向　瑤，辛力華，王　芳，楊朝國△

(1.成都中醫(yī)藥大學醫(yī)學技術學院　611137；2.成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院檢驗科　610032)

·論著·

成都地區(qū)銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌耐藥性變化分析

向瑤1，辛力華2，王芳2，楊朝國1△

(1.成都中醫(yī)藥大學醫(yī)學技術學院611137；2.成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院檢驗科610032)

摘要:目的了解成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院2012～2014年分離的銅綠假單胞菌及鮑曼不動桿菌耐藥性的動態(tài)變化，為臨床合理制訂抗菌方案提供依據。方法對成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院2012年1月至2014年12月住院患者送檢臨床標本進行常規(guī)細菌培養(yǎng)，對臨床分離病原菌采用梅里埃VITEK-2 Compact系統(tǒng)進行細菌鑒定和藥敏試驗。結果銅綠假單胞菌對多種抗菌藥物的耐藥率呈逐年下降趨勢，2014年下降尤為明顯，對阿米卡星的最小抑菌濃度值呈逐年下降趨勢。鮑曼不動桿菌對頭孢唑啉、頭孢曲松和呋喃妥因耐藥率大于90.0%，對多種抗菌藥物的耐藥率2013年較2012年明顯增加，但2014年與2013年相比增加不明顯，甚至有所下降。結論在成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，銅綠假單胞菌耐藥性并非逐年加重，反而有所改善。鮑曼不動桿菌耐藥情況較為嚴重，但未出現繼續(xù)增加趨勢，對兩種細菌的耐藥性應繼續(xù)監(jiān)測。

關鍵詞:銅綠假單胞菌；鮑曼不動桿菌；細菌耐藥；最小抑菌濃度

銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌均是醫(yī)院感染的重要病原菌，鮑曼不動桿菌可引起各種感染，尤其易造成危重患者的感染。銅綠假單胞菌引起的很多感染發(fā)生在衰弱或免疫受損的住院患者。在非發(fā)酵菌感染中，銅綠假單胞菌分離率最高，其次為鮑曼不動桿菌，有研究顯示這兩種細菌對常用抗菌藥物的耐藥率有逐年增加的趨勢[1-2]。本研究對成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院2012～2014年分離的銅綠假單胞菌及鮑曼不動桿菌耐藥性進行分析，并對有較高敏感率的阿米卡星和碳青霉烯類抗菌藥物(亞胺培南、美羅培南)的最小抑菌濃度(MIC)值進行分析，現報道如下。

1材料與方法

1.1菌株來源2012年1月至2014年12月成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院住院患者送檢的合格痰液、尿液、血液、分泌物等標本(剔除相同患者近期送檢標本所分離出的相同病原菌)中分離的銅綠假單胞菌共982株，鮑曼不動桿菌共1 018株。

1.2儀器與試劑細菌培養(yǎng)及分離鑒定嚴格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行。采用法國生物梅里埃公司VITEK-2 Compact細菌分析鑒定和藥敏試驗系統(tǒng)并使用其配套的鑒定及藥敏卡。質控菌株為銅綠假單胞菌(ATCC 27853)，大腸埃希菌(ATCC 25922)。

1.3耐藥判斷敏感度的判斷根據美國臨床和實驗室標準化協(xié)會標準進行。

1.4統(tǒng)計學處理采用WHONET 5.4軟件進行數據統(tǒng)計，采用SPSS 21.0軟件進行統(tǒng)計學分析，計數資料以n(%)表示，統(tǒng)計方法選用χ2檢驗和非參數檢驗的Ridit分析，檢驗水準α=0.05，以P< 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1銅綠假單胞菌的耐藥情況2012年分離出銅綠假單胞菌365株，2013年分離出413 株，2014年分離出204株。銅綠假單胞菌對常用抗菌藥物的耐藥結果見表1，耐藥率變化折點圖見圖1。

2.2鮑曼不動桿菌的耐藥情況2012年分離出鮑曼不動桿菌294株，2013年分離出408株，2014年分離出316株。鮑曼不動桿菌對常用抗菌藥物的耐藥結果見表2，耐藥率變化折點圖見圖2。

