曾超，蔣科偉，錢佳，周季堂，劉敏敏*

(1. 江蘇中宜金大分析檢測(cè)有限公司， 江蘇 宜興 214200；2. 宜興市環(huán)境監(jiān)測(cè)站，江蘇 宜興 214200)

固相萃取-液質(zhì)聯(lián)用分析藥物和個(gè)人護(hù)理品

曾超1，蔣科偉2，錢佳1，周季堂1，劉敏敏1*

(1. 江蘇中宜金大分析檢測(cè)有限公司， 江蘇 宜興 214200；2. 宜興市環(huán)境監(jiān)測(cè)站，江蘇 宜興 214200)

建立了固相萃取-液質(zhì)聯(lián)用分析藥物和個(gè)人護(hù)理品(PPCPs)的方法，采用Oasis HLB固相萃取柱分別在酸性條件下和堿性條件下對(duì)PPCPs進(jìn)行富集提取，該法對(duì)于宜興地區(qū)能夠檢出的30種PPCPs均具有良好的線性，相關(guān)系數(shù)為0.990～0.999，檢出限為1.37～10.12 ng/L。應(yīng)用該法對(duì)宜興地區(qū)地表水中存在的PPCPs進(jìn)行分析，結(jié)果顯示30種PPCPs均有不同程度檢出，分布最廣泛的7種分別為避蚊胺、阿替洛爾、對(duì)乙酰氨基酚、普魯卡因、β-雌二醇、卡馬西平和苯佐卡因，阿替洛爾濃度較高，普遍為5～600 ng/L。避蚊胺雖然出現(xiàn)頻率最高，但其在各個(gè)采樣點(diǎn)濃度偏低，普遍為1～50 ng/L。

藥物；個(gè)人護(hù)理品；宜興；固相萃取-液質(zhì)聯(lián)用

藥物和個(gè)人護(hù)理品化合物(PPCPs)在水環(huán)境中的檢出水平通常為ng/L～μg/L級(jí)[1-5]，這些化合物的生態(tài)安全已引起廣泛關(guān)注，建立快速、靈敏、可靠的PPCPs定量檢測(cè)方法勢(shì)在必行。

用于環(huán)境樣品中PPCPs分析檢測(cè)的方法主要有色譜法和色譜質(zhì)譜聯(lián)用法[6-7]。色譜法的檢出限通常在μg/L～mg/L級(jí)水平，其靈敏度和檢出限均無法滿足環(huán)境樣品中PPCPs的檢出要求。

相比之下，色譜質(zhì)譜聯(lián)用法靈敏度高，檢出限低，測(cè)定范圍廣，更適合于環(huán)境樣品中PPCPs的檢測(cè)。

常用于色譜質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)水體中有機(jī)物測(cè)定的前處理方法有液液萃取法、液固萃取法[8-11]。液液萃取法有機(jī)溶劑使用量大，步驟煩瑣。而液固萃取法，以固相萃取(SPE)為代表，所需有機(jī)溶劑量少，過程簡(jiǎn)單，操作方便，且能夠進(jìn)行批量化處理。

故嘗試建立一種針對(duì)PPCPs的固相萃取-液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)方法，并應(yīng)用該方法對(duì)宜興市地表水中的PPCPs分布狀況進(jìn)行檢測(cè)和分析。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器及試劑

U3000液相色譜-LTQ Orbitrap XL ETD型質(zhì)譜聯(lián)用儀(Thermos公司，美國(guó))；SB-C18色譜柱(1.7 μm，2.1 mm×150 mm，Agilent公司，美國(guó))；HLB SPE小柱(200 mg，6 cc，Waters公司，美國(guó))；CYH SPE小柱(500 mg，6 cc，上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司)；BOND ELUTE C18 SPE小柱(250 mg，6 cc，Varian公司，美國(guó))，固相萃取裝置(Supleco公司，美國(guó))，精密pH計(jì)(Mettler Toledo公司，瑞士)。

