江洪波 夏清 張志強(qiáng)
摘要:目的:鑒別血竭與龍血竭。方法:采用紫外光譜法和高效液相色譜法進(jìn)行比較鑒別。結(jié)果:血竭與龍血竭紫外光譜和高效液相色譜差異顯著。結(jié)論:UV與HPLC法可快速鑒別血竭與龍血竭。
關(guān)鍵詞:血竭;龍血竭;紫外光譜;高效液相色譜;鑒別
血竭為棕櫚科植物麒麟竭(Daemonorops draco Bl.)果實(shí)滲出的樹(shù)脂經(jīng)加工制成,為2015中國(guó)藥典收載。龍血竭百合科劍葉龍血樹(shù)的樹(shù)脂。
血竭含有黃酮類(lèi)衍生物血竭素、血竭紅素等;龍血竭不含以上成分,含二氫查爾酮類(lèi)化合物(劍龍血素A、劍龍血素B)、脂肪烴、脂肪酮和酯類(lèi)化合。二者化學(xué)成分差異較大,粉碎后均為磚紅色粉末,外觀極為相似,直觀鑒別有難度。
血竭與龍血竭市場(chǎng)價(jià)格差異巨大,血竭市場(chǎng)價(jià)格每千克3700元左右,龍血竭市場(chǎng)價(jià)格每千克700元左右。醫(yī)院、藥店經(jīng)常相互混淆,甚至某些標(biāo)準(zhǔn)品公司提供的產(chǎn)品都將龍血竭當(dāng)血竭提供。因此試用紫外光譜法區(qū)別二者,以提供快速鑒別方法。
1 儀器與材料
1.1 儀器
SENCOR201旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海申順生物科技有限公司);SHZⅢ型循環(huán)水真空泵(上海亞榮生化儀器廠);TU1900型雙光束紫外分光光度計(jì)(北京普析有限責(zé)任公司);1260液相色譜儀(安捷倫);色譜柱:ZPRBAX SBC18 4.6×150mm,5μm;怡寶純凈水;電子天平OHAUS DV215CD。
1.2 藥材與試劑
本實(shí)驗(yàn)共收集5個(gè)血竭與龍血竭樣品,樣品來(lái)源信息見(jiàn)下表。
2 方法與結(jié)果
2.1 紫外可見(jiàn)光譜法
2.1.1 供試品溶液的制備
精密稱(chēng)定樣品15藥材2.0mg,取適量色譜甲醇溶解后,轉(zhuǎn)置10mL容量瓶,色譜甲醇定容,即得供試品溶液。
2.1.2 紫外可見(jiàn)光譜的測(cè)定
用供試品溶液同批色譜甲醇做空白校準(zhǔn)基線,對(duì)樣品15用紫外可見(jiàn)光分光度計(jì)掃描,測(cè)定波長(zhǎng)范圍1901100nm,結(jié)果見(jiàn)圖1。
由圖1可見(jiàn),樣品1和樣品4光譜相似,在222nm有最大最強(qiáng)吸收峰。樣品2、3和5光譜相似,在222nm及280nm處有兩個(gè)最大最強(qiáng)吸收峰。通過(guò)光譜可以初步判斷樣品1和4為同一種藥材,樣品2、3和5為同一種藥材。
2.2 高效液相色譜法
2.2.1 供試品溶液的制備
取2.1.1項(xiàng)下供試品15過(guò)用0.45μm 濾膜過(guò)濾后,即得。
2.2.2 高效液相色譜的測(cè)定
根據(jù)圖1紫外可見(jiàn)光譜,樣品最大吸收峰在222nm和280nm左右,故分別在280nm和222nm測(cè)定樣品15的高效液相色譜。經(jīng)過(guò)篩選,選用分離條件較好的色譜條件:甲醇:水(80:20)為流動(dòng)相,柱溫35℃,流速1.0mL·min1。2.2.1項(xiàng)下樣品15直接進(jìn)樣20μL測(cè)定,得樣品色譜圖,結(jié)果見(jiàn)圖2和圖3。
圖3顯示樣品1和4的HPLC圖譜相同,在3min左右有最大吸收峰面積。樣品2、3和5在2.0min左右有最大吸收峰。在280nm檢測(cè)條件下,兩組HPLC圖譜差異明顯。
3 結(jié)果與討論
(1)從紫外可見(jiàn)光譜及高效液相色譜圖譜可以看出,樣品1和4為同一品種,樣品1來(lái)自于中國(guó)生物制品鑒定所,為血竭(棕櫚科植物麟麟竭Daemonorops draco Bl.果實(shí)滲出的樹(shù)脂經(jīng)加工制成),故樣品4也應(yīng)為血竭正品。樣品2、3和5為同一樣品,樣品5為自于西雙版納某藥業(yè)公司產(chǎn)品,為龍血竭(百合科植物劍葉龍血樹(shù)Dranacna cochinnensis(Lour.)S.C.Chen的含脂木材經(jīng)提取得到的樹(shù)脂),樣品2和3也應(yīng)為龍血竭。
樣品2和3分別來(lái)自于某中醫(yī)院和某標(biāo)準(zhǔn)品公司,標(biāo)注為血竭,但由上述內(nèi)容判定樣品2和3均應(yīng)為龍血竭藥材。只有某中藥房的樣品4為血竭正品。
(2)血竭和龍血竭的紫外可見(jiàn)光譜差異明顯,血竭只在222nm處有一強(qiáng)吸收峰(圖4),而龍血竭在222nm和280nm處有兩處吸收強(qiáng)度相當(dāng)?shù)膹?qiáng)吸收峰(圖5)。故通過(guò)與血竭標(biāo)準(zhǔn)紫外可見(jiàn)光譜的對(duì)比(圖4),可快速鑒別血竭,區(qū)分出龍血竭。該方法儀器要求不高,操作過(guò)程簡(jiǎn)單,可快速鑒別區(qū)分,非常適用于醫(yī)院中藥房,醫(yī)藥公司及標(biāo)準(zhǔn)藥材公司,可以避免主觀判斷失誤而出現(xiàn)差錯(cuò)。
(3)血竭和龍血竭的高效液相色譜圖差異顯著,通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)圖譜比較,也可快速鑒別血竭,區(qū)分出龍血竭。但此方法比紫外光譜鑒別法操作較為繁瑣,設(shè)備要求較高。
高效液相色譜圖譜也表明血竭和龍血竭主要化學(xué)成分差異很大,故不可混用二者,以免影響療效。
參考文獻(xiàn):
[1]王曉丹,滕玉芳,郝吉福,等.中成藥[J].不同來(lái)源血竭的研究進(jìn)展,2013,35(8):17521753.
作者簡(jiǎn)介:江洪波(1976),博士,副教授,研究方向:中藥活性成分及中藥標(biāo)準(zhǔn)化研究。