表1　　2012、2013、2014年銅綠假單胞菌耐藥

圖1　　銅綠假單胞菌耐藥率變化折點圖

抗菌藥物2012年(n=294)2013年(n=408)2014年(n=316)哌拉西林143(48.6)263(64.5)224(70.9)頭孢唑啉292(99.3)407(99.8)316(100.0)頭孢他啶162(55.1)275(67.4)207(65.5)頭孢曲松292(99.3)407(99.8)315(99.7)頭孢吡肟132(44.9)235(57.6)193(61.1)亞胺培南139(47.3)266(65.2)198(62.7)美羅培南136(46.3)268(65.7)195(61.7)阿米卡星27(9.2)127(31.1)90(28.5)慶大霉素109(37.1)266(65.2)190(60.1)環(huán)丙沙星142(48.3)275(67.4)199(63.0)復方磺胺甲噁唑134(45.6)187(45.8)228(72.2)呋喃妥因292(99.3)407(99.8)314(99.4)四環(huán)素131(44.6)270(66.2)239(75.6)左氧氟沙星74(25.2)157(38.5)43(13.6)

圖2　　鮑曼不動桿菌耐藥率變化折點圖

3討論

3.1銅綠假單胞菌對常用抗菌藥物的耐藥性分析銅綠假單胞菌對頭孢唑啉和呋喃妥因的耐藥率均大于90.0%，對頭孢吡肟和阿米卡星的敏感率均大于70.0%。從耐藥率折點變化圖可看出，2012～2014年耐藥率呈逐年下降趨勢，頭孢他啶、亞胺培南、美羅培南、阿米卡星、慶大霉素和環(huán)丙沙星的耐藥率下降明顯，尤以2014年較2013年下降更為突出。

MIC值分析顯示，對阿米卡星的MIC值2012～2014年呈逐年下降趨勢，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。對亞胺培南的MIC值2014年較2012年明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，較2013年有下降但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。對美羅培南的MIC值2013年較2012年有下降，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，2014年較2013年MIC值有明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

有研究顯示，銅綠假單胞菌對氨芐西林及頭孢唑啉100.0%耐藥，對哌拉西林、氨曲南、慶大霉素等耐藥率高于50.0%，3代頭孢菌素頭孢他啶的耐藥率為33.6%[3]。本研究中頭孢唑啉的耐藥率也接近100.0%，但是對哌拉西林、氨曲南、慶大霉素等只有氨曲南在2013年的耐藥率超過50.0%，其他時候耐藥率并未超過50.0%。頭孢他啶的耐藥率只在2012年為30.4%，之后2年逐漸下降。故總體而言本研究所報道的銅綠假單胞菌的耐藥率較其他研究低。氨基糖苷類藥物(阿米卡星)的耐藥率較低，但易引起耳、腎毒性等，臨床用藥要慎重。本研究銅綠假單胞菌對抗菌藥物的耐藥率不升反降，可能是中醫(yī)醫(yī)院在用抗菌藥物治療感染的同時聯(lián)合了一些有抗菌效果的中藥，有些中藥有明顯的抗菌抑菌作用，且是通過多個靶點或多種作用機制發(fā)揮抗菌作用，這樣可以在達到相同效果的同時減少抗菌藥物的使用或縮短抗菌藥物的使用時間，以此減少耐藥菌株出現。

廣譜抗菌藥物的大量使用與銅綠假單胞菌耐藥率的增加相關[4]。對哌拉西林、頭孢他啶、亞胺培南及環(huán)丙沙星均耐藥的菌株為多藥耐藥銅綠假單胞菌[5]。本研究結果中也出現了多重耐藥銅綠假單胞菌，2012年檢出15株(4.1%)，2013年21株(5.1%)，2014年15株(7.4%)，比文獻[6]報道的銅綠假單胞菌422株分離菌株中多重耐藥菌株有100株(23.70%)的分離率低。這可能與中醫(yī)醫(yī)院聯(lián)合使用中藥有關。多重耐藥銅綠假單胞菌對碳青霉烯類抗菌藥物有較高的耐藥率，這種耐藥可能是因為產金屬酶和外排泵所導致[7]。有研究顯示，多重耐藥銅綠假單胞菌分離菌株中毒力因子和抗菌藥物耐藥分子標記呈明顯正相關[8]。因此碳青霉烯類耐藥的銅綠假單胞菌需要更加仔細地制訂抗菌方案，常要聯(lián)合用藥，磷霉素和環(huán)丙沙星聯(lián)合用藥可能是一個有效的方案[9]。

