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        外源葡萄糖通過(guò)調(diào)控蔗糖代謝增強(qiáng)采后杏果實(shí)的抗冷性

        2023-12-11 06:58:10蘆玉佳趙亞婷梁可欣任新雅劉志旭石慧敏
        食品科學(xué) 2023年21期
        關(guān)鍵詞:細(xì)胞膜果糖外源

        張 昱,蘆玉佳,趙亞婷,梁可欣,任新雅,劉志旭,石慧敏,朱 璇

        (新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與藥學(xué)學(xué)院,新疆 烏魯木齊 830052)

        新疆‘賽買提’杏(Prunus armeniacaL. cv.Saimaiti)風(fēng)味獨(dú)特、果香濃郁、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富,深受當(dāng)?shù)叵M(fèi)者喜愛(ài),具有較高的商業(yè)價(jià)值[1]。杏屬于呼吸躍變型水果,且采收多集中于高溫季節(jié),這導(dǎo)致果實(shí)后熟迅速,貨架時(shí)間短[2]。目前大量研究已經(jīng)證實(shí)了低溫貯藏是延緩果實(shí)采后衰老、品質(zhì)劣變和腐爛的常用策略之一[3]。但杏是冷敏性水果,在低溫貯藏期間易發(fā)生冷害,致使果實(shí)生理代謝紊亂,這是影響果實(shí)長(zhǎng)期貯藏的主要限制因素[4-5]。因此如何減少果實(shí)在冷藏期間冷害的發(fā)生是目前鮮杏貯運(yùn)產(chǎn)業(yè)亟需解決的問(wèn)題。

        可溶性糖含量與果實(shí)的品質(zhì)和口感密切相關(guān),同時(shí)較高含量的可溶性糖在果實(shí)抵御低溫脅迫中起著重要的作用[6-8]。研究發(fā)現(xiàn),葡萄糖、果糖和蔗糖等可溶性糖可通過(guò)作為滲透壓調(diào)節(jié)劑、低溫保護(hù)劑、活性氧清除劑及信號(hào)分子等多重作用來(lái)緩解果實(shí)的低溫脅迫[9-11]。Shao Xingfeng等[12]研究發(fā)現(xiàn),熱處理可通過(guò)增強(qiáng)枇杷果實(shí)貯藏期間葡萄糖和果糖的含量來(lái)增強(qiáng)枇杷果實(shí)的耐冷性。Wang Zheng[3]與張杼潤(rùn)[13]等研究發(fā)現(xiàn),較高的葡萄糖與果糖水平可緩解杏果實(shí)的冷害現(xiàn)象。然而,這3 種可溶性糖在果實(shí)抵御低溫脅迫中所起的作用因果實(shí)種類和品種等差異而有所不同。Wang Ke[7]與董欣瑞[14]等研究發(fā)現(xiàn),較高的蔗糖水平可緩解桃果實(shí)的冷害現(xiàn)象。在柑橘中也發(fā)現(xiàn)類似的結(jié)果,熱處理導(dǎo)致的蔗糖含量增加可能有助于提高柑橘果實(shí)的耐冷性[6]。

        葡萄糖不僅是植物體內(nèi)主要的能量供應(yīng)物質(zhì),同時(shí)也可作為結(jié)構(gòu)物質(zhì)為合成酚類及黃酮類等物質(zhì)提供碳骨架[15-16]。此外,研究表明,外源葡萄糖的施用可使園藝作物提質(zhì)增產(chǎn)、緩解植物逆境脅迫、調(diào)控植物成熟衰老[15-17]。Wei Jia等[17]研究發(fā)現(xiàn),外源葡萄糖處理可提高甘藍(lán)和小白菜芽中的總酚與花青素的含量;Huang Yawen等[16]研究發(fā)現(xiàn),葡萄糖預(yù)處理在一定程度上降低了熱脅迫黃瓜的活性氧積累和膜脂質(zhì)過(guò)氧化,增強(qiáng)了黃瓜幼苗的耐熱性。Wang Yuanhua等[18]研究發(fā)現(xiàn),外源葡萄糖處理可有效保持采后草莓的貯藏品質(zhì),并提高其抗氧化能力。然而,目前關(guān)于外源葡萄糖處理對(duì)采后杏果實(shí)蔗糖代謝與冷害的影響還鮮有報(bào)道。因此本實(shí)驗(yàn)以新疆‘賽買提’杏為材料,研究不同濃度葡萄糖處理對(duì)杏果實(shí)采后冷害與糖代謝的影響,旨在為杏果實(shí)冷害的控制提供參考。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        ‘賽買提’杏果實(shí)于2021年6月27日采自新疆英吉沙縣烏恰鎮(zhèn)試驗(yàn)田,選取成熟度、大小相近、無(wú)病蟲(chóng)害和機(jī)械損傷的杏果實(shí),并立即運(yùn)回新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)果蔬采后貯藏實(shí)驗(yàn)室。

