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        柚皮苷調(diào)節(jié)GALNT2-ANGPTL3通路改善小鼠的血脂異常

        2018-09-04 12:46:24肖翔龍張恒波
        中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用 2018年16期
        關(guān)鍵詞:柚皮苷高脂血癥血脂

        肖翔龍 張恒波

        血脂異常意味著TG和(或)TC水平升高或高密度脂蛋白水平降低[1]。作為從蕓香科植物柚果實(shí)如葡萄柚中提取的多酚類化合物, 柚皮苷能調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝[2], 但其機(jī)理未明。GALNT2-ANGPTL3通路可能為血脂異常治療的新靶點(diǎn)[3],所以本實(shí)驗(yàn)研究柚皮苷是否調(diào)GALNT2-ANGPTL3通路防治實(shí)高脂血癥小鼠的血脂異常。

        1 材料與方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)試劑 熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)試劑和血脂檢測(cè)試劑盒分別購自上海恪敏生物科技有限公司和上海信帆生物科技有限公司;柚皮苷(純度:98%)由武漢新鑫生物科技有限公司提供。

        1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組 50只10 周齡C57BL/6J小鼠購置自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。將小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、高脂血癥模型組、10 mg/kg柚皮苷組、20 mg/kg柚皮苷組、30 mg/kg柚皮苷組。柚皮苷溶解在生理鹽水中, 灌胃給藥。6周后, 從小鼠身上獲取血漿和肝臟樣本。

        1.3 檢測(cè)指標(biāo)和方法 肝GALNT2和ANGPTL3 mRNA表達(dá)采用熒光定量PCR檢測(cè)[(GAPDH:正向引物, ACTCCACTC ACGGCAAATTC, 反向引物, TCTCCATGGTGGTGAAGACA;ANGPTL3:正向引物, AGCACACAGACCTGATGTTTTCTAC,反向引物, CCACCTGAGTAACTTTCTGGACAGT;GALNT2:正向引物, GTACGTGAGACAGGCCTAAGG, 反向引物,CAAGCTTCATTTAGGACCAAGC)][4];血脂水平[TG, TC和HDL-C]采用試劑盒檢測(cè)。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 五組小鼠肝組織GALNT2和ANGPTL3 mRNA表達(dá)與正常對(duì)照組比較, 高脂血癥模型組小鼠GALNT2的表達(dá)顯著降低, ANGPTL3的表達(dá)顯著升高, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與高脂血癥模型組比較, 10 mg/kg柚皮苷組、20 mg/kg柚皮苷組、30 mg/kg柚皮苷組小鼠GALNT2的表達(dá)明顯升高, ANGPTL3表達(dá)明顯降低, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或 <0.01)。見圖 1。

        圖1 五組小鼠肝組織GALNT2和ANGPTL3 mRNA表達(dá)

        2.2 五組小鼠血脂水平比較 高脂血癥模型組TG水平(96.3±6.6)mg/dl和TC水平(211.8±15.5)mg/dl高于正常對(duì)照組的(65.7±5.2)、(135.8±7.4)mg/dl, HDL-C水平(32.9±4.0)mg/dl低于正常對(duì)照組的(62.5±6.2)mg/dl, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);10 mg/kg柚皮苷組、20 mg/kg柚皮苷組、30 mg/kg柚皮苷組的TC和TG及HDL-C水平均優(yōu)于高脂血癥模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

        表1 五組小鼠血脂水平比較( ±s, mg/dl)

        表1 五組小鼠血脂水平比較( ±s, mg/dl)

        注:與正常對(duì)照組比較, aP<0.01;與高脂血癥模型組比較, bP<0.05

        正常對(duì)照組 10 135.8±7.4 65.7±5.2 62.5±6.2高脂血癥模型組 10 211.8±15.5a 96.3±6.6a 32.9±4.0a 10 mg/kg柚皮苷組 10 189.4±9.6b 81.5±7.3b 39.8±3.9b 20 mg/kg柚皮苷組 10 168.3±6.3b 73.8±9.1b 46.7±5.2b 30 mg/kg柚皮苷組 10 155.1±7.4b 69.9±6.2b 58.3±4.5b

        3 討論

        血脂異常包括高TG血癥、高TC血癥和低HDL-C血癥[5]。因此, 調(diào)節(jié)血脂異常的因素可能被視為潛在的有吸引力的藥物靶標(biāo)。

        ANGPTL3是一種肝特異性蛋白, 具有促血管生成素相似的氨基酸序列和結(jié)構(gòu)[6]。越來越多的證據(jù)支持GALNT2-ANGPTL3通路可能是導(dǎo)致高脂血癥的關(guān)鍵通路。家族性復(fù)合高脂血癥患者具有ANGPTL3 s17x突變[7];ANGPTL3基因敲除小鼠表現(xiàn)出低甘油三脂血癥[8]。GALNT2已被證明能夠抑制ANGPTL3表達(dá), 且GALNT2是哺乳動(dòng)物HDL代謝的直接調(diào)節(jié)器[9]。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示, 與正常對(duì)照組比較, 高脂血癥模型組小鼠GALNT2的表達(dá)顯著降低, ANGPTL3的表達(dá)顯著升高, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與高脂血癥模型組比較, 10 mg/kg柚皮苷組、20 mg/kg柚皮苷組、30 mg/kg柚皮苷組小鼠GALNT2的表達(dá)明顯升高, ANGPTL3表達(dá)明顯降低, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或<0.01)。高脂血癥模型組TG水平(96.3±6.6)mg/dl和TC水平(211.8±15.5)mg/dl高于正常對(duì)照組的(65.7±5.2)、(135.8±7.4)mg/dl , HDL-C水平(32.9±4.0)mg/dl低于正常對(duì)照組的(62.5±6.2)mg/dl, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);10 mg/kg柚皮苷組、20 mg/kg柚皮苷組、30 mg/kg柚皮苷組的TC和TG及HDL-C水平均優(yōu)于高脂血癥模型組, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。由此表明柚皮苷能明顯降低血漿TG、TC水平, 升高血漿HDL-C水平,上調(diào)GALNT2的表達(dá), 下調(diào)ANGPTL3的表達(dá)。上述研究結(jié)果支持假設(shè)柚皮苷能調(diào)GALNT2-ANGPTL3通路防治實(shí)高脂血癥小鼠的血脂異常。

        綜上所述, 柚皮苷能調(diào)節(jié)GALNT2-ANGPTL3通路改善高脂血癥小鼠的血脂異常。

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