青霉素G(≥98%)、洛伐他汀(≥98%)和磺胺嘧啶(≥98%)，購自百靈威科技有限公司，對(duì)乙酰氨基酚(99.9%)、苯卡佐因(99.3%)、可替寧(99.1%)、阿司匹林(98.0%)、避蚊胺(96%)、甲芐噻嗪(98%)、萘啶酸(97%)、卡馬西平(99%)、普魯卡因(99%)、西咪替丁(99%)、酮洛芬(99%)、苯海拉明(99%)、托芬那酸(99%)、阿替洛爾(96%)、美托洛爾(96%)、β-雌二醇(99%)、磺胺二甲嘧啶(99%)、異丙嗪(98%)、三氯生(99%)、甲氧芐啶(99%)、氯咪巴唑(98%)、可待因(96%)、華法林(96%)、氟西汀(99%)、奧吩達(dá)唑(99%)、氧氟沙星(99%)、氫化可的松(99%)、地塞米松(99%)、司帕沙星(99%)、土霉素(99%)，購自Sigma-Aldrich公司。用甲醇將上述藥品配制成500mg/L的儲(chǔ)備液。甲醇、乙腈和異丙醇為色譜純，購自Tedia公司，甲酸、醋酸銨、氨水購自宜興德茂商貿(mào)有限公司。

1.2 樣品采集和預(yù)處理

1.2.1 樣品采集

在宜興主要河流和湖泊設(shè)置31個(gè)采樣點(diǎn)，在2015年6—10月期間，每個(gè)點(diǎn)位每月采樣一次，每個(gè)點(diǎn)位采集2.0 L水樣，收集于預(yù)先清洗干凈的Teflon FEP瓶中，冷藏保存，并于24 h內(nèi)進(jìn)行SPE濃縮處理。

1.2.2 樣品預(yù)處理

用5 mL甲醇和5 mL超純水預(yù)平衡固相萃取小柱。將500 mL經(jīng)甲酸調(diào)節(jié)pH值為2.0的水樣以10 mL/min的流速過預(yù)平衡過的固相萃取柱，5 mL超純水進(jìn)行淋洗后，用5 mL含有5%氨水的甲醇溶液洗脫，收集洗脫液。另取一份500 mL經(jīng)氨水調(diào)節(jié)pH值為13.0的水樣以10 mL/min的流速過另一預(yù)平衡過的固相萃取小柱，5 mL超純水淋洗后，用5 mL含有5%甲酸的甲醇溶液洗脫，收集洗脫液。合并2種提取方式的提取液，在60 ℃下，用溫和的氮?dú)獯蹈?，用甲醇定容? mL，待測(cè)。

1.3 分析方法

液相色譜條件：10%異丙醇沖洗泵頭，色譜柱為Agilent SB-C18柱，柱溫30 ℃，正離子模式下，流動(dòng)相A為0.1%甲酸溶液，流動(dòng)相B為乙腈，負(fù)離子模式下，流動(dòng)相A為20 mmol/L乙酸銨溶液，流動(dòng)相B為甲醇。洗脫程序?yàn)?5%流動(dòng)相A保持1.5 min，在30 min減少至5%，流速為0.2 mL/min，進(jìn)樣體積為20 μL。

質(zhì)譜條件：采用Orbitrap質(zhì)量分析器，離子化方式為ESI+和ESI-，毛細(xì)管溫度350 ℃，鞘氣壓力2.0×105Pa，輔助氣流速3.3 L/min。正離子模式下噴霧電壓3.5 kV，毛細(xì)管電壓30 V，管透鏡電壓80 V，負(fù)離子模式下噴霧電壓2.5 kV，毛細(xì)管電壓10 V，管透鏡電壓50 V。全掃描模式分辨率R=60 000，全掃描范圍100～1 000。

2 結(jié)果與討論

2.1 PPCPs富集方法建立

現(xiàn)選擇酸性藥物青霉素G(pKa 2.80)、堿性藥物洛伐他汀(pKa 13.49)和中性藥物磺胺嘧啶(pKa 6.50)3種藥物，分別用3種廣譜性SPE柱在不同pH值下進(jìn)行提取，提取結(jié)果見表1。

表1 不同SPE柱在不同pH值下對(duì)3種藥物提取的回收率

由表1可見，CNWBOND CYH固相萃取柱在酸性條件下對(duì)酸性藥物青霉素G的提取效果最好，回收率為105%，堿性條件最有利于堿性藥物洛伐他汀的提取，其回收率為110%，不利于中性藥物的富集提取(回收率為25%～33%)。Oasis HLB固相萃取柱在酸性條件下可用于對(duì)酸性和中性藥物提取，在堿性條件下可用于對(duì)堿性藥物提取。BOND ELUTE C18固相萃取柱在酸性中性和堿性條件下，對(duì)3種藥物的提取效率均較低或無回收，即BOND ELUTE C18固相萃取柱不適合做PPCPs的富集提取。因此，本研究選用Oasis HLB固相萃取柱分別在酸性條件下和堿性條件下對(duì)PPCPs進(jìn)行富集提取。

