吳宏偉，劉剛

（徐州醫(yī)科大學(xué)附屬徐州兒童醫(yī)院，江蘇 徐州 221006）

0 引言

新生兒窒息是兒科常見疾病，發(fā)病率達(dá)5-10%，也是導(dǎo)致新生兒傷殘、死亡的主要原因[1]。研究發(fā)現(xiàn)[2]，窒息缺氧會(huì)抑制機(jī)體免疫系統(tǒng)，使新生兒的腎、腦、心肺、血液、免疫等方面受到損傷。β-內(nèi)啡肽為內(nèi)源性阿片肽，是機(jī)體合成的具阿片樣作用肽類物質(zhì)。β-內(nèi)啡肽十分重要，是31個(gè)氨基酸組成，主要分布在中樞系統(tǒng)、外周系統(tǒng)中。β-內(nèi)啡肽是分子量大前體蛋白前阿黑皮素分泌，濃度最高的處于垂體中間，表現(xiàn)出乙酰化形式。其組織特異性會(huì)引起肽類物質(zhì)產(chǎn)生。有研究發(fā)現(xiàn)，研究β-內(nèi)啡肽和許多危重疾病發(fā)病具有密切的關(guān)系。本文對窒息新生兒與健康兒分組均接受β-內(nèi)啡肽和細(xì)胞因子的各項(xiàng)檢測，分析新生兒窒息病理生理變化過程，以此為臨床確診和治療提供參考，分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料。對2018年1月至2020年2月我院收治的新生兒窒息28例、外院健康新生兒30例一般資料進(jìn)行分析，窒息組28例，平均胎齡（38.5±2.9）周；平均出生體重（3350±310）g；平均日齡（4.1±2.9）h；輕度窒息18例，重度窒息10例；健康組平均胎齡（38.6±2.8）周；平均出生體重（3280±340）g；平均日齡（4.4±2.8）h；兩組新生兒胎齡、出生體重、日齡等基礎(chǔ)資料，比較無明顯差異（P＞0.05）。納排標(biāo)準(zhǔn)：入選對象均足月，窒息組產(chǎn)前經(jīng)胎心監(jiān)護(hù)，發(fā)現(xiàn)有宮內(nèi)窘迫，檢測臍血pH≤7.2，出生5分鐘Apgar評(píng)分≤7分。家長均知情研究并簽署同意書。排除了產(chǎn)婦有產(chǎn)傷史，感染性疾病。排除了新生兒非窒息導(dǎo)致顱內(nèi)出血和頭顱血腫。

1.2 方法。兩組新生兒均在出生24-48 h內(nèi)采集血液標(biāo)本，取靜脈血3 mL，1.5 mL在低溫下用EDTA-2Na、抑肽酶進(jìn)行試管離心處理，將血漿分離保存，檢測β-內(nèi)啡肽水平。另外1.5 mL置于干燥管中，進(jìn)行血清分離，進(jìn)行細(xì)胞因子（血清白介素2、可溶性白介素2受體、白介素6、腫瘤壞死因子-α、干擾素γ）的檢測。

1.3 觀察指標(biāo)。β-內(nèi)啡肽（β-EP）根據(jù)放射免疫法進(jìn)行檢測；細(xì)胞因子：血清白介素2（IL-2）、可溶性白介素2受體（SIL-2R）、白介素6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、干擾素γ（IFN-γ）根據(jù)酶聯(lián)免疫吸附法檢測。檢測試劑盒提供方是北京海科銳生物科技中心[3]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。使用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，t檢驗(yàn)計(jì)量資料，以（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

表1 比較兩組β-內(nèi)啡肽、細(xì)胞因子水平（±s）

表1 比較兩組β-內(nèi)啡肽、細(xì)胞因子水平（±s）

組別 例數(shù) IL-2（pg/mL） SIL-2R（U/mL） IL-6（pg/mL） TNF-α（pg/mL） IFN-γ（pg/mL） β-EP（pg/mL）窒息組 28 12.10±2.86 558.50±179.63 16.01±5.22 378.65±157.4 362.15±140.45 318.25±90.50健康組 30 29.25±6.12 213.51±79.62 31.68±7.42 186.20±83.11 176.25±42.85 122.46±24.38 t - 7.3501 7.3521 6.2578 7.6100 7.8517 8.5798 P - 0.0067 0.0066 0.0123 0.0058 0.0050 0.0033

窒息組新生兒的細(xì)胞因子水平發(fā)生紊亂，β-內(nèi)啡肽水平高于健康組，各指標(biāo)水平比較有顯著差異（P＜0.05），見表1。

3 討論

新生兒窒息會(huì)引起急性缺氧、二氧化碳蓄積，導(dǎo)致組織供氧障礙，影響腦組織缺氧耐受性。研究發(fā)現(xiàn)，窒息新生兒β-EP明顯升高，而且此項(xiàng)指標(biāo)會(huì)參與到新生兒腦損傷、腦水腫等病理生理過程。窒息新生兒的β-EP升高，還會(huì)加重窒息的程度。本文對窒息新生兒β-內(nèi)啡肽和細(xì)胞因子的表達(dá)情況進(jìn)行簡單的闡述，討論如下。