        果糖、葡萄糖、蔗糖標(biāo)準(zhǔn)品(純度≥99%) 上海源葉生物科技有限公司;葡萄糖、氯化鎂、氫氧化鈉、二硫蘇糖醇、牛血清白蛋白、乙酸鋅、亞鐵氰化鉀、蒽酮、甘油(均為分析純) 天津致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司;乙腈(色譜純) 賽默飛世爾科技(中國(guó))有限公司。

        1.2 儀器與設(shè)備

        GY-4果實(shí)硬度計(jì) 浙江艾德堡儀器有限公司;NR10QC色差儀 廣東三恩時(shí)智能科技有限公司;PAL-1便攜式數(shù)顯折光儀 日本Atago公司;UF-103型紫外分光光度計(jì) 上海優(yōu)尼克儀器有限公司;3HBRI型高速冷凍離心機(jī) 湖南海瀾儀器設(shè)備有限公司;LC-20AB高效液相色譜儀 日本島津公司;HH-2S恒溫水浴鍋常州中纖檢測(cè)儀器設(shè)備有限公司。

        1.3 方法

        1.3.1 杏果實(shí)處理

        參照本課題組前期研究結(jié)果[19],采用減壓滲透法處理杏果實(shí),處理組分別用100、200、400 mmol/L葡萄糖溶液對(duì)杏果實(shí)進(jìn)行減壓滲透處理;以蒸餾水減壓滲透處理作為對(duì)照組。各組處理均重復(fù)3 次,每次重復(fù)4 kg果實(shí)。待果實(shí)晾干后于溫度(0±1)℃、相對(duì)濕度90%~95%的冷庫(kù)中貯藏。

        1.3.2 指標(biāo)測(cè)定

        1.3.2.1 冷害發(fā)病率及冷害指數(shù)的測(cè)定

        參照何歡等[5]的方法進(jìn)行冷害發(fā)病率及冷害指數(shù)測(cè)定。

        1.3.2.2 硬度、色澤、可溶性固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測(cè)定

        杏果實(shí)硬度采用GY-4硬度計(jì)測(cè)定;色澤采用NR10QC色差儀測(cè)定;可溶性固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)(soluble solids content,SSC)采用PAL-1糖度儀測(cè)定。

        1.3.2.3 可滴定酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)和抗壞血酸含量的測(cè)定

        參照曹建康[20]的方法測(cè)定可滴定酸(titratable acidity,TA)質(zhì)量分?jǐn)?shù)和抗壞血酸(ascorbic acid,ASA)含量。TA質(zhì)量分?jǐn)?shù)采用氫氧化鈉滴定法測(cè)定;ASA含量采用2,6-二氯靛酚滴定法測(cè)定,單位為mg/100 g。

        1.3.2.4 丙二醛含量和細(xì)胞膜滲透率的測(cè)定

        丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量參照曹建康等[20]的方法測(cè)定,單位為nmol/g。細(xì)胞膜滲透率參照曹建康等[17]的方法,采用電導(dǎo)率法測(cè)定,單位為%。

        1.3.2.5 蔗糖、果糖和葡萄糖含量的測(cè)定

        采用液相色譜法測(cè)定可溶性糖含量[21]。提取方法:稱取5.0 g經(jīng)過(guò)勻漿處理的杏果肉樣品,加超純水50 mL,加入10.6 g/100 mL亞鐵氰化鉀溶液和21.9 g/100 mL乙酸鋅溶液各5 mL,磁力攪拌30 min,加超純水定容至100 mL。經(jīng)0.22 μm水系濾膜過(guò)濾,進(jìn)樣高效液相色譜儀進(jìn)行分析。每處理選果3 個(gè),重復(fù)3 次。

