張裕諾

【摘要】? 乳腺癌是女性常見惡性腫瘤之一，針對不同分子分型的乳腺癌患者，新輔助化療已成為常規(guī)治療策略之一。然而，準(zhǔn)確評估新輔助化療的療效對于指導(dǎo)治療方案的調(diào)整和預(yù)后預(yù)測至關(guān)重要。去整合素-金屬蛋白酶12（ADAM12）、腫瘤特異性蛋白70（SP70）作為乳腺癌相關(guān)蛋白，可用于療效評估。綜述血清ADAM12聯(lián)合SP70檢測對乳腺癌患者新輔助化療效果評估的研究進展，包括ADAM12和SP70的生物學(xué)功能、血清檢測方法以及其在乳腺癌新輔助化療療效評估中的應(yīng)用情況，評估指標(biāo)的潛在應(yīng)用價值。

【關(guān)鍵詞】? 乳腺癌；新輔助化療；去整合素-金屬蛋白酶12；腫瘤特異性蛋白70；療效評估

中圖分類號? R737.9? ?文獻標(biāo)識碼? A? ? 文章編號? 1671-0223（2024）13--03

乳腺癌是全球女性常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和死亡率逐年增加。乳腺癌的治療策略不斷進化，新輔助化療已成為一種被廣泛接受的治療方法[1]。新輔助化療指在手術(shù)前給予化療藥物來縮小腫瘤體積、減少淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和改善手術(shù)可行性。然而，乳腺癌患者對新輔助化療的反應(yīng)存在很大的個體差異，有些患者在療程結(jié)束后可完全消失，而另一些患者則表現(xiàn)出耐藥或僅僅有部分縮小[2]。準(zhǔn)確評估新輔助化療的療效對于確定該患者的治療方案和預(yù)測預(yù)后非常重要[3]。然而，現(xiàn)有的評估方法如腫瘤體積測量、臨床病理反應(yīng)評估存在一定的局限性。因此，尋找更準(zhǔn)確和可靠的生物標(biāo)志物來評估新輔助化療療效具有重要意義。去整合素-金屬蛋白酶12（ADAM12）、腫瘤特異性蛋白70（SP70）是乳腺癌患者中被廣泛研究的蛋白，其中ADAM12作為一種在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中參與調(diào)控的蛋白，已被證明與乳腺癌的進展和預(yù)后相關(guān)[4]。SP70作為一種熱休克蛋白，具有細胞保護和應(yīng)激響應(yīng)的功能，也在乳腺癌中顯示出重要作用。因此，將ADAM12和SP70作為潛在的療效評估指標(biāo)，有助于更準(zhǔn)確地預(yù)測新輔助化療的療效。

1? ADAM12和SP70的生物學(xué)功能

1.1? ADAM12在乳腺癌中的生物學(xué)功能

ADAM12具有蛋白酶活性，能夠降解細胞外基質(zhì)的成分，如膠原蛋白和纖維蛋白等，這種降解作用在乳腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中起到重要的作用[5]。ADAM12參與調(diào)節(jié)細胞間的黏附和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，與乳腺癌細胞的增殖、遷移和侵襲等過程密切相關(guān)，ADAM12可以通過與細胞外基質(zhì)分子或細胞膜受體結(jié)合，調(diào)控細胞功能和轉(zhuǎn)導(dǎo)信號。Sternlicht等[6]研究分析乳腺癌組織和細胞系中ADAM12的表達，發(fā)現(xiàn)ADAM12在乳腺癌發(fā)展過程中高度表達。進一步實驗表明，ADAM12通過與細胞外基質(zhì)分子結(jié)合，調(diào)節(jié)細胞的黏附和遷移能力。此外，研究發(fā)現(xiàn)，ADAM12可以通過與細胞膜受體結(jié)合，激活下游信號通路，如PI3K/Akt和MAPK/ERK等，促進乳腺癌細胞的增殖和侵襲。這些發(fā)現(xiàn)表明，ADAM12在乳腺癌細胞的增殖、遷移和侵襲中起到了重要的調(diào)節(jié)作用。ADAM12還具有腫瘤抑制及促進的雙重作用。一方面，ADAM12可以作為腫瘤抑制因子，抑制乳腺癌的發(fā)展和轉(zhuǎn)移；另一方面，ADAM12也可以作為腫瘤促進因子，促進乳腺癌的增殖和侵襲，這取決于ADAM12在不同的生理和病理條件下的調(diào)控和相互作用。

