頓巴依爾

（新疆阿勒泰市畜牧獸醫(yī)站 836500）

1 針對黃疸和黃脂肉的診斷

把需要檢驗的脂肪取出數(shù)克，剪碎待檢物后，要把它們放到試管里，隨后取出5ml，濃度為5%的氫氧化鈉溶液，把取出溶液加入預先準備出來的試管里，振蕩裝有溶液的試管，將其煮沸1min，使用流水對其進行冷卻，稱取相同質(zhì)量乙醚加入其中，混入后進行充分振蕩，隨后在常溫條件把試管溶液靜置一會，如果發(fā)現(xiàn)上層乙醚里面融入了胡蘿卜素，并呈現(xiàn)黃顏色便可以把這種疫病判斷成黃脂。如果經(jīng)過膽汁色素形成出來的氫氧化鈉呈現(xiàn)黃顏色能把疫病類型判斷為黃疸。上下層如果呈現(xiàn)黃色可以認為所診斷的疫病是黃脂和黃疸同時存在。

2 實驗室針對羊丹毒的診斷方法

如果實驗室檢查敗血型羊丹毒的話，檢查材料可以使用病豬的心血和肝腎等器官。如果要診斷的疫病類型是疹塊型羊丹毒可以選擇發(fā)生病變疹塊周邊的皮膚。如果診斷是慢性型羊丹毒可以使用出現(xiàn)腫脹問題關節(jié)和心內(nèi)膜位置的增生物加以檢查。

2.1 涂片鏡檢的方法

使用瑞氏染色法、吉姆薩染色法及革蘭氏染色等幾種方法對組織抹片進行染色。鏡檢發(fā)現(xiàn)那些細小的桿菌，菌體呈現(xiàn)直狀還是彎曲狀態(tài)，存在的方式是成對、單個的方式還是成叢的方式。尤其是針對白細胞之中的菌體及白細胞周圍成叢存在的菌體檢測期間，診斷意義更加明顯。應用脾腎抹片檢測菌體檢出率比較理想。

2.2 分離培養(yǎng)的方法

如果所選的是較為新鮮病理材料，能直接接種到培養(yǎng)基上面。放到37℃左右的溫度條件中持續(xù)1～2d 的時間。這個培養(yǎng)基上會出現(xiàn)較小，且呈現(xiàn)透明狀態(tài)的形似露滴狀的菌落。而在普通培養(yǎng)基上，菌落的生長狀態(tài)卻都比較比較貧瘠。肉湯呈現(xiàn)出一種輕度渾濁的狀態(tài)，會有一些白顏色，較為黏稠的沉淀出現(xiàn)，明膠不會出現(xiàn)液化，聲場期間呈現(xiàn)為試管狀。

2.3 對于動物的接種

把疹塊和生理鹽水按照1：10 的比例制成組織懸液。也可以選擇小白鼠或鴿子制成肉湯培養(yǎng)物。取出0.5～1ml 的組織懸液注射到鴿子體內(nèi)，如果注射對象是小白鼠，注射劑量需要控制為0.2ml。隨后取出0.5 和0.1ml 的菌液，分別向鴿子和小白鼠體內(nèi)注射。發(fā)現(xiàn)接種后3～4h 出現(xiàn)死亡。隨后制作圖片，采用已經(jīng)死亡動物的臟器或心血作為材料，之后再進行鏡檢。如果疫病為典型的羊丹毒桿菌能確診出來。

3 實驗室針對羊瘟的診斷方法

3.1 對于監(jiān)測樣品的采集

使用的是瀕臨死亡或已經(jīng)死亡以及屠宰死亡的羊的新鮮扁桃體和腎臟，把每個樣品都放入到對應的滅菌容器里。

3.2 監(jiān)測方法選擇

選擇直接熒光抗體方法進行監(jiān)測。

3.3 對于冰凍切片的制作

切片制作期間選擇新鮮的腎臟組織塊，和一些比較新鮮的扁桃體，制作過程可以適當應用冰凍切片機，把冰凍組織片的厚度制成5～7μm，隨后將其放置在清潔的載玻片上，置于空氣中自然干燥，于室溫條件下向其中放入純丙酮，15min 后將其取出，輕輕地漂洗幾次，自然干燥后等待染色。

3.4 關于染色方法的應用

取出2～3 滴，應用熒光標記的羊瘟抗體，把它覆蓋到固定組織切片上，隨后在有一定濕度的小盒里面進行放置，于37℃的條件下作用30min，這樣能讓熒光抗體更好吸收。一定要保證染色期間不會出現(xiàn)染色液干涸問題，完成染色后使用PBS 液把切片浸洗3 次，還要進行3 次換水，每次都要分種。將切片取出后放入到室溫下，等達到半干狀態(tài)后使用緩沖甘油封片，立刻實施鏡檢。

3.5 結(jié)果判定

熒光顯微鏡下檢查切片，如果被檢切片顯現(xiàn)腎曲小管或扁桃體隱窩有上皮細胞胞漿存在，并且呈現(xiàn)出來的狀態(tài)是明亮的翠綠色熒光。檢查時候如果能把細胞形態(tài)清晰發(fā)現(xiàn)出來[1]，我們就能認為屬于一種陽性反應。如果熒光較為微弱，細胞形態(tài)不清或者沒有熒光便可以將反應定性為陰性。

4 實驗室對旋毛蟲診斷的方法

4.1 采樣概述

取肉尸中20g 處在左右位置的橫膈肌角的肉樣。放到化驗室里面和肉尸編上相同號碼儲存器皿進行檢查。

4.2 使用肉眼觀察

針對送來診斷的肉樣，首先應用肉眼進行詳細觀察，如果觀察發(fā)現(xiàn)肌腳近腱部位或肌膜下方存在顏色呈灰白色或淡白色，狀態(tài)位微塵狀小點的話，我們便可以認定送檢肉樣可能發(fā)生了疫病，取發(fā)生病變部位支撐切片，實施鏡檢。

4.3 鏡檢

顯微鏡所選的是低倍，這種顯微鏡最大放大倍數(shù)為50～70倍。除此還可以把肉樣放到旋毛蟲檢驗器上，針對壓片加以觀察，壓片從一端第一個開始按順序觀察，一定要保證，壓片的所有位置都會被觀察到。

5 結(jié)束語

動物疫病一旦出現(xiàn)很有可能造成動物養(yǎng)殖企業(yè)經(jīng)濟效益受到損害，甚至可能使人們使用食品期間的安全遭到影響。實驗室中應對不同疫病類型所能使用的檢驗方法也都存有一定差異。本文主要選擇了幾種容易出現(xiàn)在動物身上的疫病，概述化驗室診斷的具體方法。希望能為動物疫病檢疫工作的開展提供一些經(jīng)驗上的參考。