        1.3.2.6 蔗糖代謝相關(guān)酶活力的測(cè)定

        參照J(rèn)iang Hanyu等[22]的方法測(cè)定蔗糖磷酸合成酶(sucrose phosphate synthase,SPS)和蔗糖合成酶(sucrose synthase、SS)活力。粗酶液提?。喝?.0 g杏果實(shí)樣品,液氮研磨后加入200 mmol/L pH 7.5 Hepes-NaOH溶液5 mL。將混合物在10 000 r/min下離心10 min,上清液即為粗酶液。SPS的測(cè)定體系包括:0.1 mL粗酶液、0.5 mL 50 mmol/L Hepes-NaOH緩沖液(pH 7.5)、0.2 mL 15 mmol/L MgCl2、0.15 mL 5 mmol/L 果糖-6-磷酸(fructose-6-phosphate,F(xiàn)-6-P)、0.15 mL 15 mmol/L葡萄糖-6-磷酸(glucose 6-phosphate,G-6-P)、0.2 mL 10 mmol/L尿苷二磷酸葡萄糖(uridine diphosphate glucose,UDPG),反應(yīng)體系在37 ℃下孵育60 min,然后加入100 μL、質(zhì)量分?jǐn)?shù)30% KOH溶液終止反應(yīng),用蒽酮測(cè)定法測(cè)定該反應(yīng)產(chǎn)生的蔗糖量,以每克鮮質(zhì)量樣品每小時(shí)產(chǎn)生的蔗糖的物質(zhì)的量表示SPS活力,單位為μmol/(h·g)。SS活力測(cè)定時(shí)的混合物體系為0.1 mL粗酶液、0.5 mL 50 mmol/L Hepes-NaOH緩沖液(pH 7.5)、0.2 mL 15 mmol/L MgCl2、0.15 mL 10 mmol/L果糖、0.2 mL 10 mmol/L UDPG,其余操作及定義同SPS活力,單位為μmol/(h·g)。

        酸性轉(zhuǎn)化酶(acid invertase,AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(neutral invertase,NI)活力的檢測(cè)參考Cao Shifeng等[23]的方法。將約0.2 mL粗酶液與0.8 mL反應(yīng)緩沖液(0.1 mol/L醋酸緩沖液(pH 5.5)、0.1 g/L蔗糖)混合,34 ℃孵育1 h,采用3,5二硝基水楊酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)法檢測(cè)反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的葡萄糖量,以每克鮮樣每小時(shí)產(chǎn)生的葡萄糖物質(zhì)的量表示AI活力,單位為μmol/(h·g)。將約0.2 mL粗酶液與0.8 mL反應(yīng)緩沖液(含1 g/L蔗糖、pH 7.5 0.1 mol/L磷酸緩沖液、5 mmol/L MgCl2、1 mmol/L乙二胺四乙酸)混合,其余操作及定義同AI活力,以每克鮮樣每小時(shí)產(chǎn)生的葡萄糖物質(zhì)的量表示NI活力,單位為μmol/(h·g)。

        1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

        所有物質(zhì)含量、酶活力結(jié)果均以鮮質(zhì)量計(jì),采用Excel 2010軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)結(jié)果計(jì)算。用SPSS 22.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析,采用Duncan檢驗(yàn)進(jìn)行差異顯著性分析,P<0.05表示差異顯著。使用GraphPad Prism 8.0.2和Origin 2019軟件作圖。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 外源葡萄糖處理對(duì)杏果實(shí)采后冷害發(fā)病率及冷害指數(shù)的影響

        如圖1A所示,在貯藏期間,杏果實(shí)的冷害發(fā)病率不斷上升。在貯藏14 d時(shí),對(duì)照組的杏果實(shí)已發(fā)生冷害,而葡萄糖處理組在21 d時(shí)才開(kāi)始發(fā)生冷害。此時(shí)(21 d)對(duì)照組杏果實(shí)冷害發(fā)病率分別是100、200 mmol/L和400 mmol/L葡萄糖處理組的1.23、2.09、1.23 倍。在貯藏第49天時(shí),100、200 mmol/L和400 mmol/L葡萄糖處理組杏果實(shí)冷害發(fā)病率分別比對(duì)照組低15.87%、34.92%和19.04%(P<0.05)。結(jié)果表明,不同濃度的葡萄糖處理均可顯著抑制杏果實(shí)冷害發(fā)病率的上升。

