楊麗

食品安全是當今全社會共同關注的一個話題，作為食品安全管控的一個重要環(huán)節(jié)，食品檢驗在其中起著非常重要的作用。食品檢驗標準有國家標準、行業(yè)標準、地方標準、企業(yè)標準，此外還有一些非標準方法和自制方法?！禦T/214-2017檢驗檢測機構資質(zhì)認定能力評價 檢驗檢測機構通用要求》中規(guī)定，采用法定標準未收載的檢驗方法前都要進行方法驗證和確認。

一、方法驗證和確認前的準備

在進行方法驗證和確認前，實驗室應對所對應的檢驗方法進行分析，對實驗室設備、材料、人員和檢驗環(huán)境等直接影響檢測結果的因素進行評估，查看本實驗室是否具備能夠準確執(zhí)行檢驗檢測標準方法的能力、是否符合檢驗檢測工作的基本要求。

二、方法驗證和確認中的三個重要參數(shù)

實驗時，檢驗人員通過核查一個或多個技術參數(shù)是否能達到檢測標準要求來驗證該方法是否適用于本實驗室，具體參數(shù)包括方法的選擇性、方法的適用范圍、精密度、正確度、檢出限和/或定量限、標準曲線、穩(wěn)健度、靈敏度、結果的測量不確定度等。下面就其中幾個參數(shù)進行闡述。

1.精密度。精密度可以通過多次測量或者再現(xiàn)性的方法來取得。重復性的測定通常對一個樣品測定7次;或對2個樣品，每個樣品測定4次;或對3個樣品，每個樣品測定3次。一般用計算測量所得數(shù)據(jù)的偏差、標準偏差或相對標準偏差表示，也可用變異系數(shù)表示，計算得到標準偏差后除以平均值后的百分率即為變異系數(shù)。檢測過程中要注意被測組分含量不同，其變異系數(shù)的要求也不同。再現(xiàn)性可通過計算測量一系列的多個樣品的數(shù)據(jù)標準偏差，或計算多個系列測定結果數(shù)據(jù)的合成標準偏差來表示。

2.正確度。根據(jù)檢驗方法進行測量時，存在系統(tǒng)誤差意味著正確度差，一般通過回收率的測定來評估。100%的回收率并不一定意味著好的正確度，但差的回收率則一定意味著正確度差。測定回收率時，應盡可能覆蓋整個濃度測試范圍，用與樣品的基質(zhì)匹配且濃度相近的有證標準物質(zhì)進行測試?？捎靡阎兌鹊臉藴饰镔|(zhì)做加標回收測定，在已知被測成分含量的樣品中再精密加入一定量的已知純度的被測成分標準物質(zhì)，依據(jù)檢測方法測定。用測定值與被測物質(zhì)中含被測成分量之差，除以加入標準物質(zhì)量來計算回收率。注意被測物質(zhì)濃度水平不同，回收率偏差范圍也不同。

3.標準曲線。標準曲線內(nèi)容應包括標準曲線數(shù)學方程式以及標準曲線的工作范圍、濃度范圍等。標準曲線一般作6個校準點（包括零濃度），一般以檢出限的5-10倍為第一個點，以后根據(jù)1倍遞增，最高濃度是最低濃度的10-20倍之間為宜，具體實驗可根據(jù)儀器的靈敏度來調(diào)整。每個校準點測量時重復測量3次或更多，并計算平均值。實驗室檢測一般是用定量的方法，線性回歸方程的相關系數(shù)應不低于0.99，實際應用中線性大于0.999才是比較理想的，這樣在整個線性范圍內(nèi)都會有一個比較滿意的結果。

方法驗證和確認結束后，要出具驗證或確認報告。一份完整的方法驗證報告要給出驗證內(nèi)容，要有驗證人員、使用儀器、使用試劑的詳細內(nèi)容，分析步驟要簡略描述，此外還要包括樣品重復測定次數(shù)、計算公式、標準曲線，包含原始數(shù)據(jù)的色譜圖、光譜圖以及這幾次測定數(shù)據(jù)的標準偏差是否符合標準要求、標準曲線線性是否符合要求、回收率是否在合理范圍內(nèi)等等內(nèi)容。通過對某一項或幾項參數(shù)的實驗，來證明此檢檢驗方法是否適用于本實驗室。

一般實驗室對國標方法缺少方法驗證，都是按照標準直接進行檢驗。方法的驗證和確認加強了對檢測結果的質(zhì)量、可靠性和一致性的分析和判斷，實驗室人員一定要對方法驗證和確認重視起來，更準確、科學地把好食品安全關口。