陳晨 程峰

【摘要】目的：綜合分析復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（recurrent spontaneous abortion，RSA）患者進(jìn)行抗核抗體相關(guān)檢測的臨床價(jià)值，為其診斷和治療提供病例支持。方法：選定2020年6月—2021年9月在南京市婦幼保健院就診的245例RSA患者作為觀察組，另選擇同時(shí)期已正常生育的健康女性142例作為對照組。運(yùn)用化學(xué)發(fā)光法與免疫印跡法分別進(jìn)行抗核抗體（antinuclear antibody，ANA）和抗核抗體譜（antinuclear antibody spectrum，ANAs）的檢測。結(jié)果：觀察組血清樣本中ANA陽性結(jié)果為32例，陽性率13.06%，ANAs陽性結(jié)果為22例，陽性率8.98%，對照組血清樣本中ANA陽性結(jié)果為4例，陽性率2.82%，ANAs陽性結(jié)果為3例，陽性率2.11%。兩組ANA和ANAs陽性率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在ANAs 17項(xiàng)抗體類型陽性率統(tǒng)計(jì)中，觀察組抗天然干燥綜合征A Ro60型抗體陽性率為3.27%，顯著高于對照組（2χ=4.74，P<0.05），兩組其余ANAs抗體類型陽性率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：抗核抗體和復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生發(fā)展有一定的相關(guān)性，可能是反復(fù)流產(chǎn)的原因之一，但其具體機(jī)制機(jī)理尚待進(jìn)一步明確。

【關(guān)鍵詞】抗核抗體（ANA）；抗核抗體譜（ANAs）；復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（RSA）

The value of antinuclear antibody detection in patients with recurrent miscarriage

CHEN Chen， CHENG Feng The Nanjing Medical University obstetrics and Gynecology Hospital， Nanjing Maternal and Child Health Care Hospital，

Nanjing， Jiangsu 210004， China

【Abstract】Objective：The aim of this study is to provide scientific data reference for the diagnosis and treatment of recurrent spontaneous abortion by comprehensively analyzing the detection value of antinuclear antibodies in the serum of patients with recurrent spontaneous abortion （RSA）. Methods：245 patients diagnosed with RSA in Nanjing Maternity and Child Health Hospital from June 2020 to September 2021 were selected as the observation group， and 142 healthy women who had given birth without any adverse pregnancy history during the same period were selected as the control group. Chemiluminescence and immunoblotting were used to detect antinuclear antibodies （ANA） and antinuclear antibody spectrum （ANAs）， respectively. Results The number of ANA positive cases in the observation group was 32 with the positive rate of 13.06%， and the number of ANAs positive cases was 22 with the positive rate of 8.98%.The number of ANA positive cases in the control group was 4 with the positive rate was 2.82%， and the number of ANAs positive cases was 3 with the positive rate was 2.11%. The comparison of the positive rates of ANA and ANAs between the two groups was statistically significant （P<0.05）. In the ANAs 17 antibody type positive rate statistics， the observation group has the highest positive rate of anti-natural sjogren syndrome A Ro60 （SSA/Ro60kD） antibodies with the positive rate of 3.27%， which is significantly higher than that of the control group （2χ=4.74， P<0.05）. There was no statistically significant difference in the positive rate of the other ANAs antibody types between the two groups（P>0.05）. Conclusion：There is a certain correlation between antinuclear antibodies and the occurrence and development of recurrent miscarriage， which may be one of the reasons for recurrent miscarriage， but its specific mechanism needs to be further clarified.

【Key？Words】Antinuclear antibody； Antinuclear antibody profile； Recurrent miscarriage

依據(jù)世界衛(wèi)生組織指南，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)是指與同一對象連續(xù)發(fā)生3次或3次以上且妊娠小于28周的自然妊娠失敗。RSA的病因難明且無典型的臨床特征，其中能找到明確病因的僅占50%，主要包括母體生殖器官結(jié)構(gòu)異常，內(nèi)分泌系統(tǒng)功能紊亂，夫妻染色體異常，生殖道感染，免疫功能異常及血栓形成傾向[1]。近年來，我國醫(yī)療水平不斷進(jìn)步，臨床研究者們逐步意識到RSA與抗核抗體具有一定的相關(guān)性，本研究對245例RSA患者血清中的抗核抗體和17項(xiàng)抗核抗體譜進(jìn)行檢測，綜合分析檢測結(jié)果的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選定2020年6月—2021年9月在南京市婦幼保健院就診并診斷為RSA的患者245例作為觀察組，年齡24～45歲，平均年齡（35.35±12.39）歲。選定依據(jù)：①連續(xù)發(fā)生3次或3次以上反復(fù)自然流產(chǎn)；②同一性伴侶；③母體生殖道解剖結(jié)構(gòu)正常；④無內(nèi)分泌紊亂；⑤凝血功能正常；⑥雙方染色體正常；⑦精液常規(guī)檢測結(jié)果正常。再選擇同一時(shí)期無自身免疫性疾病史的已經(jīng)正常生育的健康女性142例作為對照組，年齡23～44歲，平均年齡（34.35±12.39）歲。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集 兩組選定人員均于早上空腹抽取靜脈血3mL于不含抗凝劑的采血管中，待靜置凝固后以3500轉(zhuǎn)每分鐘離心15分鐘，然后吸取血清于凍存管中并做好標(biāo)記，最后放入-80℃冰箱冷凍保存，測定前血清需重新復(fù)溶。

