孔德平 王增池

（1 滄州市農(nóng)林科學(xué)院 河北 滄州 061000；2 滄州職業(yè)技術(shù)學(xué)院 河北 滄州 061000）

食用菌是指可供人們食用或藥用，并能形成大型肉質(zhì)、角質(zhì)、膜質(zhì)、革質(zhì)、木栓質(zhì)或木質(zhì)的子實(shí)體或菌核類組織的一大群龐雜的大型真菌的總稱。食用菌除有重要的食用價值外，有些種類還具有防癌、延緩衰老等保健醫(yī)療作用。有些種類有明顯的降血壓和降低膽固醇的功效，具有良好保健功能，如有些食用菌子實(shí)體的提取物有清除體內(nèi)自由基、提高免疫力等功效，深受消費(fèi)者的青睞。同時食用菌在栽培上具有投資少、見效快、效益好等特點(diǎn)，是廣大城鄉(xiāng)致富的重要門路之一[1]。然而，食用菌在生產(chǎn)中經(jīng)常遭受雜菌危害，其不僅與食用菌爭奪養(yǎng)料和空間，而且有些還會分泌多種毒素抑制食用菌菌絲的生長和子實(shí)體的發(fā)育，進(jìn)而造成減產(chǎn)及品質(zhì)下降[2～3]。因此，避免雜菌污染是食用菌生產(chǎn)過程中必須要解決的問題之一。選用化學(xué)殺菌劑菇豐，研究其對大球蓋菇、滑菇、雞腿菇、茶樹菇及污染真菌和細(xì)菌生長速率的影響，旨在篩選出既能有效控制真菌和細(xì)菌污染，又對食用菌生長影響較小的殺菌劑使用量。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料。大球蓋菇、雞腿菇(野生雞腿菇)、滑菇(C3-3)、茶樹菇，引自江蘇海洋大學(xué)海洋學(xué)院微生物研究室。

1.2 不同濃度菇豐對供試食用菌菌絲及雜菌生長影響的測定

1.2.1 培養(yǎng)基配制方法。采用PDA培養(yǎng)基，PDA培養(yǎng)基滅菌完成后，待冷卻至50℃左右時，加入不同量的菇豐，同時設(shè)置對照(不加菇豐的PDA培養(yǎng)基)，冷卻后制成含藥平板。具體加藥量如表1所列。

表1 含藥(菇豐)PDA培養(yǎng)基配制表

1.2.2 接種與培養(yǎng)方法。將活化后的菌種及污染雜菌(霉菌和細(xì)菌)分別接種在含藥平板及對照平板內(nèi)，活化后的菌種接種在1號位置，霉菌接種在2號位置，細(xì)菌接種在3號位置。1個平板接種1種菌種和2種雜菌，標(biāo)記好所接菌種及雜菌，置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中，每天觀察1次，發(fā)現(xiàn)污染及時標(biāo)記處理。

1.2.3 觀察方法。每天測量菌絲及雜菌在平板上的直徑，記錄數(shù)據(jù)，同時計算生長速率，并及時拍照。菌絲生長速度V(cm/d)計算公式為：V=(R－r)/D。其中：R為菌落直徑；r為接種塊直徑；D為培養(yǎng)天數(shù)。

1.3 不同培養(yǎng)基上大球蓋菇菌絲對抗污染真菌以及污染細(xì)菌能力的測定

1.3.1 培養(yǎng)基配制方法。具體操作見1.2.1。

1.3.2 接種與培養(yǎng)方法。具體操作見1.2.2。

1.3.3 觀察方法。每天測量菌絲及雜菌在平板上的直徑，記錄數(shù)據(jù)，同時計算生長速率，并觀察3種菌的對峙情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度菇豐對供試食用菌菌絲及雜菌生長的影響。結(jié)果見表2。試驗(yàn)結(jié)果表明，不同濃度的菇豐對雞腿菇、茶樹菇、大球蓋菇、滑菇及霉菌都具有抑制作用。在食用菌測試中，就雞腿菇而言，菇豐濃度為0.0077%時，生長速率相較于其他濃度快；菇豐對茶樹菇菌絲生長抑制作用最明顯，茶樹菇在生長過程中先以氣生菌絲形式生長，隨后菌絲貼于培養(yǎng)基緩慢生長，其中0.01%濃度的菇豐對茶樹菇的影響相對于其他兩個濃度要??；大球蓋菇在含菇豐的PDA平板上的生長速率是4種測試食用菌中最大的，抑制作用是最小的，其中0.0077%濃度的菇豐對大球蓋菇的生長影響相較于其他兩個濃度要小；在滑菇試驗(yàn)中，菇豐濃度為0.0077%時，對菌絲的抑制相對于其他兩個濃度要小。在污染雜菌的測試中，霉菌的生長速率與菇豐的濃度呈正比，菇豐濃度越低，霉菌生長越慢；細(xì)菌在含不同濃度菇豐的PDA培養(yǎng)基上生長速率比對照要快。

