□ 張春宇 范翠翠 張曉蕊 徐長隆 漢臣氏（沈陽）兒童制品有限公司

嗜酸乳桿菌是乳酸菌的一種，在人體整個胃腸道中，調(diào)節(jié)微生態(tài)環(huán)境，抑制腸道不良微生物的增殖。生長因子是指能促進乳酸菌生長繁殖的一類結(jié)構(gòu)和性質(zhì)不同的物質(zhì)[1]。本研究是篩選出能夠促進嗜酸乳桿菌增殖的最適促生長因子及其添加量。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

菌株：嗜酸乳桿菌H0606，由漢臣氏（沈陽）兒童制品有限公司提供。

MRS培養(yǎng)基：用于嗜酸乳桿菌H0606增殖培養(yǎng)。

1.2 方法

1.2.1 菌種增殖培養(yǎng)

將活化后的嗜酸乳桿菌H0606，按照3%接種量，35 ℃、100 rpm振蕩培養(yǎng)12 h，測其菌液活菌數(shù)。

1.2.2 促生長因子的篩選

采用單因素試驗設(shè)計，將低聚異麥芽糖（按0.6%添加量）、大豆低聚糖（按0.5%添加量）、菊粉（按0.6%添加量）、維生素B1（按0.2%添加量）和維生素B5（按0.2%添加量）添加到嗜酸乳桿菌MRS培養(yǎng)基中，進行菌種培養(yǎng)，同時做空白實驗，以菌液活菌數(shù)和菌泥收率為評價指標(biāo)，篩選出具有明顯促進作用的生長因子[2]。

其中，活菌數(shù)的測定方法：采用平板計數(shù)法。收率的測定方法：將培養(yǎng)后得到的菌液進行離心（10000 rpm、10 min），收集菌泥。收率=菌懸液離心后得到的菌泥質(zhì)量（g）/培養(yǎng)基裝液體積（mL）×100%。

1.2.3 促生長因子添加量的確定

向嗜酸乳桿菌MRS培養(yǎng)基中添加濃度遞增的促生長因子，進行菌種培養(yǎng)，以菌液活菌數(shù)和菌泥收率為評價指標(biāo)，確定促生長因子的最適添加量[3]。

2 結(jié)果與分析

2.1 促生長因子的初步篩選

不同促生長因子對嗜酸乳桿菌H0606培養(yǎng)的影響見表1。

由表1顯示，低聚異麥芽糖和菊粉作為促生長因子培養(yǎng)嗜酸乳桿菌，菌液的活菌數(shù)和菌泥收率高于空白對照組，顯現(xiàn)出明顯的促生長優(yōu)勢，初步確定低聚異麥芽糖和菊粉作為嗜酸乳桿菌的促生長因子[4]。

2.2 促生長因子添加量的確定

分別向嗜酸乳桿菌MRS培養(yǎng)基中0.5%、0.6%、1%的低聚異麥芽糖和菊粉，在相同的培養(yǎng)條件下進行培養(yǎng)。不同濃度低聚異麥芽糖和菊粉對嗜酸乳桿菌H0606培養(yǎng)的影響見表2。

由表2顯示，當(dāng)?shù)途郛慃溠刻堑奶砑恿繛?.6%和1%時，嗜酸乳桿菌菌液的活菌數(shù)和菌泥收率較高，從成本角度考慮，確定低聚異麥芽糖的最適添加量為0.6%；當(dāng)菊粉的添加量為0.6%時，嗜酸乳桿菌菌液的活菌數(shù)和菌泥收率最高。

表1 不同促生長因子對嗜酸乳桿菌H0606培養(yǎng)的影響

表2 不同濃度低聚異麥芽糖和菊粉對嗜酸乳桿菌H0606培養(yǎng)的影響

3 結(jié)論

通過研究不同種類的促生長因子對嗜酸乳桿菌H0606培養(yǎng)的影響，結(jié)果表明：低聚異麥芽糖和菊粉，對菌液活菌數(shù)和菌泥收率都具有優(yōu)勢作用，利于嗜酸乳桿菌的高密度培養(yǎng)；當(dāng)?shù)途郛慃溠刻呛途辗鄣奶砑恿繛?.6%時，效果尤為顯著；尤其菊粉對嗜酸乳桿菌H0606培養(yǎng)的優(yōu)勢影響更為顯著。本實驗結(jié)果對于嗜酸乳桿菌進行放大生產(chǎn)試驗具有參考價值。