        如圖1B所示,在貯藏過(guò)程中,杏果實(shí)的冷害指數(shù)呈上升趨勢(shì),200 mmol/L葡萄糖處理組冷害指數(shù)在貯藏過(guò)程中顯著低于對(duì)照組。在貯藏結(jié)束時(shí),對(duì)照組冷害指數(shù)分別是100、200 mmol/L和400 mmol/L葡萄糖處理組的1.31、1.81、1.36 倍(P<0.05)。說(shuō)明外源葡萄糖處理可顯著抑制杏果實(shí)冷害指數(shù)的上升。

        與對(duì)照組相比,外源葡萄糖處理對(duì)杏果實(shí)采后冷害發(fā)病率和冷害指數(shù)都有一定的抑制作用,其中以200 mmol/L葡萄糖處理效果最顯著。

        2.2 外源葡萄糖處理對(duì)杏果實(shí)采后貯藏品質(zhì)的影響

        2.2.1 外源葡萄糖處理對(duì)杏果實(shí)色澤的影響

        色澤是反映杏果實(shí)成熟度最直觀的指標(biāo)之一。L*值表示果實(shí)的亮度,如圖2A所示,在貯藏期內(nèi),各組杏果實(shí)的L*值均不斷下降。在貯藏期14~49 d時(shí),200 mmol/L葡萄糖處理組杏果實(shí)的L*值顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。a*值表示果實(shí)的紅綠程度,a*值越大則果皮越紅,反之越綠。如圖2B所示,在貯藏過(guò)程中,杏果實(shí)的a*值呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì),對(duì)照組a*值上升速率快于葡萄糖處理組。在貯藏結(jié)束時(shí),200 mmol/L葡萄糖處理組的杏果實(shí)a*值分別比對(duì)照組、100 mmol/L葡萄糖處理組和400 mmol/L葡萄糖處理組低23.07%、11.53%、21.32%(P<0.05)。如圖2C所示,在整個(gè)貯藏過(guò)程中,杏果實(shí)的b*值呈先上升后保持穩(wěn)定的趨勢(shì),且各葡萄糖處理組b*值低于對(duì)照組,在第49天時(shí),200 mmol/L葡萄糖處理組b*值比對(duì)照組低5.70%(P<0.05)。說(shuō)明,外源葡萄糖處理可有效維持杏果實(shí)貯藏期間的色澤,其中200 mmol/L葡萄糖處理效果最顯著。

        圖2 外源葡萄糖對(duì)杏果實(shí)采后L*值(A)、a*值(B)、b*值(C)的影響Fig. 2 Effect of exogenous glucose on L* (A), a* (B) and b* (C) values of postharvest apricot fruit

        2.2.2 外源葡萄糖處理對(duì)杏果實(shí)硬度、TA質(zhì)量分?jǐn)?shù)、ASA含量、SSC的影響

        如圖3A所示,在貯藏期間,杏果實(shí)硬度不斷降低,外源葡萄糖處理組杏果實(shí)的硬度高于對(duì)照組。在貯藏第49天時(shí),200 mmol/L葡萄糖處理組的硬度比對(duì)照組高23.74%(P<0.05)。說(shuō)明適宜濃度的外源葡萄糖處理可有效維持杏果實(shí)硬度。

        圖3 外源葡萄糖對(duì)杏果實(shí)采后硬度(A)、TA質(zhì)量分?jǐn)?shù)(B)、ASA含量(C)和SSC(D)的影響Fig. 3 Effect of exogenous glucose on the hardness (A), and TA (B),ASA (C) contents and SSC (D) of postharvest apricot fruit