表2 不同濃度的含藥菇豐PDA培養(yǎng)基對4種食用菌及雜菌的影響

2.2 不同培養(yǎng)基上大球蓋菇菌絲對抗污染真菌以及污染細(xì)菌能力的表現(xiàn)。從圖1～4可以看出，大球蓋菇和霉菌生長過程中會形成對峙，2種真菌間會形成一條對峙線，從各組正面圖片中可以看出，大球蓋菇有一定的覆蓋能力，可以有少量菌絲生長覆蓋對峙線附近的霉菌；細(xì)菌對霉菌和大球蓋菇的生長都具有抑制作用，從圖1～4中可以看出，細(xì)菌與大球蓋菇和霉菌并沒有形成對峙線，但在細(xì)菌和霉菌及大球蓋菇之間有一片無任何東西生長的“緩沖”區(qū)域，由此可以推斷，這種細(xì)菌是通過分泌產(chǎn)生某種無色透明物質(zhì)來抑制大球蓋菇和霉菌的生長。

圖1 大球蓋菇與霉菌及細(xì)菌在PDA培養(yǎng)基上對抗圖

圖2 大球蓋菇與霉菌及細(xì)菌在含菇豐濃度為0.01%的PDA培養(yǎng)基上對抗圖

圖3 大球蓋菇與霉菌及細(xì)菌在含菇豐濃度為0.0077%的PDA培養(yǎng)基上對抗圖

圖4 大球蓋菇與霉菌及細(xì)菌在含菇豐濃度為0.00625%的PDA培養(yǎng)基上對抗圖

3 結(jié)論與討論

試驗(yàn)表明，不同濃度的菇豐對雞腿菇、茶樹菇、大球蓋菇、滑菇及霉菌都具有抑制作用，菇豐濃度為0.0077%時，雞腿菇的生長速率相較于其他濃度快；菇豐對茶樹菇菌絲生長抑制作用在4種供試食用菌中最明顯，其中0.01%濃度的菇豐對茶樹菇的影響相對于其他兩個濃度要小；大球蓋菇在含菇豐的PDA平板上的生長速率是4種供試食用菌中最大的，抑制作用是最小的，其中0.0077%濃度的菇豐對大球蓋菇的生長影響相對于其他兩個濃度要??；在滑菇試驗(yàn)中，菇豐濃度為0.0077%時，對菌絲的抑制相對于其他兩個濃度要小。在污染雜菌的測試中，霉菌的生長速率與菇豐的濃度呈正比，菇豐濃度越低，霉菌生長越慢；細(xì)菌在含不同濃度菇豐的PDA培養(yǎng)基上生長速率比普通PDA培養(yǎng)基要快。

馬林[4]等人指出，殺菌劑對食用菌和雜菌菌絲生長都有一定的抑制作用。本次試驗(yàn)結(jié)果與之相符。但馬林在試驗(yàn)中采用稀釋濃度為1000倍的30%菇豐做出的試驗(yàn)結(jié)果，而本次試驗(yàn)采用預(yù)制相似濃度時，各種供試食用菌基本都無任何生長趨勢，分析認(rèn)為可能是菌株的差異、菌種的品質(zhì)及活力等方面存有一定的差別。謝春芹[5]等人曾報道，不同濃度的菇豐對不同霉菌抑制效果不同。本試驗(yàn)結(jié)論與上述報道的結(jié)論基本相符。

殺菌劑在食用菌上的應(yīng)用，應(yīng)嚴(yán)格按照國家農(nóng)業(yè)部頒布的相關(guān)條例執(zhí)行，避免產(chǎn)生殘留，以確保食用菌的品質(zhì)不受影響。