3.2鮑曼不動桿菌對常用抗菌藥物的耐藥性分析鮑曼不動桿菌對頭孢唑啉、頭孢曲松、呋喃妥因的耐藥率均大于90.0%，3年敏感率均大于50.0%的只有阿米卡星和左氧氟沙星?？梢婖U曼不動桿菌耐藥情況嚴重，尤其是2013、2014年，與有關報道其對米諾環(huán)素和頭孢哌酮/舒巴坦外的大多數抗菌藥物的耐藥率在60.0%以上及對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為65.2%和66.2%基本一致[10]。耐藥率呈逐年上升的抗菌藥物有哌拉西林、頭孢吡肟和四環(huán)素，2013年較2012年耐藥率有所增加，但2014年與2013年基本持平或有所下降的抗菌藥物有頭孢他啶、亞胺培南、美羅培南、阿米卡星、慶大霉素、環(huán)丙沙星和左氧氟沙星。從耐藥率折點圖可以看出，2013年較2012年耐藥率有明顯增加，2014年與2013年相比增加并不明顯，基本保持穩(wěn)定。鮑曼不動桿菌的耐藥率未出現逐年增長，2014年與2013年基本持平，這可能與2013年以來臨床對抗菌藥物的用藥指征更加嚴格及用藥方案等的調整有關。

MIC值分析顯示，對阿米卡星的MIC值，2013年較2012年明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，2014年較2013年有明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，對阿米卡星的MIC值未呈連續(xù)升高趨勢。對亞胺培南的MIC值，2013年較2012年明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，2014年較2013年雖有升高但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，對亞胺培南的MIC值呈升高趨勢且保持在較高水平。對美羅培南的MIC值，2013年較2012年明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，2014年與2013年相比變化不大，對美羅培南的MIC值無持續(xù)增加趨勢。

鮑曼不動桿菌多耐藥和泛耐藥菌株的出現是臨床治療面臨的極大挑戰(zhàn)，有研究顯示，鮑曼不動桿菌多重耐藥和泛耐藥菌株在重癥監(jiān)護病房和外科最常見，多耐藥和泛耐藥菌株流行率的提高提示當地抗菌藥物的方案需要被修訂[11]。多重耐藥鮑曼不動桿菌對β-內酰胺類抗菌藥物耐藥可能與β-內酰胺類耐藥基因的表達相關[12]。多耐藥和泛耐藥菌株在本研究結果中有較多出現，泛耐藥菌株2012分離出16株(5.4%)，2013年分離出25株(6.1%)，2014年分離出23株(7.3%)，均低于有關報道的19.0%[13]。本研究結果顯示，鮑曼不動桿菌對多種抗菌藥物有較高的耐藥率，但并未達到文獻[2]報道的水平。

總之，銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌感染是臨床面臨的嚴峻問題，其對抗菌藥物的敏感度在不斷變化，需要時刻監(jiān)測，以期找到較為敏感的抗菌藥物，以及聯(lián)合運用來提高臨床療效。

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Analysis on the change of drug resistance of Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii in Chengdu

XIANGYao1,XINLihua2,WANGFang2,YANGChaoguo1△

(1.SchoolofMedicalTechnology,ChengduUniversityofTCM,ChengDu611137,China；2.DepartmentofClinicalLaboratory,AffiliatedHospitalofChengduUniversityofTCM,Chengdu610032,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the dynamic change of drug resistance of Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumanmii from 2012 to 2014 in affiliated hospital of Chengdu University of TCM,thus providing rational reference for clinical antimicrobial plan.MethodsThe clinical specimens from inpatients during 2012 to 2014 were analyzed by pathogenic culture and isolation.The identification and drug sensitivity test of bacteria were performed with the system of VITEK-2 Compact provided by French BioMerieux Co.,Ltd.ResultsThe multi-drug resistant rates of Pseudomonas aeruginosa decreased year by year,especially in the year of 2014.And the minimal inhibitory concentration of amikacin also decreased year by year.The drug resistance rates of Acinetobacter baumanmii to cefazolin,ceftriaxone and nitrofurantoin were higher than 90%.Compared with the year of 2012,the multi-drug resistant rate of Acinetobacter baumanmii increased obviously in 2013,while the rate barely increased in 2014.ConclusionThe drug resistance situation of Pseudomonas aeruginosa has shown some improvement.On the contrary,the drug resistance situation of Acinetobacter baumanmii is serious but it does not appear to keep on increasing.The supervise of the drug resistance rate of these two bacteria need to be continued.

Key words:Pseudomonas aeruginosa;Acinetobacter baumanmii;drug resistance;minimal inhibitory concentration

作者簡介：向瑤，女，在讀研究生，主要從事微生物及免疫學檢驗研究。△通訊作者，E-mail：2641253779@qq.com。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.010

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)11-1474-03

(收稿日期：2016-01-13修回日期：2016-03-15)