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        應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法在梅毒螺旋體抗體檢測(cè)中的作用

        2014-11-17 06:07:48林炳柱劉小燕
        中外醫(yī)療 2014年5期
        關(guān)鍵詞:梅毒作用

        林炳柱 劉小燕

        [摘要]目的 探討化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法在梅毒螺旋體抗體檢測(cè)中所起的作用。 方法 選取160例梅毒患者及135例非梅毒患者的血清,分別采用化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法、RPR法、TPPA法分別檢測(cè)血清中的梅毒螺旋體抗體。結(jié)果 對(duì)照組的敏感性分別為97.0%、76.3%和98.3%。RPR法的敏感性與特異性明顯低于化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法、TPPA法,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法和TPPA法相比,敏感性和特異性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 梅毒的化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法的敏感性和特異性較高,是一種方便、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法。

        [關(guān)鍵詞] 梅毒;作用;化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法

        [中圖分類號(hào)] R446.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742(2014)02(b)-0010-03

        梅毒是感染梅毒螺旋體后引起的一種易傳染的性傳播疾病[1]。梅毒是一種易傳染、危害性大的人類性傳播疾病[2-4]。血清學(xué)檢測(cè)梅毒螺旋體抗體的方法已經(jīng)被我國(guó)衛(wèi)生部列為手術(shù)前、孕婦產(chǎn)前的必檢項(xiàng)目,血清學(xué)檢測(cè)梅毒螺旋體抗體的方法是診斷梅毒的重要依據(jù)之一[5-6]。因此,選擇特異性強(qiáng)、敏感性高的實(shí)驗(yàn)方法非常有助于梅毒的診治。為探討化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法在梅毒螺旋體抗體檢測(cè)中所起的作用,該研究選擇該院臨床中心2012—2013年收治的160例梅毒患者為研究對(duì)象,現(xiàn)報(bào)道如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選擇該院臨床中心的160例梅毒患者血清與135例非梅毒患者的血清為實(shí)驗(yàn)標(biāo)本,梅毒患者血清標(biāo)本通過(guò)真空促凝管采集靜血漿3 mL,將血清分離,保存在4~8 ℃的冰箱,待檢測(cè)[7-9]。

        1.2 儀器與試劑

        CLIA試劑盒、TPPA試劑盒均為日本富士瑞必歐生物技術(shù)有限公司,RPR試劑盒為上海榮盛生物科技有限公司。

        1.3 方法

        將160份梅毒患者血清與135例非梅毒患者血清標(biāo)本分別同時(shí)進(jìn)行CLIA和TPPA檢測(cè),比較兩種方法的不同之處。

        將160份梅毒患者血清與135例非梅毒患者血清,進(jìn)行CLIA檢測(cè)結(jié)果顯示為陽(yáng)性時(shí),再進(jìn)行TPPA和RPR檢測(cè),探討TPPA陽(yáng)性結(jié)果的S/CO值與TPPA、RPR之間有何聯(lián)系。所有進(jìn)行檢測(cè)的試劑均達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求,且操作均按照操作說(shuō)明書操作[10]。

        1.4 統(tǒng)計(jì)方法

        采用SPSS14.2軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)數(shù)資料進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。

        2 結(jié)果

        ①160份梅毒患者血清中,CLIA法檢測(cè)陽(yáng)性151份,TPPA陽(yáng)性130份,以回歸分析結(jié)果為參考,CLIA法的陽(yáng)性率為93.75%,TPPA法的陽(yáng)性率為82.50%,兩種方法差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.8,P<0.05)。

        ②135份非梅毒患者血清中,CLIA法檢測(cè)陽(yáng)性率為2.28%,TPPA法檢測(cè)陽(yáng)性率為9.28%,RPR陽(yáng)性法檢測(cè)陽(yáng)性率為10.37%。CLIA的S/CO值在2~11有3份,其中TTPA陽(yáng)性12份,RPR陽(yáng)性14份;738份,TPPA均為陽(yáng)性,RPR陽(yáng)性7份。CLIA法陽(yáng)性S/CO值與TPPA,RPR法所測(cè)結(jié)果關(guān)系,見(jiàn)表1。

