陳彩香 李凡 海莎

AOPP是一種新型的蛋白氧化應(yīng)激標(biāo)志物, 近期有不少研究都發(fā)現(xiàn)AOPP在慢性腎病、糖尿病、慢性動脈粥樣硬化、妊娠期糖尿病等疾病患者血漿中的表達都明顯升高,提示AOPP可能與血管內(nèi)皮功能紊亂、氧化應(yīng)激有一定關(guān)聯(lián)［1,2］。本研究旨在明確AOPP表達與GDM的關(guān)系, 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年6月～2017年6月在本院產(chǎn)科進行產(chǎn)前檢查的42例GDM孕婦作為研究組, 另選取40例正常孕婦作為對照組。研究組平均年齡(28.20±3.40)歲,孕前平均體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為(21.65±3.05)kg/m2, 平均孕次(1.93±1.12)次, 平均產(chǎn)次(0.33±0.41)次。對照組平均年齡(27.87±4.05)歲, 孕前平均BMI(22.01±2.91)kg/m2, 平均孕次(2.03±1.36)次, 平均產(chǎn)次(0.26±0.39)次。兩組孕婦一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 方法 采集兩組孕婦空腹靜脈血液3 ml, 抗凝離心處理, 分離血清, 保留血漿, 保存在80℃冰箱中, 將14.085 mg氯胺-T與50 ml蒸餾水混合, 配置成氯胺-T標(biāo)準(zhǔn)品。在6只試管中分別加入不同濃度的氯胺-T標(biāo)準(zhǔn)溶液(0、10、20、30、40、50 μmol/L)。取 500 μl血漿樣本 , 加入 5 倍的磷酸緩沖鹽溶液(PBS)將樣本稀釋為2500 μl, 混合均勻。取200 ml稀釋樣本加入樣品測試孔。在氯胺-T標(biāo)準(zhǔn)溶液孔中加入200 μl不同濃度的氯胺-T溶液。將200 μl的PBS加入空白調(diào)零孔中。每孔分別加入碘化鉀溶液(1.16 μmol/L)10 μl, 混合均勻。每孔加入20 μl的冰醋酸溶液, 混合均勻。使用恒溫水浴箱(37℃)孵育5 min, 測定OD值(波長340 nm)。計算標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔的平均OD值, 根據(jù)線性回歸方程計算血漿AOPP濃度。

1.3 觀察指標(biāo) 對兩組孕婦妊娠早期(16～20孕周)、中期(24～28孕周)、晚期(32～36孕周)血漿AOPP水平進行檢測并比較, 分析AOPP表達與血糖相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗；GDM與血漿AOPP的相關(guān)性采用Logistic回歸分析。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血漿AOPP水平 研究組孕婦妊娠早期、中期、晚期的血漿AOPP水平分別為(68.102±6.618)、(75.076±7.651)、(81.527±6.646)μmol/L, 均顯著高于對照組的 (55.485±7.336)、(64.138±7.543)、(71.647±7.578)μmol/L, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表 1。

2.2 GDM與血漿AOPP的相關(guān)性 AOPP水平與GDM的發(fā)生呈正相關(guān), 其為GDM的獨立危險因素(P＜0.05)。見表2。

表1 兩組孕婦妊娠早、中、晚期的血漿AOPP水平變化比較( ±s, μmol/L)

表1 兩組孕婦妊娠早、中、晚期的血漿AOPP水平變化比較( ±s, μmol/L)

注：與對照組比較, aP＜0.05

研究組 42 68.102±6.618a 75.076±7.651a 81.527±6.646a對照組 40 55.485±7.336 64.138±7.543 71.647±7.578 t 8.185 6.516 6.285 P<0.05 <0.05 <0.05

表2 GDM與血漿AOPP的相關(guān)性分析

3 討論

AOPP是一種較為精確、敏感的氧化應(yīng)激標(biāo)志物, 其能較為準(zhǔn)確地反映氧化劑介導(dǎo)的蛋白損傷［3］。有文獻報道,AOPP表達升高反映了氧化應(yīng)激反應(yīng)的增強, 其會造成血管內(nèi)皮損傷, 所以其也可能是造成動脈粥樣硬化的原因之一［4,5］。有多篇文獻報道, 子癇前期患者胎盤組織、臍帶血及血漿中的AOPP水平均存在異常升高［6］。從既往的文獻報道來看, AOPP可能是通過通過加重或誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng)、促進炎癥反應(yīng)來參與各類疾病的發(fā)生與發(fā)展的［7］。AOPP的過度表達會刺激臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞釋放大量的活性氧, 同時促使血管細(xì)胞粘附分子-1、細(xì)胞間粘附分子-1過表達, 從而加重胎盤組織缺氧、缺血, 而胎盤缺氧、缺血又會進一步加重氧化應(yīng)激反應(yīng)［8］。本次研究結(jié)果顯示, 研究組孕婦妊娠早期、中期、晚期的血漿AOPP水平分別為(68.102±6.618)、(75.076±7.651)、(81.527±6.646)μmol/L, 均顯著高于對照組的(55.485±7.336)、(64.138±7.543)、(71.647±7.578)μmol/L,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。這一結(jié)果與國內(nèi)相關(guān)文獻報道［9］結(jié)果相符, 說明GDM患者存在著明顯的氧化應(yīng)激失衡, AOPP水平的異常升高可能與GDM的發(fā)生、發(fā)展有著密切聯(lián)系。本文相關(guān)性分析結(jié)果也顯示, AOPP水平與GDM的發(fā)生呈正相關(guān), 其為GDM的獨立危險因素(P＜0.05)。這可能是因為氧化應(yīng)激的增強會使體內(nèi)產(chǎn)生大量的活性氧, 而活性氧是功能性信號分子, 其會激活細(xì)胞內(nèi)應(yīng)激敏感性信號通路(c-Jun氨基末端激酶/應(yīng)激活化蛋白激酶、氨基己糖、核因子-κB、蛋白激酶C、p38絲裂原活化蛋白激酶等), 從而對胰島素信號傳導(dǎo)產(chǎn)生干擾, 引起胰島素抵抗, 進而引發(fā)GDM［10］。

綜上所述, GDM孕婦的血漿AOPP表達明顯升高, 且AOPP的表達水平與GDM發(fā)病率存在著正相關(guān)關(guān)系, 早期進行血漿AOPP檢測可為預(yù)測GDP的發(fā)生提供一定的參考依據(jù)。