蘇振華

摘要：目的 ?探討乙肝病毒標(biāo)記物陽性表型血清標(biāo)本在乙型肝炎病毒診斷中的應(yīng)用。方法 ?選取2018年5月～2019年5月我院收治的乙肝病毒陽性患者100例作為實(shí)驗(yàn)組，另選取同期我院健康體檢者100例作為對照組，采用酶聯(lián)免疫吸附法與PCR熒光定量法對兩組乙肝病毒標(biāo)記物表型血清指標(biāo)進(jìn)行檢測，比較兩組陽性反應(yīng)組合反應(yīng)陽性率、HBV-DNA水平。結(jié)果 ?通過酶聯(lián)免疫吸附法檢驗(yàn)，在Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG等指標(biāo)中可表現(xiàn)出11種陽性反應(yīng)組合，其中HBeAb、HBsAg、HBcAb-IgG陽性反應(yīng)組合陽性率最高，其次為Presl、HBeAg、HBsAg、HBcAb-IgG陽性反應(yīng)組合;實(shí)驗(yàn)組HBV-DNA水平為（4.70±1.30）×104，對照組HBV-DNA水平為（0.80±0.10）×104，實(shí)驗(yàn)組高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 ?乙肝病毒標(biāo)記物表型血清標(biāo)本檢測在乙型肝炎病毒中診斷的價(jià)值較高，可為臨床診斷提供科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：乙型肝炎病毒;乙肝病毒標(biāo)記物表型;血清標(biāo)本

中圖分類號(hào)：R737.33 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.04.061

文章編號(hào)：1006-1959（2020）04-0179-02

Abstract：Objective ?To investigate the application of hepatitis B virus marker positive phenotype serum samples in the diagnosis of hepatitis B virus.Methods ?100 patients with HBV-positive patients admitted to our hospital from May 2018 to May 2019 were selected as the experimental group，and another 100 healthy subjects from our hospital during the same period were selected as the control group.ELISA and PCR fluorescence quantitative methods were used the serum index of HBV marker phenotype was detected in the two groups，and the positive rate of combined positive reactions and HBV-DNA levels were compared between the two groups.Results ?By enzyme-linked immunosorbent assay，11 positive reaction combinations can be shown in Presl， HBsAb， HBsAg， HBeAg， HBeAb， HBcAb-IgM， HBcAb-IgG and other indicators， among which HBeAb， HBsAg， HBcAb-IgG positive combination positive highest，followed by Presl， HBeAg， HBsAg，and HBcAb-IgG positive reaction combinations;HBV-DNA level in the experimental group was（4.70±1.30）×104，and HBV-DNA level in the control group was（0.80±0.10）×104，the experimental group was higher than the control group，the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion ?The detection of HBV marker phenotype serum samples is of higher diagnostic value in HBV，and it can provide scientific basis for clinical diagnosis.

Key words：Hepatitis B virus;HBV marker phenotype;Serum specimen

乙型病毒性肝炎（viral hepatitis type B）屬于一種臨床常見的肝臟炎性病變，嚴(yán)重威脅人們的健康，該病在全世界范圍內(nèi)都有著較高的發(fā)病率，并且該病輻射年齡較廣，患者在發(fā)病后如果沒有采取及時(shí)有效治療措施，可能會(huì)導(dǎo)致疾病進(jìn)一步惡化，進(jìn)而導(dǎo)致肝癌與肝硬化發(fā)生。在臨床診斷中一般予以肝功能檢查，并且將血清病原學(xué)指標(biāo)作為診斷依據(jù)，但依靠陽性表型指標(biāo)無法準(zhǔn)確反映患者體內(nèi)乙肝病毒存在情況，同時(shí)也無法對疾病進(jìn)展進(jìn)行有效監(jiān)測，臨床誤診、漏診率較高?；颊叱Ｔ诔霈F(xiàn)確切癥狀后才會(huì)參與病理診斷，延誤最佳治療時(shí)機(jī)，預(yù)后較差，本研究主要探討乙肝病毒標(biāo)記物陽性表型血清標(biāo)本乙型肝炎病毒HBV-DNA臨床檢驗(yàn)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 ?選取2018年5月～2019年5月萬年縣人民醫(yī)院收治的乙肝病毒陽性患者100例作為實(shí)驗(yàn)組，另選取同期我院健康體檢者100例作為對照組。實(shí)驗(yàn)組男性52例，女性48例;年齡22～60歲，平均年齡（38.10±2.10）歲，對照組男性49例，女性51例;年齡21～61歲，平均年齡（39.10±2.20）歲?；颊呒凹覍僦橥獠⒑炇鹬橥鈺瑑山M性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），有可比性。

1.2方法

1.2.1酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測 ?采用KHBST-360酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測，對Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG等指標(biāo)進(jìn)行檢測，所有試劑均根據(jù)試劑盒進(jìn)行操作，對血清各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行檢測。