1.2.2 檢測方法及觀察指標(biāo) ANA檢測采用的是化學(xué)微粒子發(fā)光法，ANAs檢測運(yùn)用的是特定膜條的免疫印跡技術(shù)。ANAs包括17種不同抗體類型：抗核糖核蛋白（nRNP）抗體、抗史密斯（Sm）抗體、抗天然干燥綜合征A Ro60型（SSA/ Ro60kD）抗體、抗干燥綜合征A Ro52型（SSA/Ro52kD）抗體、抗干燥綜合征B（SSB/La）抗體、抗硬皮病70（Scl-70）抗體、抗皮肌炎-系統(tǒng)硬化癥（PM-Scl）抗體、抗組氨酰轉(zhuǎn)運(yùn)RNA合成（Jo-1）抗體、抗著絲點(diǎn)蛋白B（Cenp B）抗體、抗增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）抗體、抗雙鏈DNA抗體（dsDNA）、抗核小體抗體（AnuA）、抗組蛋白抗體（AHA）、抗核糖體P蛋白抗體（ARPA）、抗線粒體M2抗體（M2， AMA-M2）、抗Mi-2抗體、抗ku抗體。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料采用（%）表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（χ±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察組與對照組ANA及ANAs陽性率比較

觀察組血清樣本中ANA陽性32例，陽性率為13.06%；對照組血清樣本中ANA陽性4例，陽性率為2.82%。兩組ANA陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察組血清樣本中ANAs陽性22例，陽性率為8.98%；對照組血清樣本ANAs陽性3例，陽性率為2.11%。兩組ANAs陽性率比較，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2 觀察組與對照組ANAs抗體類型陽性率比較

觀察組22例ANAs陽性樣本中存在1種或幾種抗體類型陽性，各種抗體類型檢出頻次總數(shù)為27例次，其中抗SSA/ Ro60kD抗體陽性率為3.27%，顯著高于對照組（2χ=4.74，P=0.03），見表2。

3 討論

RSA的發(fā)生在育齡女性中并不罕見，同時(shí)其再次流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)伴隨流產(chǎn)次數(shù)的增加而不斷升高，據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，RSA患者再次流產(chǎn)的概率可高達(dá)75%[2]。隨著我國生殖免疫學(xué)不斷進(jìn)步，不少學(xué)者逐步認(rèn)識到RSA的發(fā)生與發(fā)展和患者的免疫功能異常息息相關(guān)[3]。

ANA是一組對細(xì)胞核內(nèi)DNA，RNA，蛋白或多種成分復(fù)合物產(chǎn)生的自身抗體，其靶抗原具有多樣性。自身免疫性疾病ANA常提示陽性，但在正常人群尤其是女性的血清中ANA的陽性率也達(dá)2%～6%[4-5]。目前對于ANA的作用機(jī)理仍不十分明確，但多數(shù)觀點(diǎn)認(rèn)為ANA的出現(xiàn)誘導(dǎo)自身免疫過程的發(fā)生，抗原抗體復(fù)合物不斷累積，影響胚胎在母體內(nèi)的發(fā)育，最終導(dǎo)致流產(chǎn)[6]。因此，ANA在RSA患者中亦有一定的特異性臨床表現(xiàn)，有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，經(jīng)統(tǒng)計(jì)RSA患者中ANA的陽性率為13.21%，顯著高于對照組的0.9%[7]；也有研究結(jié)果顯示，采用輔助生殖技術(shù)后仍發(fā)生自然流產(chǎn)患者的血清中ANA檢測結(jié)果的陽性率可高達(dá)39.45%，也顯著高于正常對照組[8]。然而，ANA檢測在臨床上對于RSA患者的應(yīng)用價(jià)值仍有爭議。依據(jù)本次研究的結(jié)果，觀察組ANA陽性率顯著升高（13.06% vs2.82%），提示ANA與RSA具有相關(guān)性，存在一定的檢測價(jià)值。

抗核抗體譜實(shí)際是按核內(nèi)各個(gè)分子不同性能區(qū)分開的一組有著不同臨床意義的自身抗體，但在正常人群中，也可出現(xiàn)個(gè)別抗體類型陽性。它們是風(fēng)濕免疫性疾病的常用標(biāo)志物，但是其與不孕癥、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)等生殖障礙疾病的相關(guān)性， 目前觀點(diǎn)仍有分歧[9]。有研究者發(fā)現(xiàn)，抗dsDNA抗體、抗核糖體P蛋白抗體、抗Jo-1抗體會導(dǎo)致早期自然流產(chǎn)；也有文獻(xiàn)報(bào)道抗Sm抗體、抗SSA/Ro52kD抗體、抗SSA/Ro60kD抗體、抗 SSB/La抗體與RSA緊密相關(guān)[10]。本次研究的抗核抗體譜17項(xiàng)抗體類型中，結(jié)果經(jīng)分析后僅抗SSA/Ro60kD抗體和RSA關(guān)系密切（P<0.05），與之前的文獻(xiàn)報(bào)道有部分一致性。

綜上所述，抗核抗體對于復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者雖然并不是特異性的抗體，但其與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生具有一定的相關(guān)性。因此，在臨床上抗核抗體和抗核抗體譜的聯(lián)合檢測對于復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的早期篩查、病因明確和療程安排具有一定的指導(dǎo)意義。

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