3.1 β-內(nèi)啡肽的作用機(jī)理。β-內(nèi)啡肽是神經(jīng)肽的一種，可以對中樞神經(jīng)系統(tǒng)起到抑制和調(diào)節(jié)的作用。研究新生兒缺氧、缺血性腦病發(fā)現(xiàn)，研究β-內(nèi)啡肽和缺氧缺血相關(guān)腦損傷具有相關(guān)性。當(dāng)患兒大腦缺氧缺血時(shí)，檢測患兒的β-內(nèi)啡肽明顯升高。表明患兒缺氧缺血性腦病因應(yīng)激狀態(tài)影響，下丘腦會(huì)過度釋放因子，垂體前葉有腎上腺皮質(zhì)激素、β-內(nèi)啡肽等釋放，導(dǎo)致有些β-內(nèi)啡肽會(huì)釋放到血液中，有些成分會(huì)經(jīng)下丘腦外側(cè)進(jìn)到腦脊液中，經(jīng)第三腦室周β-內(nèi)啡肽神經(jīng)纖維，向腦脊液中分泌，可以檢測出患兒的腦脊液中β-內(nèi)啡肽明顯升高。而且隨著患兒病情的加重，β-內(nèi)啡肽含量越高。當(dāng)患兒處理恢復(fù)期時(shí)，β-內(nèi)啡肽會(huì)明顯降低。如果患兒俁并腦水腫，β-內(nèi)啡肽數(shù)值明顯升高。β-內(nèi)啡肽作為抑制性調(diào)節(jié)劑，會(huì)使腦水腫、腦損傷等疾病加重。所以，可以將β-內(nèi)啡肽濃度作為新生兒缺氧、缺血等腦病預(yù)后重要的衡量指標(biāo)。

3.2 分析窒息新生兒的細(xì)胞因子情況。IL-2是T輔助細(xì)胞產(chǎn)生多肽，可以促進(jìn)T細(xì)胞、淋巴因子的活化和殺傷能力，促進(jìn)殺傷細(xì)胞增殖，提高機(jī)體的免疫力。由于窒息缺氧會(huì)引起T細(xì)胞亞群比例失調(diào)，降低T輔助細(xì)胞，從而降低IL-2表達(dá)。白介素2受體活化出的SIL-2R是位點(diǎn)特異性蛋白酶裂解的片段，可以反映細(xì)胞免疫水平和細(xì)胞功能[4]。作為重要免疫抑制因子，SIL-2R水平可以觀察窒息新生兒，當(dāng)水平升高時(shí)表明病情嚴(yán)重。而IL-6水平和新生兒的免疫功能有著密切的關(guān)系，作為多功能細(xì)胞因子，能促進(jìn)淋巴細(xì)胞成熟和分化，提高NK細(xì)胞、細(xì)胞毒T細(xì)胞免疫活性，降低IL-6水平，影響新生兒免疫功能的調(diào)節(jié)作用，導(dǎo)致病情加劇。TNF-α對中性粒細(xì)胞起到激活作用，從而將病原微生物殺滅，對細(xì)胞產(chǎn)生的IL-6細(xì)胞因子進(jìn)行刺激，進(jìn)而活化T淋巴細(xì)胞。提高窒息患兒的TNF-α水平能改善新生兒免疫抑制狀態(tài)，也能保護(hù)新生兒的免疫功能。如果TNF-α水平過高，就會(huì)引起全身性反應(yīng)，影響機(jī)體正常功能。IFN-γ是白細(xì)胞產(chǎn)生的多肽，可以抗病毒、抗腫瘤，如果IFN-γ水平適量，能促進(jìn)機(jī)體免疫和應(yīng)答，若IFN-γ水平過度會(huì)導(dǎo)致免疫功能受到抑制。窒息新生兒因缺氧會(huì)出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)，受到不良影響，影響IFN-γ水平，使β-EP出現(xiàn)生物效應(yīng)[5]。β-EP是疼痛與應(yīng)激間介質(zhì)，也是神經(jīng)內(nèi)分泌和免疫調(diào)節(jié)重要的介質(zhì)，對于機(jī)體具有免疫調(diào)節(jié)的作用。有研究發(fā)現(xiàn)，窒息與內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)活性具有相關(guān)性。

3.3 研究結(jié)果討論。本次研究結(jié)果顯示，窒息組新生兒的細(xì)胞因子水平發(fā)生紊亂，β-內(nèi)啡肽水平高于健康組，各指標(biāo)水平比較有顯著差異（P＜0.05）。表明窒息刺激會(huì)使下丘腦垂體前葉中β-EP分泌，降低β-EP水平，增加外周血中β-EP的含量。窒息還會(huì)引起單個(gè)核細(xì)胞β-EP升高。促皮質(zhì)激素釋放能促進(jìn)外周血中β-EP的分泌入血，導(dǎo)致β-EP升高。β-EP也能抑制淋巴細(xì)胞中IL-2、IL-2R的釋放，對淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化起到抑制作用。表明β-EP升高會(huì)降低IL-2，兩者間呈負(fù)相關(guān)。可見，窒息新生兒研究血漿中β-內(nèi)啡肽濃度，可以作為淋巴細(xì)胞釋放和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的觀察標(biāo)準(zhǔn)，分析二者間相關(guān)性，表明掌握窒息新生兒的應(yīng)激反應(yīng)免疫指標(biāo)，可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞因子水平變化，及時(shí)實(shí)施正確治療措施，合理使用抗生素和免疫抑制藥，減少應(yīng)激反應(yīng)對患兒造成的損害。

綜上所述，通過以上研究可以發(fā)現(xiàn)，要重視窒息新生兒的相關(guān)免疫指標(biāo)，通過對β-EP與細(xì)胞因子各項(xiàng)指標(biāo)的檢測，可以對醫(yī)生臨床診斷治療提供數(shù)據(jù)參考，了解新生兒窒息程度和腦損傷情況。對于嚴(yán)重異常的細(xì)胞因子的表達(dá)，是否需要使用皮質(zhì)類固醇激素等需要進(jìn)一步進(jìn)行相關(guān)研究。