1.2? SP70在乳腺癌中的生物學(xué)功能

SP70在細胞內(nèi)起到重要的保護作用，在應(yīng)激情況下調(diào)節(jié)細胞的穩(wěn)態(tài)。SP70可以在細胞受到應(yīng)激時被表達和激活，具有抗氧化、抗凋亡和細胞修復(fù)等能力，有助于維持細胞的穩(wěn)態(tài)和適應(yīng)外界環(huán)境的變化[7]。SP70可以作為一種抗原，促進腫瘤細胞的免疫識別和殺傷，有助于抑制腫瘤的生長和擴散。SP70參與調(diào)節(jié)細胞周期和增殖，對細胞的正常分裂和增殖具有重要影響。在乳腺癌中，SP70可能通過調(diào)控細胞周期相關(guān)因子的表達和活性，影響腫瘤細胞的增殖和侵襲能力。Li等[8]研究發(fā)現(xiàn)，SP70在乳腺癌組織中的表達顯著增加，與乳腺癌的發(fā)展和預(yù)后相關(guān)。通過進一步實驗，研究團隊發(fā)現(xiàn)，SP70具有抗氧化、抗凋亡和細胞修復(fù)等能力，可以保護乳腺癌細胞免受應(yīng)激情況的損害，維持其穩(wěn)態(tài)。此外，研究也表明，SP70在乳腺癌中參與調(diào)節(jié)細胞周期和增殖，與細胞周期相關(guān)因子的表達和活性有關(guān)。更重要的是，研究發(fā)現(xiàn)，SP70在乳腺癌細胞中的表達可激發(fā)免疫系統(tǒng)的應(yīng)答。SP70可以作為一種抗原，促進乳腺癌細胞的免疫識別和殺傷，增強機體的免疫應(yīng)答，從而抑制腫瘤的生長和擴散，這一發(fā)現(xiàn)提示SP70可作為乳腺癌免疫治療的潛在靶點。

2? ADAM12和SP70的血清檢測方法

2.1? 酶聯(lián)免疫吸附試驗

對于ADAM12和SP70的血清檢測，可以應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）[9]。首先，在微孔板上固定與ADAM12或SP70特異性結(jié)合的抗體，形成免疫吸附層。然后，加入乳腺癌患者的血清樣本并進行孵育，使ADAM12或SP70與固定抗體特異結(jié)合。之后，通過洗滌去除非特異結(jié)合物，加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體形成特異性復(fù)合物。再次洗滌后，加入適當(dāng)?shù)牡孜?，使HRP催化反應(yīng)產(chǎn)生發(fā)色反應(yīng)。最后，通過光譜儀測量反應(yīng)的顏色強度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出ADAM12或SP70的濃度。ELISA方法可以提供快速、準(zhǔn)確和定量的ADAM12和SP70的血清濃度信息，有助于評估乳腺癌患者的疾病狀態(tài)和治療效果[10]。然而，需注意的是，應(yīng)用ELISA檢測過程，需要選擇高敏感性和高特異性的抗體，以保證檢測的準(zhǔn)確性。對于ADAM12和SP70，選擇正確的抗體尤其重要，因為它們可能在非癌細胞中也有表達。過量或稀釋不足的樣品都可導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果，所以必須根據(jù)預(yù)期的蛋白質(zhì)濃度范圍，正確稀釋樣品。還需要盡量使用同一批次的試劑，同時標(biāo)準(zhǔn)品和樣品需在相同條件下進行處理和檢測，以避免批量效應(yīng)。

