陳廣云
摘要:生物實(shí)驗(yàn)中,某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。因此可以根據(jù)某些化學(xué)試劑所產(chǎn)生的顏色反應(yīng),來鑒定生物組織中某種成分的存在。
關(guān)鍵詞:生物實(shí)驗(yàn);化學(xué)試劑;顏色反應(yīng);鑒定
在生物實(shí)驗(yàn)中,某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物,產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。因此可以根據(jù)某些化學(xué)試劑所產(chǎn)生的顏色反應(yīng),來鑒定生物組織中某種成分的存在,或借助顏色反應(yīng)的效果,來觀察生物組織中的某結(jié)構(gòu)的形態(tài)特征和變化情況。生物實(shí)驗(yàn)中常見的顏色反應(yīng)包括磚紅色反應(yīng),紫色反應(yīng),藍(lán)紫色反應(yīng)和橘黃色反應(yīng)等。本文就高中生物實(shí)驗(yàn)中的顏色反應(yīng)的原理和試劑,顏色變化和適用范圍幾個(gè)方面歸納闡述。
一、磚紅色反應(yīng)(用本尼迪特試劑檢測(cè)梨組織中的還原糖)
1.反應(yīng)原理
生物組織中普遍存在的還原糖種類多,常見的有葡萄糖,果糖,麥芽糖。它們的分子內(nèi)都含有還原基醛,因此叫還原糖。蔗糖沒有還原劑所以叫非還原性糖,不具有還原性。在課本實(shí)驗(yàn)中所用的本尼迪特試劑只能檢測(cè)生物組織中的還原糖是否存在,而不能檢定非還原性糖。本尼迪特試劑中含有cu(OH)2.取2毫升梨樣本上清液,加入2毫升本尼迪特試劑,振蕩試管,使樣本和本尼迪特試劑混合均勻,然后將試管置于水浴加熱2到3分鐘,顏色由藍(lán)色變成棕色到最后變成磚紅色。醛基則被氧化成為羧基。
2.本尼迪特試劑配制
本尼迪特試劑由硫酸銅溶液,檸檬酸鈉和碳酸溶液配制而成。取無水硫酸銅1.47g溶于100m熱水中,冷卻后稀釋到1150ml。取檸檬酸鈉173g,無水碳酸鈉100g和600m水共熱,溶解冷卻并加水至1850ml,然后將配好的硫酸銅溶液慢慢加入,邊加邊攪拌??梢蚤L(zhǎng)期使用。
顏色變化:顏色由藍(lán)色變成棕色到最后變成磚紅色。
用途:適用于還原糖的鑒定。
二、紫色反應(yīng)(用雙縮脲試劑檢測(cè)雞蛋清溶液中的蛋白質(zhì))
1.反應(yīng)原理
鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí),一般都使用雙縮脲試劑。雙縮脲試劑由質(zhì)量濃度為0.1g/mlNa(OH)和質(zhì)量濃度為0.01g/ml的硫酸銅溶液組成。在堿性溶液中雙縮脲能于硫酸銅溶液反應(yīng),形成紫色的絡(luò)合物。因?yàn)榈鞍踪|(zhì)中含有同雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,所以蛋白質(zhì)也能和雙縮脲反應(yīng),顏色成紫色。
2.雙縮脲試劑配制
雙縮脲試劑由A液質(zhì)量濃度為0.1g/mlNa(OH)和B液質(zhì)量濃度為0.01g/ml的硫酸銅溶液配制而成。取10g氫氧化鈉放入容量瓶中,加水至100ml,待充分溶解后倒入試劑瓶中,配成 質(zhì)量濃度為0.1g/ml的氫氧化鈉溶液,蓋好瓶口,貼上寫有A字的標(biāo)簽,取1g硫酸銅放入容量瓶中,另水至100ml,待充分溶解后倒入試劑瓶?jī)?nèi),貼上寫有B字的標(biāo)簽。配成0.01g/ml硫酸銅溶液。
顏色變化:顏色白色變成淡紫色。
用途:適用于蛋白質(zhì)的鑒定。
三、藍(lán)紫色反應(yīng)(淀粉(土豆勻漿)的鑒定)
1.反應(yīng)原理:這主要取決于淀粉本身的結(jié)構(gòu)。淀粉(土豆勻漿)是乳白色溶液,淀粉由直鏈淀粉組成。直鏈淀粉能溶于熱水而不呈糊狀,支鏈淀粉不溶于水,熱水與之作用則膨脹而成糊狀。其中溶于中的直鏈淀粉,呈彎曲形式,并借分子內(nèi)氫鍵卷曲成螺旋狀。這時(shí)加入碘溶液,其中碘分子便鉆入螺旋當(dāng)中空隙,并借助范得力與直鏈淀粉聯(lián)系在一起,從而形成絡(luò)合物。這和絡(luò)合物能吸收除藍(lán)光以外的其他可見光,從而淀粉與碘變成深藍(lán)色。
2.碘碘化鉀試劑的配制
稱取13g碘及35g碘化鉀,溶于100ml蒸餾水中,稀釋定容至1000ml,搖勻貯存于棕色瓶中,這是普通的配方,當(dāng)然濃度因人而異,可以根據(jù)自己的實(shí)際需要配制。
顏色變化:白色變成深藍(lán)色。
用途:適用于淀粉的鑒定。
四、橘黃色反應(yīng)
1.反應(yīng)原理
蘇丹III在脂肪中的溶解度比在酒精中的溶解度大當(dāng)用蘇丹3染料的酒精溶液處理含有脂肪的生物組織時(shí),酒精中的蘇丹3進(jìn)入脂肪中,在脂肪中溶解,積累,并且吸符在脂肪顆粒上,將脂肪染成橘黃色。
2.反應(yīng)試劑——蘇丹3試劑
稱取得1g蘇丹3干粉,溶于100ml體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精中,待全部溶解后再使用。
顏色變化:白色變成橘黃色
用途:適用于脂肪的鑒定
以上是高中生物實(shí)驗(yàn)中的幾種顏色反應(yīng),今加以總結(jié)歸納,以方便查閱。
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