        如圖3B、C所示,貯藏期間,杏果實(shí)TA質(zhì)量分?jǐn)?shù)與ASA含量呈下降趨勢(shì)。在貯藏初期,對(duì)照組TA質(zhì)量分?jǐn)?shù)下降迅速,在第14天時(shí)100、200 mmol/L和400 mmol/L葡萄糖處理組TA質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別是對(duì)照組的1.11、1.12、1.08 倍(P<0.05);在貯藏第35天時(shí),100、200 mmol/L葡萄糖處理組杏果實(shí)AsA含量分別比對(duì)照組高14.75%、25.98%(P<0.05)。說(shuō)明適宜濃度的外源葡萄糖處理可有效維持貯藏期間杏果實(shí)TA質(zhì)量分?jǐn)?shù)與ASA含量。

        如圖3D所示,在貯藏前期SSC不斷上升,對(duì)照組杏果實(shí)SSC在14 d時(shí)達(dá)到峰值,而各葡萄糖處理組杏果實(shí)SSC在21 d時(shí)達(dá)到頂峰,此時(shí)(21 d),100、200 mmol/L和400 mmol/L葡萄糖處理組杏果實(shí)SSC比對(duì)照組分別高10.61%、8.84%、7.07%(P<0.05)。在42 d時(shí),100、200 mmol/L和400 mmol/L葡萄糖處理組杏果實(shí)SSC分別是對(duì)照組的1.06、1.13、1.07 倍(P<0.05)。說(shuō)明適宜濃度的外源葡萄糖處理可有效保持杏果實(shí)的SSC。

        綜上所述,外源葡萄糖處理可維持杏果實(shí)的貯藏品質(zhì),但以200 mmol/L葡萄糖處理效果最佳,故將200 mmol/L葡萄糖處理作為最佳濃度用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)分析。

        2.3 外源葡萄糖處理對(duì)杏果實(shí)采后細(xì)胞膜滲透率及MDA含量的影響

        如圖4A、B所示,在貯藏過(guò)程中,杏果實(shí)的MDA含量與細(xì)胞膜滲透率呈上升趨勢(shì)。但200 mmol/L葡萄糖處理組杏果實(shí)MDA含量與細(xì)胞膜電解質(zhì)滲透率上升速率低于同期對(duì)照組。在貯藏第49天時(shí),對(duì)照組MDA含量比200 mmol/L葡萄糖處理組高0.27 倍(P<0.05),細(xì)胞膜滲透率比200 mmol/L葡萄糖處理組高0.18 倍(P<0.05)。結(jié)果表明外源葡萄糖處理可顯著抑制杏果實(shí)貯藏期MDA的積累與細(xì)胞膜電解質(zhì)滲透率的上升。

        2.4 外源葡萄糖處理對(duì)杏果實(shí)采后可溶性糖含量的影響

        如圖5A所示,在貯藏第0~14天,對(duì)照組蔗糖含量迅速下降,而葡萄糖處理組則呈上升趨勢(shì)。在貯藏的21~35 d,各組蔗糖含量均呈下降趨勢(shì)。在貯藏第28~42天,對(duì)照組蔗糖含量顯著高于葡萄糖處理組,在第28天時(shí),對(duì)照組蔗糖含量比葡萄糖處理組高0.12 倍(P<0.05)。如圖5B所示,葡萄糖處理組在貯藏期間(14~49 d)果糖含量逐漸上升,從第21天起兩組間開(kāi)始出現(xiàn)顯著性差異。在貯藏第49天時(shí),葡萄糖處理組果糖含量比對(duì)照組高6.55%(P<0.05)。如圖5C所示,貯藏初始時(shí)外源葡萄糖處理組葡萄糖含量呈快速,在貯藏第7天時(shí),外源葡萄糖處理組葡萄糖含量比對(duì)照組高8.70%(P<0.05),且整個(gè)貯藏過(guò)程中外源葡萄糖處理組的葡萄糖含量均顯著高于對(duì)照組。

        圖5 外源葡萄糖處理對(duì)杏果實(shí)蔗糖(A)、果糖(B)和葡萄糖(C)含量的影響Fig. 5 Effect of exogenous glucose treatment on the contents of sucrose (A),fructose (B) and glucose (C) in apricot fruit

