趙娟娟 高 越 劉 言 楊世威

（1 衡水學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院 河北 衡水 053000；2 河北省果蔬發(fā)酵技術(shù)創(chuàng)新中心 河北 衡水 053000）

黃頂菊是一種外來入侵物種，原產(chǎn)地是南美洲，1年生草本植物，根系發(fā)達(dá)，耐鹽堿貧瘠，抗逆性強(qiáng)。一旦入侵農(nóng)田，將威脅農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)及生態(tài)環(huán)境安全[1]。但如果能對(duì)其進(jìn)行遏制的同時(shí)，物盡其用，也會(huì)變廢為寶，為人們的生活帶來益處。

黃頂菊花期長(zhǎng)，顏色鮮艷，其花中含有的黃色素可以作為天然植物色素應(yīng)用到食品、藥品、化妝品等領(lǐng)域，安全性高，且還具有清除自由基等抗氧化生物活性成分的作用，有利于人們身體健康[2]。黃色素的提取工藝研究對(duì)提高黃色素的產(chǎn)量、加快黃頂菊廢物再利用起著至關(guān)重要的作用。

1 材料與方法

1.1 主要材料、試劑與設(shè)備。黃頂菊，采摘自河北省衡水市衡水湖；試劑為95%乙醇；設(shè)備：HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋，江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司；UV-5500紫外分光光度計(jì)，上海元析儀器有限公司；AX224ZH/E電子天平，常熟奧豪斯儀器制造有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 工藝流程。黃頂菊采摘→剪取黃花部分→除雜→干燥→粉碎→過篩→提取→測(cè)定。

1.2.2 單因素試驗(yàn)。設(shè)計(jì)乙醇體積分?jǐn)?shù)(50%、60%、70%、80%、90%)，料液比(1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30)，提取溫度(50℃、60℃、70℃、80℃、90℃)，提取時(shí)間(60min、90min、120min、150min、180min)進(jìn)行單因素試驗(yàn)[3]。

1.2.3 正交試驗(yàn)。本試驗(yàn)設(shè)置乙醇濃度(A)、溫度(B)、時(shí)間(C)、料液比(D)4個(gè)因素，每個(gè)因素設(shè)3個(gè)水平進(jìn)行提取，以提取液的吸光度×體積為指標(biāo)，確定最佳提取工藝條件[4]。

表1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 乙醇濃度對(duì)黃色素提取的影響。取1.000g黃頂菊花粉末，60℃回流提取90min，按1∶15加入不同濃度乙醇，試驗(yàn)結(jié)果見圖1。由圖1可知，隨著乙醇濃度的增加，吸光度上升，在70%時(shí)吸光度達(dá)到最大，然后降低。高濃度的乙醇使黃色素提取率降低，因此選擇70%乙醇作為浸提溶劑。

圖1 乙醇濃度對(duì)黃色素提取的影響

2.1.2 料液比對(duì)黃色素提取的影響。取1.000g黃頂菊花粉末，按不同料液比加入最佳濃度乙醇，60℃回流提取90min，試驗(yàn)結(jié)果見圖2。由圖2可以得知，隨著料液比的增加，黃色素得率在不斷上升，當(dāng)達(dá)到1∶20之后上升趨勢(shì)減小。從工業(yè)上考慮到溶液增多與色素量增加不成比例，且后期溶劑回收困難，選擇料液比為1∶20。

圖2 料液比對(duì)黃色素提取的影響

2.1.3 溫度對(duì)黃色素提取的影響。取1.000g黃頂菊花粉末，按最佳料液比加入乙醇，在不同溫度下回流提取90min，試驗(yàn)結(jié)果見圖3。由圖3可得知，隨著溫度的增加，吸光度呈先增加后下降趨勢(shì)。因?yàn)檫m當(dāng)增溫可提高色素在溶液中的溶解度，但高溫可能會(huì)破壞色素。故選擇60℃為浸提溫度。

圖3 溫度對(duì)黃色素提取的影響

2.1.4 提取時(shí)間對(duì)黃色素提取的影響。取1.000g黃頂菊花粉末，按最佳料液比加入乙醇，上述最佳溫度下回流提取不同時(shí)間，試驗(yàn)結(jié)果見圖4。由圖4可知，隨著浸提時(shí)間的增長(zhǎng)，吸光值在上升，在浸提時(shí)間達(dá)到120min之后開始下降?？赡苁且?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間的浸泡造成色素的分解。因此選擇120min作為浸提時(shí)間。

圖4 提取時(shí)間對(duì)黃色素提取的影響

2.2 正交試驗(yàn)結(jié)果分析。正交試驗(yàn)結(jié)果及方差分析見表2、表3。表2和表3數(shù)據(jù)顯示，根據(jù)所得R值大小，得到各因素對(duì)黃色素提取影響的主次順序?yàn)椋簻囟龋疽掖紳舛龋玖弦罕龋緯r(shí)間。根據(jù)表3的數(shù)據(jù)可知：在95%的置信區(qū)間內(nèi)，各因素的F比都小于F臨界值，各因素對(duì)黃色素提取的影響均不顯著。提取工藝最佳組合為5號(hào)A2B2C3D1。正交試驗(yàn)得到的5號(hào)組合和理論最優(yōu)組合不一致，按照理論最優(yōu)組合A2B2C2D2進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，A2B2C2D2組合黃色素提取值高于5號(hào)組合，由此得出最佳工藝條件為：乙醇濃度70%，提取溫度60℃，提取時(shí)間120min，料液比1∶20。

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

表3 正交試驗(yàn)方差分析

3 結(jié)論

采用回流浸提法提取黃頂菊黃色素，通過單因素試驗(yàn)和正交優(yōu)化，得到的最佳提取工藝條件為料液比為1∶20，70%乙醇，60℃下浸提120min。