2.2? 質(zhì)譜法

質(zhì)譜法是一種高靈敏度的血清檢測方法，可以用于衡量乳腺癌患者血清中ADAM12和SP70的濃度。該方法基于蛋白質(zhì)的質(zhì)量-電荷比（m/z）特征，通過質(zhì)譜儀分析蛋白質(zhì)樣本，并提供關(guān)于蛋白質(zhì)組成和定量的信息[11]。對于ADAM12和SP70的血清檢測，研究人員可采集乳腺癌患者的血清樣本，對其進行前處理和分離純化步驟。隨后，樣本中的蛋白質(zhì)經(jīng)過質(zhì)譜儀進行離子化，產(chǎn)生m/z譜圖。通過與已知標(biāo)準(zhǔn)或數(shù)據(jù)庫中的參考譜圖進行比對和分析，可以確定ADAM12和SP70的存在和濃度水平。質(zhì)譜法具有高度準(zhǔn)確性和靈敏度，能夠提供更詳細和全面的蛋白質(zhì)信息，對于乳腺癌患者新輔助化療療效的評估具有潛在的幫助[12]。同樣，這一方式應(yīng)用也需注意選擇合適標(biāo)準(zhǔn)品及質(zhì)控，主要是因為血清樣品的復(fù)雜性，建立質(zhì)譜法時應(yīng)使用純化的ADAM12和SP70標(biāo)準(zhǔn)品進行方法的校準(zhǔn)和優(yōu)化。同樣重要的是在每次分析中包含質(zhì)量控制樣品以確保結(jié)果的可重復(fù)性和準(zhǔn)確性。

3? 血清ADAM12聯(lián)合SP70檢測對乳腺癌患者新輔助化療的療效評估

近年來，血清ADAM12和SP70作為乳腺癌的潛在生物標(biāo)志物引起了廣泛關(guān)注。乳腺癌新輔助化療是一項重要的治療策略，在手術(shù)前用藥以縮小腫瘤、提高手術(shù)效果。然而，乳腺癌患者對新輔助化療的反應(yīng)存在差異，因此有必要尋找有效的方法評估療效并個體化治療。

王漢楚等[13]研究納入了40例乳腺癌患者作為乳腺癌組，50例乳腺良性疾病患者作為乳腺良性疾病組，以及40名體檢健康者作為健康對照組。使用ELISA檢測血清中ADAM12的水平，同時還檢測腫瘤標(biāo)志物相關(guān)指標(biāo)水平。結(jié)果顯示，乳腺癌組的ADAM12與各種腫瘤標(biāo)志物水平高于乳腺良性疾病組和健康對照組，此外乳腺癌組ADAM12的陽性率為87.50%，研究表明，ADAM12聯(lián)合腫瘤標(biāo)志物，可以有效提高乳腺癌的篩查陽性率，具有潛在作為乳腺癌診斷標(biāo)志物的能力。有研究表明，乳腺癌組織經(jīng)免疫組化染色后SP70的表達呈弱陽性[14]，而SP70在乳腺癌患者血清中的表達水平鮮見研究。ADAM12和SP70等生物標(biāo)志物在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、分期、預(yù)后及腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移等多個方面顯示出潛在的關(guān)聯(lián)性，這為乳腺癌患者的管理提供了前所未有的個體化治療潛力[15]。在乳腺癌中，ADAM12的異常表達往往與腫瘤細胞的侵襲與遷移性能提升有關(guān)，其在血清中的水平可作為預(yù)測療效和預(yù)后的生物標(biāo)志物。理論上，如果患者的ADAM12水平在接受新輔助化療后顯著降低，這可能是化療有效的跡象[16]。在腫瘤細胞中，SP70的高表達與細胞凋亡的抑制、腫瘤的生存力及化療藥物的耐藥性相關(guān)。因此，SP70的表達水平也能作為監(jiān)測乳腺癌化療響應(yīng)的另一項指標(biāo)。

通過對患者血液中的ADAM12和SP70水平進行監(jiān)測，醫(yī)生們可以獲得關(guān)于腫瘤生物學(xué)特性的額外信息，這可以幫助預(yù)測患者的治療響應(yīng)。高的或升高的標(biāo)志物水平往往表明較差的預(yù)后，而標(biāo)志物水平的降低則可預(yù)示有利的化療效果。然而，血液生物標(biāo)志物在臨床應(yīng)用中的價值還需要大量的臨床證據(jù)來進一步驗證。

綜上所述，ADAM12和SP70可作為乳腺癌新輔助化療效果及預(yù)后評估的重要指標(biāo)，根據(jù)指標(biāo)檢測可作為新輔助化療效果以及調(diào)整用藥方案的參考依據(jù)。但是因為當(dāng)前相關(guān)研究較少，因而未來的研究應(yīng)當(dāng)更加專注于大規(guī)模臨床試驗，以驗證血清中ADAM12與SP70水平作為聯(lián)合生物標(biāo)志的可靠性和精確性，以及它們預(yù)測乳腺癌患者對新輔助化療反應(yīng)的有效性，以提高生物標(biāo)志物檢測的精確度，進而改善療效評估。

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[2024-03-14收稿]