        2.5 外源葡萄糖處理對(duì)杏果實(shí)采后蔗糖代謝相關(guān)酶活力的影響

        如圖6A、B所示,在整個(gè)貯藏期間杏果實(shí)AI與NI活力先上升后下降,并在21 d時(shí)達(dá)到峰值,此時(shí)對(duì)照組AI活力比外源葡萄糖處理組低26.94%(P<0.05);外源葡萄糖處理組的NI活力比對(duì)照組高21.49%(P<0.05)。在貯藏后期,對(duì)照組AI與NI活力下降迅速,在49 d時(shí),外源葡萄糖處理組杏果實(shí)AI活力是對(duì)照組的1.83 倍(P<0.05);對(duì)照組NI活力在42 d時(shí)比外源葡萄糖處理組低22.22%(P<0.05)。

        圖6 外源葡萄糖處理對(duì)杏果實(shí) AI(A)、NI(B)、SS(C)和SPS(D)活力的影響Fig. 6 Effect of exogenous glucose treatment on AI (A), NI (B), SS (C)and SPS (D) activities of apricot fruit

        如圖6C所示,杏果實(shí)SS活力呈先上升后下降趨勢(shì),在14 d時(shí),外源葡萄糖處理組SS活力是對(duì)照組的1.36 倍(P<0.05),在第42天時(shí),外源葡萄糖處理組杏果實(shí)SS活力比對(duì)照組高23.91%(P<0.05)。

        如圖6D所示,貯藏期間,對(duì)照組杏果實(shí)SPS活力呈逐漸下降趨勢(shì),而外源葡萄糖處理組在貯藏前期(0~14 d)SPS活力略有增加,之后呈下降趨勢(shì)。在14 d時(shí),外源葡萄糖處理組SPS活力是對(duì)照組的1.21 倍(P<0.05)。在第49天時(shí),外源葡萄糖處理組杏果實(shí)SPS活力比對(duì)照組高1.71 倍(P<0.05)。

        3 討 論

        葡萄糖是植物細(xì)胞中主要的代謝前體及生物質(zhì)來(lái)源,同時(shí)還可作為信號(hào)分子參與調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育進(jìn)程[16,24]。有研究表明,外源葡萄糖處理可有效提高青花菜貨架期間的抗氧化相關(guān)酶的活性,從而降低其衰老與黃化的速度[25-26]。Wu Jiang等[27]研究發(fā)現(xiàn),葡萄糖可作為滲透調(diào)節(jié)劑,通過(guò)保持細(xì)胞質(zhì)膜完整性來(lái)保護(hù)西瓜幼苗免受低溫脅迫。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),200 mmol/L葡萄糖處理可通過(guò)調(diào)控蔗糖代謝相關(guān)酶活性,提高貯藏期間葡萄糖與果糖的含量,抑制MDA的積累與細(xì)胞膜電解質(zhì)滲透率的上升,從而有效降低果實(shí)冷害發(fā)病率與冷害指數(shù)的升高,保持杏果實(shí)的貯藏品質(zhì)。

