郭新菊?冀敏

【摘要】 目的 探討乙型肝炎病毒DNA定量檢測(cè)與臨床的關(guān)系。方法 95例乙型肝炎患者， 對(duì)其實(shí)施熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)來檢測(cè)乙型肝炎病毒中乙肝病毒的脫氧核糖核酸（HBV-DNA）含量和病毒血清標(biāo)志物。結(jié)果 核心抗體（HBcAb）、e抗原（HBeAg）、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）陽性率為97.8%， HBeAg、HBsAg陽性率為100.0%， e抗體（HBeAb）、HBsAg和HBcAb、HBeAb陽性率均為25.0%， HBeAb、HBcAb、乙型肝炎表面抗體（HBsAb）陽性率為18.2%， HBsAb陽性率為7.1%， 全陰陽性率為0， 各組陽性率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。各組HBV-DNA定量檢測(cè)結(jié)果比較， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 類型不同的乙型肝炎患者均存在一定程度上的HBV-DNA復(fù)制， 而HBeAg陽性患者的HBV-DNA水平最高， 因此將乙型肝炎病毒DNA進(jìn)行定量檢測(cè)， 可為早期乙型肝炎患者的診斷和治療提供可靠依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 乙型肝炎病毒；脫氧核糖核酸；定量檢測(cè)；乙肝e抗原

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.03.050

當(dāng)前， 乙型肝炎病毒DNA定量檢測(cè)已經(jīng)收到臨床普遍重視， 為研究乙型肝炎病毒DNA定量檢測(cè)同臨床之間關(guān)系， 選取本院95例肝病專科進(jìn)行診斷治療患者作為研究對(duì)象， 對(duì)患者的一般資料進(jìn)行回顧性分析， 全部患者均采取熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)試驗(yàn)檢測(cè)其乙型肝炎病毒DNA含量， 使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)其病毒血清標(biāo)志物， 現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2014年1月～ 2015年2月在本院肝病?？凭驮\的95例乙型肝炎患者作為研究對(duì)象， 患者均符合乙型病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中， 男54例， 女41例， 年齡15～79歲， 平均年齡（58.69±10.85）歲；病程1～5年， 平均病程（3.05±1.87）年；排除合并嚴(yán)重器質(zhì)性病變者、惡性腫瘤患者， 患者均對(duì)研究表示知情同意。不同類型的乙型肝炎患者一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 檢測(cè)儀器、試劑 儀器：選取上海科華生物技術(shù)公司生產(chǎn)的熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)分析儀， 試劑：選取HBV核算擴(kuò)增熒光檢測(cè)試劑盒及HBV血清檢測(cè)標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒。

1. 3 檢測(cè)方法 在患者晨起餐前采集靜脈血液5 ml， 對(duì)血清進(jìn)行離心處理， 并將其分裝在-20℃以下予以保存?zhèn)溆茫?在通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物， 檢測(cè)人員需嚴(yán)格按照試劑盒上的規(guī)定操作。在通過熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)乙型病毒性肝炎DNA含量， 對(duì)每一次的檢驗(yàn)均設(shè)立陰性、弱陽性和強(qiáng)陽性作為內(nèi)標(biāo)， 并將已通過的言行標(biāo)準(zhǔn)品作外標(biāo)， 同時(shí)在檢測(cè)過程中做好室內(nèi)質(zhì)控。

1. 4 觀察指標(biāo) 觀察并比較患者血清學(xué)診斷指標(biāo)、乙型肝炎病毒DNA陽性率和定量檢測(cè)結(jié)果情況， 血清學(xué)診斷分組為：第1組是HBcAb、HBeAg、HBsAg， 第2組是HBeAg、HBsAg， 第3組是HBeAb、HBsAg， 第4組是HBeAb、HBeAb、HBsAb， 第5組是HBcAb、HBeAb， 第6組是HBsAb和全陰。

1. 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

HBcAb、HBeAg、HBsAg陽性率為97.8%， HBeAg、HBsAg陽性率為100.0%， HBeAb、HBsAg和HBcAb、HBeAb陽性率均為25.0%， HBeAb、HBcAb、HBsAb陽性率為18.2%， HBsAb陽性率為7.1%， 全陰陽性率為0， 各組陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。各組HBV-DNA定量檢測(cè)結(jié)果比較， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

3 討論

近幾年來， 醫(yī)學(xué)領(lǐng)域上涌現(xiàn)出許多種敏感性、準(zhǔn)確性和先進(jìn)性均比較高的HBV-DNA定量檢測(cè)方法， 依據(jù)其原理可分為酶標(biāo)記探針PCR技術(shù)與熒光標(biāo)記探針PCR技術(shù)[1]。其中， 熒光標(biāo)記探針PCR技術(shù)自動(dòng)化程度較高， 且相對(duì)省時(shí)， 同時(shí)還能避免PCR技術(shù)的后續(xù)處理步驟[2]， 有效減少PCR產(chǎn)物對(duì)環(huán)境造成的污染， 因而成為實(shí)施HBV-DNA定量檢測(cè)的主要方法[3]。

我國在當(dāng)今世界中屬于乙肝大國， 其發(fā)病率位居全球前列。有相關(guān)研究證實(shí)， HBsAg流行率是9.75%， 而人體在感染乙型肝炎病毒后存在不同臨床表現(xiàn)， 其中， HBeAg成纖維陽性， 證實(shí)其傳染性很高。本組研究結(jié)果提示， HBcAb、HBeAg、HBsAg乙型肝炎病毒DNA陽性率為97.8%， 而HBeAg、HBsAg陽性率是100.0%， 表示本組研究對(duì)象HBeAg陽性血清指標(biāo)模式組的主要組別為第1、3組， 且HBeAg同HBV-DNA含量存在正相關(guān)關(guān)系。HBeAb、HBsAg陽性率為25.0%， 其HBV-DNA對(duì)數(shù)平均值為（6.27±0.47）， 可見e抗原轉(zhuǎn)陰時(shí)HBV-DNA還有被檢測(cè)到的可能， 而HBeAb、HBcAb、HBsAb陽性率為18.2%， 其HBV-DNA對(duì)數(shù)平均值為（3.52±0.43）， 可見HBsAb屬于保護(hù)性抗體。

綜上所述， 不同類型乙型肝炎患者均存在HBV-DNA復(fù)制， 對(duì)其實(shí)施HBV-DNA定量檢測(cè)， 有助于乙型肝炎患者的早期診斷與治療。

參考文獻(xiàn)

[1] 楊陽.乙型肝炎病毒DNA定量檢測(cè)室內(nèi)質(zhì)控品的制備及應(yīng)用研究.醫(yī)學(xué)信息， 2015， 28（4）：330-331.

[2] 張佳瑞.實(shí)時(shí)定量RT-PCR對(duì)乙型肝炎病毒全長RNA（fRNA）的定量檢測(cè).現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展， 2015， 15（1）：29-32.

[3] 王娜.乙型病毒性肝炎5項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果與HBV-DNA的關(guān)系及臨床意義.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2015， 36（2）：256-258.

[收稿日期：2015-05-07]