1.2.2 PCR熒光定量法檢測 ?將血清標(biāo)本放在PCR儀上進(jìn)行測量，取患者血清標(biāo)本，劑量為100 μl，對標(biāo)本進(jìn)行離心，離心時(shí)間設(shè)定為10 min，轉(zhuǎn)速設(shè)定為13000 r/min，將上清液進(jìn)行去除，將25 μl的DNA進(jìn)行溶合，再次離心10 s，轉(zhuǎn)速設(shè)定為2000 r/min，在沸水中維持10 min后再次進(jìn)行離心，速率為13000 r/min，取上清液待檢測。給予擴(kuò)增試劑，利用Taq酶、UNG進(jìn)行充分混合，采用離心處理，時(shí)間為10 s，轉(zhuǎn)速設(shè)定為2000 r/min。對樣本進(jìn)行加樣處理，在上述操作步驟中準(zhǔn)備好標(biāo)本，劑量為2 μl，轉(zhuǎn)速設(shè)定為2000 r/min，并將其放入PCR熒光儀中，擴(kuò)增檢測，設(shè)置好相關(guān)參數(shù)進(jìn)行檢測，循環(huán)參數(shù)為3 min，溫度為37℃，預(yù)變形參數(shù)為1 min，溫度為92℃，變性參數(shù)為5 s，溫度為92℃，應(yīng)用熒光檢測參數(shù)為30 s，溫度為60℃，采用冷卻儀器，循環(huán)次數(shù)為40次，溫度為40℃。

1.3觀察指標(biāo) ?①陽性反應(yīng)組合（Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG）陽性率、②HBV-DNA水平。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 ?采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料用（x±s）表示，行t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料采用n（%）表示，行？字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1陽性反應(yīng)組合陽性比例及HBV-DNA水平 ?在Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG等指標(biāo)中可表現(xiàn)出11種陽性反應(yīng)組合，其中HBeAb、HBsAg、HBcAb-IgG陽性反應(yīng)組合陽性率最高，其次為Presl、HBeAg、HBsAg、HBcAb-IgG;Presl、HBeAg、HBsAg陽性反應(yīng)組合HBV-DNA水平最高，其次是HBeAb、HBsAg、HBcAb-IgG陽性反應(yīng)組合，見表1。

2.2兩組HBV-DNA水平比較 ?實(shí)驗(yàn)組HBV-DNA水平為（4.70±1.30）×104，高于對照組的（0.80±0.10）×104，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=29.917，P=0.000）。

3討論

乙型肝炎發(fā)病率較高，其發(fā)病情況受到了臨床醫(yī)生廣泛關(guān)注[1]。目前臨床常采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測乙肝五項(xiàng)指標(biāo)[2]，但是這種檢測方式存在一定局限性，并且病毒復(fù)制水平較低，誤診率較高[3]。在具體的檢測過程當(dāng)中聯(lián)合檢測HBV-DNA水平，有助于對乙肝病毒情況進(jìn)行更加精確的鑒別。同時(shí)在其檢測基礎(chǔ)上利用PCR熒光檢測技術(shù)檢測，可以對乙肝病毒標(biāo)記物表型HBV-DNA水平進(jìn)行檢測，HBV-DNA在11種陽性組合當(dāng)中都存在一定的陽性占比率，而對于乙型肝炎患者而言，其高復(fù)制性對患者威脅較大。

有研究表明[4]，患者病毒復(fù)制水平也能對乙型病毒肝炎的診斷提供依據(jù)，處于活動(dòng)期的HBV-DNA水平高于非活動(dòng)期。而在乙型肝炎病毒臨床診斷過程當(dāng)中，僅僅對患者體內(nèi)乙型肝炎病毒復(fù)制的情況進(jìn)行排除并不能完全提高檢測效果，而利用乙型肝炎病毒復(fù)制檢測的陰性情況能夠進(jìn)行彌補(bǔ)。在乙型肝炎的檢測過程當(dāng)中，對患者病情發(fā)展進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察，可為臨床治療提供重要依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示，在Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG等指標(biāo)中可表現(xiàn)出11種陽性反應(yīng)組合，其中HBeAb、HBsAg、HBcAb-IgG陽性反應(yīng)組合陽性率最高。實(shí)驗(yàn)組HBV-DNA水平為（4.70±1.30）×104，對照組HBV-DNA水平為（0.80±0.10）×104，實(shí)驗(yàn)組高于對照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），表明HBV-DNA水平的檢測在乙型肝炎病毒診斷中有一定價(jià)值。

綜上所述，在乙型肝炎病毒診斷中乙肝病毒標(biāo)記物表型血清標(biāo)本的診斷價(jià)值較高，可為臨床診斷提供科學(xué)的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]馬梅香.乙肝病毒標(biāo)記物陽性表型血清標(biāo)本乙型肝炎病毒（HBV）-DNA臨床檢驗(yàn)分析的應(yīng)用效果評價(jià)[J].心理月刊，2018，（12）：99.

[2]王曉玲，苑玉聰，郝金翠，等.乙肝腎合劑辨證加減聯(lián)合常規(guī)西藥綜合治療乙型肝炎病毒相關(guān)性腎炎的臨床觀察[J].遼寧中醫(yī)雜志，2017，44（10）：2114-2117.

[3]徐茜茜，卓莉，楊悅，等.乙型肝炎病毒相關(guān)性腎炎不同年齡組患者的臨床病理特點(diǎn)[J].中國病毒病雜志，2016，6（3）：206-211.

[4]李根瑞，陳涓涓，謝正媛，等.云南省7934例農(nóng)村育齡人群乙型肝炎病毒標(biāo)記物血清學(xué)篩查檢測結(jié)果分析[J].中國預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2017，18（1）：31-34.

收稿日期：2019-11-07;修回日期：2019-11-20

編輯/李國苗