        細(xì)胞膜損傷是植物遭受低溫脅迫的原初反應(yīng)結(jié)果[12],在低溫環(huán)境下,細(xì)胞膜由液晶狀轉(zhuǎn)變?yōu)槟z狀,結(jié)構(gòu)受損,致使胞內(nèi)電解質(zhì)外滲[5,12]。此外,在低溫脅迫下活性氧過(guò)度積累引起的膜過(guò)氧化損傷也是加劇冷害的重要原因之一[5,28-29]。由此說(shuō)明,果實(shí)抗冷性的強(qiáng)弱與細(xì)胞膜完整性密切相關(guān)。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn),蔗糖代謝在果實(shí)抵御低溫脅迫中發(fā)揮了重要作用[7,12,30]。SPS、SS、AI、NI是果實(shí)蔗糖代謝的關(guān)鍵酶,SS在蔗糖的轉(zhuǎn)化過(guò)程中具有雙重作用,可同時(shí)參與蔗糖的合成與分解;AI與NI可催化蔗糖分解為葡萄糖與果糖;而SPS則可催化果糖、葡萄糖轉(zhuǎn)化為蔗糖[7,23]。Zhu Yi等[31]研究發(fā)現(xiàn),低溫脅迫下較高的AI、NI和SS活性所導(dǎo)致的蔗糖和還原糖的積累與木瓜果實(shí)較高的抗冷性有關(guān)。在本實(shí)驗(yàn)中,葡萄糖處理組在貯藏前期(0~14 d)SS與SPS活力出現(xiàn)上升趨勢(shì),隨后緩慢下降;而對(duì)照組SPS活力在整個(gè)貯藏期間呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。其原因可能是外源葡萄糖的介入打破了可溶性糖轉(zhuǎn)化的平衡,促進(jìn)了貯藏前期蔗糖的合成。而在貯藏中后期,葡萄糖處理組的NI、AI活力在第21天時(shí)達(dá)到高峰,且始終高于對(duì)照組,這可能會(huì)促使蔗糖分解,從而導(dǎo)致葡萄糖處理組果實(shí)的蔗糖含量低于對(duì)照組果實(shí),進(jìn)而促使葡萄糖處理組果實(shí)保持較高水平的葡萄糖與果糖含量。這與Wang Zheng等[3]的研究結(jié)果相似,即杏果實(shí)耐寒性的增強(qiáng)與其較高的葡萄糖與果糖含量有關(guān)。同時(shí),在本研究中,外源葡萄糖處理顯著抑制了果實(shí)貯藏期間MDA的積累與細(xì)胞膜電解質(zhì)滲透率的上升。其原因可能是外源葡萄糖處理有效提高了貯藏期間杏果實(shí)的葡萄糖與果糖的含量,增強(qiáng)了果實(shí)的抗氧化能力,這有利于增強(qiáng)細(xì)胞膜的穩(wěn)定性,從而顯著降低果實(shí)的冷害發(fā)病率與冷害指數(shù)。研究表明,熱處理可通過(guò)提高枇杷果實(shí)葡萄糖含量來(lái)誘導(dǎo)增加果實(shí)抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)活性,從而降低膜過(guò)氧化損傷程度,提高果實(shí)抗冷性[12],這與本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果相似。此外,研究表明,葡萄糖等還原糖也可作為滲透壓調(diào)節(jié)劑,通過(guò)穩(wěn)定杏果實(shí)冷藏期間的細(xì)胞滲透壓減輕膜損傷程度,從而減少冷害的發(fā)生[3,31]。

        冷害所造成的細(xì)胞不可逆損傷是導(dǎo)致果實(shí)品質(zhì)劣變、縮短貯藏期的主要原因之一[7,23,32]。當(dāng)果實(shí)遭受冷害時(shí),果皮出現(xiàn)褐變現(xiàn)象,色澤變暗,同時(shí)果實(shí)內(nèi)部組織絮敗軟化。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組相比,適宜濃度的外源葡萄糖處理可有效保持杏果實(shí)的色澤與硬度,同時(shí)有效抑制貯藏期間SSC、TA質(zhì)量分?jǐn)?shù)與ASA含量的下降,較好地保持果實(shí)的貯藏品質(zhì)。在草莓果實(shí)的研究中也發(fā)現(xiàn)類似的結(jié)果,即外源葡萄糖處理維持了采后草莓的貯藏品質(zhì),延長(zhǎng)其貯藏期[18]。這說(shuō)明外源葡萄糖在降低果實(shí)冷害、保持果實(shí)貯藏品質(zhì)方面具有一定的應(yīng)用潛力與價(jià)值。

        4 結(jié) 論

        外源葡萄糖處理可有效調(diào)控杏果實(shí)貯藏期間蔗糖代謝相關(guān)酶SS、SPS、AI、NI的活力,提高果實(shí)體內(nèi)葡萄糖與果糖含量,同時(shí)降低貯藏中后期蔗糖的含量,抑制MDA的積累與細(xì)胞膜滲透率的上升;同時(shí),適宜濃度(200 mmol/L)的外源葡萄糖處理可保持杏果實(shí)的硬度、色澤、SSC、TA質(zhì)量分?jǐn)?shù)與ASA含量,顯著降低杏果實(shí)的冷害發(fā)病率與冷害指數(shù),說(shuō)明外源葡萄糖處理可通過(guò)調(diào)控杏果實(shí)蔗糖代謝增強(qiáng)果實(shí)的抗冷性。

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