（2019-nCoV）引起[1]，目前已肆虐全球。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，截至2021年4月8日，全球累計(jì)新冠肺炎確診病例1.324億例，累計(jì)死亡病例2875672例，新冠肺炎已嚴(yán)重危害人類(lèi)的身心健康和社會(huì)的經(jīng)濟(jì)發(fā)展。本實(shí)驗(yàn)室自疫情爆發(fā)以來(lái)，積極開(kāi)展病原檢測(cè)工作，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法對(duì)欽州市疑似新冠肺炎病例及其他排查者標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，截止2020年12月31日，共完成36656份上呼吸道標(biāo)本新型冠狀病毒核酸檢測(cè)。本文對(duì)2020年本市各縣（區(qū)）及海關(guān)送檢標(biāo)本的核酸檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，了解欽州市新型冠狀病毒肺炎感染情況，為進(jìn)一步做好疫情防控提供依據(jù)。

二、材料與方法

（一）標(biāo)本來(lái)源及保存

所有標(biāo)本來(lái)自欽州市轄區(qū)內(nèi)各市縣（區(qū)）和海關(guān)，于2020年1月21日至2020年12月31日冷藏送至本中心實(shí)驗(yàn)室的疑似新冠肺炎病例和其他排查者標(biāo)本，共36656份，其中36088份為咽拭子標(biāo)本，568份為鼻咽拭子標(biāo)本;無(wú)境外旅行史人員標(biāo)本36273份，入境船員標(biāo)本383份;在24 h內(nèi)檢測(cè)的標(biāo)本置于4℃保存，24 h內(nèi)無(wú)法檢測(cè)的標(biāo)本置于-70℃或以下保存。

（二）病毒RNA提取試劑

采用西安天隆科技有限公司生產(chǎn)的RNA提取試劑盒。

（三）病毒核酸檢測(cè)試劑

采用上海伯杰醫(yī)療科技有限公司2019新型冠狀病毒（ORFlab/N基因）核酸檢測(cè)試劑盒（雙重?zé)晒釶CR法）。

（四）檢測(cè)方法

依據(jù)國(guó)家衛(wèi)生健康委辦公廳發(fā)布的《新型冠狀病毒實(shí)驗(yàn)室生物安全指南》（第二版）[2]和《新型冠狀病毒肺炎防控方案》[3]進(jìn)行生物安全防護(hù)和實(shí)驗(yàn)操作，采用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法進(jìn)行檢測(cè)，嚴(yán)格按試劑說(shuō)明書(shū)操作，結(jié)果判讀以試劑盒說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

（五）主要儀器設(shè)備

1. ABI7500型熒光定量PCR儀。

2. NP968-C西安天隆核酸提取儀。

3. 恒溫水浴箱。

（六）質(zhì)量控制

每次實(shí)驗(yàn)均設(shè)陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照和外部質(zhì)控，陰性對(duì)照Ct值>38或未檢出，陽(yáng)性對(duì)照的擴(kuò)增曲線呈S型，且Ct值≤30，同一實(shí)驗(yàn)必須滿足這兩個(gè)條件，否則實(shí)驗(yàn)結(jié)果視為無(wú)效;樣本內(nèi)標(biāo)須正常檢出，有明顯的S線。所有陽(yáng)性標(biāo)本均上送廣西壯族自治區(qū)疾病預(yù)防控制中心復(fù)核確認(rèn)。

（七）結(jié)果判讀

嚴(yán)格按照《新型冠狀病毒肺炎防控方案》附件6新型冠狀病毒肺炎實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)指南[3]判定，實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)陽(yáng)性病例需滿足以下兩個(gè)條件中的一個(gè)：第一，同一份標(biāo)本中新型冠狀病毒2個(gè)靶標(biāo)（ORFlab、N），實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性，如果出現(xiàn)單個(gè)靶標(biāo)陽(yáng)性的檢測(cè)結(jié)果，則需要重新采樣，重新檢測(cè)。如果仍然為單靶標(biāo)陽(yáng)性，判定為陽(yáng)性。第二，兩種標(biāo)本實(shí)時(shí)熒光RT-PCR同時(shí)出現(xiàn)單靶標(biāo)陽(yáng)性，或同種類(lèi)型標(biāo)本兩次采樣檢測(cè)中均出現(xiàn)單個(gè)靶標(biāo)陽(yáng)性的檢測(cè)結(jié)果，可判定為陽(yáng)性。結(jié)合試劑盒說(shuō)明書(shū)，由Ct值大小及擴(kuò)增曲線圖進(jìn)行判斷：Ct值>38或未檢出，判為陰性;當(dāng)擴(kuò)增曲線呈S型，且Ct值≤ 35，判為陽(yáng)性;當(dāng)擴(kuò)增曲線呈S型，且35MNzfaiBvD1eJJTj4YC6T6Q56Q+DiXQRJykptb1vOknY=