2.2 PPCPs的鑒定

對(duì)宜興市地表水樣品濃縮富集后進(jìn)行分析，將分析結(jié)果與常規(guī)使用藥物和護(hù)理品的精確分子質(zhì)量進(jìn)行比對(duì)分析，篩查出宜興市地表水中含有30種PPCPs，篩查結(jié)果見表2，圖1(a)(b)(c)(d)(e)和圖2(a)(b)(c)(d)(e)為5種含量較大的PPCPs的質(zhì)譜鑒定結(jié)果。

2.3 線性關(guān)系與檢測(cè)限

采用SIM模式，對(duì)30種PPCPs標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行分析，得到30種PPCPs回歸方程的線性均較好，相關(guān)系數(shù)為0.990～0.999，見表2。

對(duì)濃度值為估計(jì)方法檢出限值2～5倍的樣品進(jìn)行14次平行測(cè)定，根據(jù)文獻(xiàn)[12]計(jì)算方法檢出限(MDL)。結(jié)果顯示30種PPCPs的檢出限為1.37～10.12 ng/L，見表2。

表2 比對(duì)篩查結(jié)果、方法性能指標(biāo)及宜興地區(qū)PPCPs的檢出結(jié)果

2.4 宜興市地表水中PPCPs濃度分布

對(duì)宜興市的31個(gè)采樣點(diǎn)中檢出的PPCPs進(jìn)行濃度分析，結(jié)果見表2。30種PPCPs在宜興地區(qū)地表水中有不同程度檢出，檢出范圍為1～600 ng/L。其中，避蚊胺在各采樣點(diǎn)均有檢出，但檢出濃度較低，普遍在1～50 ng/L范圍。其他化合物只在部分采樣點(diǎn)有檢出，阿替洛爾、對(duì)乙酰氨基酚、普魯卡因、β-雌二醇、卡馬西平和本佐卡因檢出率相對(duì)較高，其中阿替洛爾濃度較高，普遍在4～600 ng/L。這可能是由于含避蚊胺驅(qū)蚊產(chǎn)品、高血壓藥阿替洛爾、感冒藥對(duì)乙酰氨基酚等在宜興地區(qū)使用普遍，其帶來的環(huán)境隱患不容忽視。

圖1 部分檢出PPCPs的總離子流圖(TIC)

圖2 部分檢出PPCPs的高分辨質(zhì)譜圖

3 結(jié)語

Oasis HLB固相萃取柱可分別在酸性條件下和堿性條件下實(shí)現(xiàn)對(duì)不同性質(zhì)PPCPs高效富集提取。用此方法篩查出宜興市地表水中含有30種PPCPs。建立了30種PPCPs的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算出檢出限。31個(gè)采樣點(diǎn)中出現(xiàn)頻次最高的7種PPCPs分別為避蚊胺、阿替洛爾、對(duì)乙酰氨基酚、普魯卡因、β-雌二醇、卡馬西平和苯卡佐因。阿替洛爾濃度最大，普遍在4～600 ng/L。避蚊胺檢出頻率最高，31個(gè)采樣點(diǎn)均有檢出，質(zhì)量濃度為1～50 ng/L。

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Determination of Pharmaceutical and Personal Care Products by Solid Phase Extraction Coupled with LC/MS

ZENG Chao1， JIANG Ke-wei2， QIAN Jia1， ZHOU Ji-tang1， LIU Min-min1*

(1.JiangsuZhongyijindaAnalytical&TestingCo.，Ltd.，Yixing，Jiangsu214200，China； 2.YixingEnvironmentalMonitoringStation，Yixing，Jiangsu214200，China)

A method for determination of pharmaceutical and personal care products (PPCPs) was developed using solid phase extraction-liquid chromatography/mass spectrometry (SPE-LC/MS). The PPCPs were concentrated by Oasis HLB solid phase extraction column at acidic and alkaline conditions. Thirty PPCPs were detected in Yixing City by the developed method with the correlation coefficient in the range of 0.990～0.999 and the detection limit in the range of 1.37～10.12 ng/L. The most frequently detected PPCPs were diethyltoluamede， atenolol， paracetamol， procaine， beta-estradiol， carbamazepine and benzocaine. Atenolol had the highest concentration of these PPCPs with the range of 500～600 ng/L. Diethyltoluamede was the most frequently discovered PPCPs ， however， the concentrations were low with the range of 1～50 ng/L

Pharmaceuticals； Personal care； Yixing City； SPE-LC/MS

2016-04-29；

2016-06-24

曾超(1981—)，男，工程師，碩士，從事環(huán)境監(jiān)測(cè)與管理工作。

X832；O657.63

B

1674-6732(2016)05-0034-04