□ 鄭 韻 李建美 重慶輕工職業(yè)學(xué)院食品藥品系

1 膠體金免疫層析技術(shù)概述

膠體金免疫層析技術(shù)是一種有效結(jié)合膠體金標(biāo)記、免疫檢測和層析分析等技術(shù)為一體的免疫檢測固相標(biāo)記技術(shù)，在20世紀80年代得到發(fā)展。膠體金免疫層析技術(shù)作為一種應(yīng)用形式，是利用抗原抗體反應(yīng)和免疫金標(biāo)記技術(shù)的相互結(jié)合，它是以條帶狀在膜上固定特異性的抗體或抗原，使在層析條上的樣品溶液依靠毛細作用產(chǎn)生泳動，使樣品中的待測物和待測物在層析材料上的抗原或抗體等受體發(fā)生親和性與特性較高的免疫反應(yīng)，在層析的過程中材料的檢測帶通過截留或富集免疫復(fù)合物，通過直接使用或酶促顯色反應(yīng)可對著色標(biāo)記物進行目測，在5～10 min內(nèi)可直接獲取試驗結(jié)果[1]。所以在檢測激素、核酸、蛋白質(zhì)、藥物、毒素及殺蟲劑等時都對膠體金的成本和交叉反應(yīng)較低，靈敏、快速等的特征進行了廣泛的應(yīng)用。

2 膠體金免疫層析技術(shù)的特點

2.1 具有較廣的檢測范圍

該技術(shù)既可以對食品中的農(nóng)藥、獸藥殘留及微生物和真菌毒素進行檢測，還可快速診斷動物的疫病，在許多領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。

2.2 操作過程相對簡單

該技術(shù)操作比較簡單，不涉及大型的設(shè)備儀器，只用簡單地對檢測樣品進行處理，便可直接觀察到檢測結(jié)果，不用具備較強的專業(yè)知識也可操作。

2.3 具有較高的檢測靈敏度

該技術(shù)大部分使用單克隆抗體進行標(biāo)記，只對抗原決定簇有親和性和特異性，靈敏度較高，當(dāng)前市面上的檢測膠體金的卡已經(jīng)達到1.0 ng/mL的靈敏度。

2.4 便于現(xiàn)場攜帶

使用膠體金對蛋白進行標(biāo)記在物理上是一種吸附過程，基本上不會對蛋白質(zhì)的活性造成破壞，因此膠體金試紙條具有良好的穩(wěn)定性。另外，膠體金檢測卡質(zhì)量和體積都較小，在現(xiàn)場便于攜帶和檢測。

2.5 可以安全的使用

相比于酶的標(biāo)記、放射性同位素和熒光素等技術(shù)，環(huán)保膠體金技術(shù)所用的試劑有較低的毒性，不會傷害操作者和對環(huán)境造成污染，具有其他檢測技術(shù)無可比擬的安全性能。

3 膠體金免疫層析技術(shù)在食品安全檢測中的應(yīng)用

3.1 在食品有害微生物中的檢測

食品安全質(zhì)量不過關(guān)，主要是由于食品中有害微生物出現(xiàn)超標(biāo)的情況，食品中常見的致病菌主要包括布氏桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌和金黃色葡萄球菌等。在檢測食品中的致病微生物時，最常使用的方法是生物鑒定分離法，但這種方法操作過程繁雜，其靈敏度和特異性也相對較差，并且在提前預(yù)防和實時監(jiān)測中也只發(fā)揮有限的作用。膠體金免疫層析技術(shù)可以解決這些問題，達到快速檢測食品中的致病微生物的目的。

3.2 食品中生物毒素、農(nóng)藥獸藥殘留物的檢測

許多食品中都含有農(nóng)藥、生物毒素等威脅人類健康的殘留，食品中的獸藥和農(nóng)藥等殘留物通常屬于半抗原體的一種小分子物質(zhì)，在制備抗體中的人工抗原時需要偶聯(lián)其和大分子蛋白。如作為黃曲霉菌和寄生曲霉菌二次代謝的產(chǎn)物，黃曲霉毒素B1是一種致癌物，具有非常強的毒性，其理化性質(zhì)比較穩(wěn)定，會嚴重污染食品，在較大程度上威脅人體健康。相關(guān)專家在2005年在檢測食品中黃曲霉毒素B1時就是采用的競爭免疫層析技術(shù)，把抗AFB1單克隆抗體當(dāng)作金標(biāo)抗體，檢測帶和質(zhì)控帶分別為黃曲霉毒素B1-牛血清蛋白和羊抗鼠IgG，最終獲得試紙條[2]。

3.3 食品中違禁藥物的檢測

部分食品經(jīng)營者為了獲得最大的利益，不顧國家相關(guān)法律法規(guī)，為了達到成功吸引食用者購買的目的，在湯料、調(diào)料等食品中加入一些違禁藥物（如罌粟殼等），極大地危害了食用者的身體健康。罌粟殼的成分主要包括罌粟堿、嗎啡、可卡因等，在判斷食品中是否有罌粟殼等時，可以通過對罌粟堿、嗎啡等含量的檢測確定。組成罌粟殼的成分大多屬于一種小分子物質(zhì)，所以可采取類似于農(nóng)藥的檢測方法進行檢測。制備膠體金時采用檸檬酸三鈉還原法，并對使用膠體金標(biāo)記方法對牛肉和豬肉中進行檢測時其中的磺胺二甲嘧啶檢測上限控制為20 μg/kg，在對牛奶和豬肉樣品進行檢測時有效的運用該方法和高效液相色譜法，在試條檢測范圍內(nèi)可獲得和HPLC相一致的結(jié)果，在10 min內(nèi)便可完成這一檢測。

4 結(jié)語

免疫膠體金技術(shù)作為一種新型的標(biāo)記技術(shù)，簡單、快速、無污染，具有良好的檢測效果，運用該技術(shù)可以快速的檢測食品的衛(wèi)生和質(zhì)量安全，為人民群眾的食品安全提供良好的保障。