        ③CLIA與TPPA結(jié)果不一致的21份,經(jīng)RPR法檢測(cè),陽(yáng)性4份,1份含TP31、TP47條帶,3份含TP32、TP47條帶,1份 含TP17、TP32、TP47條 帶,檢測(cè)結(jié)果未顯示出的4份,為TP45陽(yáng)性。14份RPR法檢測(cè)陰性的標(biāo)本,通過(guò)CLIA法驗(yàn)證也均為陰性 [11]。

        3 討論

        梅毒對(duì)人體的危害多種多樣,越早對(duì)梅毒的確診,有利于患者得到全面有效的治療,有利于患者疾病的快速康復(fù)。梅毒臨床確診按照梅毒病毒的特異性抗體的檢測(cè)和患者的臨床癥狀作為判斷依據(jù)[12]。TP-ELISA適合數(shù)量較大的操作,但測(cè)量結(jié)果經(jīng)常遇到假陽(yáng)性的情況[13]。CLIA技術(shù)是ELISA技術(shù)的更新技術(shù),以敏感的化學(xué)發(fā)光底物代替原始的底物,其特點(diǎn)是信號(hào)模式可被酶增強(qiáng),而且發(fā)光信號(hào)時(shí)間被保持和拉長(zhǎng)了,一方面保留了發(fā)光免疫分析超高的敏感性,另一方面也避免了傳統(tǒng)光信號(hào)持續(xù)時(shí)間較短等缺點(diǎn)。過(guò)氧化物酶催化魯米諾發(fā)光和堿性磷酸酶催化金剛烷衍生物的方法是當(dāng)今較為常用的兩種方法。CLIA法對(duì)各期梅毒的靈敏性和特異性均>97.5%,因此其也成為一種新興的檢測(cè)梅毒的方法[14]。

        該研究發(fā)現(xiàn), CLIA法的陽(yáng)性符合率高于TPPA法。研究發(fā)現(xiàn),CLIA法為陽(yáng)性結(jié)果時(shí),S/CO值較低時(shí)TPPA會(huì)出現(xiàn)陰性結(jié)果, RPR法發(fā)現(xiàn)14份為陰性,CLIA法驗(yàn)證結(jié)果也為陰性,由此可說(shuō)明CLIA法的靈敏度明顯高于TPPA法;此外,實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)假陽(yáng)性的結(jié)果可能是標(biāo)本處理不當(dāng)導(dǎo)致的。

        采用RPR法檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的為4份,1份為TP17、TP45條帶,2份為TP45、TP47條帶,1份為TP32、TP45、TP47條帶。這是由于CLIA包被的梅毒抗原特異性導(dǎo)致的,而TPPA采用的抗原是提純后的致病性梅毒螺旋體菌體,對(duì)TP15、TP17、的抗體選擇性較強(qiáng),當(dāng)僅有TP15、TP17抗體時(shí),TPPA只會(huì)出現(xiàn)陰性。有研究發(fā)現(xiàn)梅毒早期診斷的指標(biāo)之一為TP47 [15],活動(dòng)期梅毒標(biāo)志的抗體之一是TP15 [16]。因此推測(cè),9份抗體梅毒標(biāo)本可能屬于早期感染或隱性感染的患者,在早期或隱性梅毒感染中的檢測(cè)CLIA法比TPPA具有更高的靈敏度。

        綜上,CLIA作為一種新開發(fā)的梅毒抗體檢測(cè)試劑,相比TPPA具有非常明顯的優(yōu)勢(shì),且容易操作、自動(dòng)化技術(shù)高、結(jié)果判斷準(zhǔn)確且重復(fù)性較好等優(yōu)勢(shì),有望成為臨床上廣泛使用的一種方法。

        [參考文獻(xiàn)]

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        (收稿日期:2014-01-05)

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