張 斌

（山西省檢驗(yàn)檢測(cè)中心（山西省標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量技術(shù)研究院），山西太原 030000）

涼皮清爽可口、柔軟美味，是一種具有地方特色的傳統(tǒng)美食，流行于中國(guó)北方地區(qū)，是不可多得的天然綠色無(wú)公害食品。大街小巷均可看見(jiàn)它的身影，受到廣大消費(fèi)者的青睞。但有些生產(chǎn)企業(yè)為防止食品腐敗變質(zhì)、延長(zhǎng)產(chǎn)品保質(zhì)期和保持食品的原有風(fēng)味，盲目非法過(guò)量添加食品添加劑。其中，苯甲酸、山梨酸可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)和繁殖，是目前被廣泛使用的價(jià)格低廉、毒性低、性能穩(wěn)定的人工合成防腐劑。糖精鈉是一種使用歷史很長(zhǎng)的合成甜味劑，甜度是蔗糖的幾百倍。這些食品添加劑給食品行業(yè)帶來(lái)了極大便利，但長(zhǎng)期過(guò)量食用此類食品添加劑會(huì)破壞人體腸道正常菌群平衡，嚴(yán)重時(shí)危害人體肝臟和腎臟健康[1-4]。食品添加劑安全問(wèn)題備受關(guān)注，我國(guó)相關(guān)部門出臺(tái)了《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》（GB 2760—2014），明確指出了食品添加劑的使用量以及范圍。因此，準(zhǔn)確測(cè)定涼皮中的苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的含量非常重要，業(yè)內(nèi)常采用便捷高效的液相色譜法進(jìn)行測(cè)定[5-8]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

市售涼皮；甲醇（色譜純）；乙酸銨（色譜純）；苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1.00 mg·mL-1，中國(guó)食品藥品檢定研究院）；山梨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（1.00 mg·mL-1，中國(guó)食品藥品檢定研究院）；糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（1.00 mg·mL-1，中國(guó)食品藥品檢定研究院）；乙酸鋅（分析純）；亞鐵氰化鉀（分析純）；純化水。

1.2 儀器與設(shè)備

戴安U3000高效液相色譜儀（DAD檢測(cè)器，賽默飛世爾科技公司）；MS105DU電子天平（梅特勒托利多科技有限公司）；EX223梅特勒電子天平（梅特勒托利多科技有限公司）；中科中佳HC-3018高速離心機(jī)；舒美KQ-500DE超聲波清洗器；德國(guó)IKA?MS3漩渦混合器。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品處理

準(zhǔn)確稱取試樣2 g于離心管中，加入純水約25 mL，渦旋混勻，50 ℃水浴超聲10 min，快速冷卻，加入92 g·L-1亞鐵氰化鉀溶液2 mL與183 g·L-1乙酸鋅溶液2 mL，混勻，8 000 r·min-1離心10 min，轉(zhuǎn)移水相至50 mL容量瓶中，再向殘?jiān)尤?0 mL純水，渦旋混勻，超聲5 min，8 000 r·min-1離心5 min，將水相轉(zhuǎn)移入同一容量瓶中，定容至刻度，混勻，取上清液過(guò)0.22 μm濾膜，上機(jī)測(cè)定。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

配制苯甲酸、山梨酸、糖精鈉質(zhì)量濃度均為100 mg·L-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。將以上3種添加劑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液配制成質(zhì)量濃度分別為1.00 mg·L-1、5.00 mg·L-1、10.0 mg·L-1、20.0 mg·L-1、50.0 mg·L-1和100 mg·L-1的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.3.3 儀器條件

色 譜 柱： 資 生 堂 C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流速：1 mL·min-1；檢測(cè)器：DAD檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)230 nm。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性考察

由圖1可知，苯甲酸、山梨酸和糖精鈉30 min內(nèi)完成測(cè)試分析，無(wú)雜質(zhì)峰干擾，目標(biāo)峰效果良好，峰型對(duì)稱，分離度高。線性考察發(fā)現(xiàn)，各組分線性關(guān)系良好，線性方程回歸系數(shù)均在0.996以上。苯甲酸線性方程為y=0.542 3x+0.004 6，r=0.999 8；山梨酸線性方程為y=0.833 7x?0.000 2，r=0.999 6；糖精鈉線性方程為y=0.344 5x?0.001 9，r=0.999 7。

圖1 苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的色譜圖

2.2 檢出限試驗(yàn)

稱取約2 g樣品分別加入濃度均為1.0 mg·mL-1的苯甲酸、山梨酸和糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液0.01 mL，按1.3.3方法處理上機(jī)測(cè)試，3種色譜峰高度均大于其3倍噪音，故樣品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的檢出限均為 0.005 g·kg-1。

2.3 加標(biāo)回收試驗(yàn)

稱取樣品9份，苯甲酸、山梨酸、糖精鈉按方法定量限、中間限、最高限3個(gè)水平進(jìn)行回收率試驗(yàn)。每個(gè)試驗(yàn)同一水平進(jìn)行平行3次試驗(yàn)，加標(biāo)后的9份樣品按1.3.2方法處理，按1.3.3上機(jī)測(cè)試，計(jì)算方法的回收率，具體加標(biāo)量及回收率見(jiàn)表1。試樣中3種添加劑組分定量限、中間限、最高限3種濃度水平的回收率為90.47%～107.63%，RSD為0.54%～4.66%。

表1 苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.4 精密度試驗(yàn)

稱取陰性樣品1份，苯甲酸、山梨酸、糖精鈉按方法中間限加標(biāo)后按1.3.2方法處理，按1.3.3上機(jī)測(cè)試，連續(xù)測(cè)定6次，記錄峰面積，計(jì)算RSD值，結(jié)果見(jiàn)表2。其精密度為0.32%～1.20%。

表2 苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的精密度試驗(yàn)結(jié)果

2.5 部分市售涼皮檢測(cè)結(jié)果

分別從生活周邊的流動(dòng)性攤販、有固定門面的餐館和大型商超采購(gòu)各類涼皮共30批，并用此方法進(jìn)行檢測(cè)。發(fā)現(xiàn)流動(dòng)性攤販所售的涼皮（10批）、有固定門面的餐館自制的涼皮（10批）中苯甲酸、山梨酸超標(biāo)使用的情況非常嚴(yán)重，不合格率超50%，糖精鈉的含量均符合規(guī)定，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 市售涼皮檢測(cè)含量表

3 結(jié)論

本試驗(yàn)利用高效液相色譜儀對(duì)涼皮中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉含量進(jìn)行檢測(cè)，并進(jìn)行了包括線性、檢出限、精密度、回收率在內(nèi)的方法學(xué)驗(yàn)證，驗(yàn)證結(jié)果均符合要求。本文的檢測(cè)結(jié)果可以對(duì)相關(guān)涼皮的生產(chǎn)廠商起到一定的警醒作用，為廣大消費(fèi)者選擇購(gòu)買涼皮渠道提供參考，為規(guī)范食品添加劑市場(chǎng)秩序提供技術(shù)支持，切實(shí)保障公眾飲食健康安全。