李萍

摘要：目的：探究分子生物學(xué)技術(shù)在檢驗檢疫中的應(yīng)用價值。方法：選擇我院自2016年3月至2017年9月收集80例微生物標本（包含21例流感病毒、17例幽門螺桿菌病毒、20例支原體病毒、22例金黃色葡萄桿菌毒素基因）作為研究對象，將所有標本分成均等的兩份，一份采用傳統(tǒng)檢測方法進行檢驗（設(shè)為對照組），另一份采用分子生物學(xué)技術(shù)方法進行檢驗（設(shè)為研究組），比較兩組檢測方式的檢出率。結(jié)果：研究組對流感病毒的檢出率（95.2%）明顯高于對照組（71.4%），研究組對幽門螺桿菌病毒的檢出率（100.0%）明顯高于對照組（82.3%），研究組對支原體病毒的檢出率（100.0%）明顯高于對照組（70.0%），研究組對金黃色葡萄桿菌毒素基因的檢出率（95.5%）明顯高于對照組（77.3%），兩組對比差異顯著（P<0.05）。結(jié)論：分子生物學(xué)技術(shù)能有效提升微生物檢驗檢疫的準確率，因此其具有良好的檢驗檢疫價值。

關(guān)鍵詞：分子生物學(xué)技術(shù)；檢驗檢疫；應(yīng)用

分子生物學(xué)檢測技術(shù)是建立在核酸生化基礎(chǔ)上的現(xiàn)代化檢測技術(shù)和研究手段，通過對

生物大分子核酸及核酸表達產(chǎn)物蛋白質(zhì)功能、結(jié)構(gòu)、相互之間的作用和關(guān)系進行研究，其能有效為臨床疾病的診斷和評估、病原微生物檢驗、食品安全檢測以及寄生蟲病防治提供重要的檢驗依據(jù)，因此被廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、遺傳學(xué)、醫(yī)學(xué)以及食品檢驗學(xué)等多個領(lǐng)域的檢驗檢疫中。除此之外，其還具有操作簡便、特異性強以及靈敏度高等多種優(yōu)勢，因此其已成為現(xiàn)代臨床和免疫檢驗最重要的檢測手段[1]。本文主要探究了分子生物學(xué)技術(shù)在檢驗檢疫中的應(yīng)用價值，現(xiàn)報道如下。

一、資料與方法

（一）一般資料

選擇我院自2016年3月至2017年9月收集80例微生物標本作為研究對象，其中21例為流感病毒、17例幽門螺桿菌病毒、20例支原體病毒、22例金黃色葡萄桿菌毒素基因，分別對其采用傳統(tǒng)檢測方法和分子生物學(xué)技術(shù)進行檢測。

（二）方法

將所有標本分成均等的兩份，一份采用細菌培養(yǎng)鑒定、免疫測定及血清學(xué)檢驗等傳統(tǒng)的檢測方法進行檢測，另一份采用以聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)為基礎(chǔ)的分子免培養(yǎng)方法和核酸檢測技術(shù)進行檢驗，通過在病原體中加入特異性引物進行擴增檢驗。

（三）觀察指標

觀察和統(tǒng)計兩種檢測方式對微生物標本病原體的檢出率。

（四）統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS22.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料用（x±s）表示，采用t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

二、結(jié)果

研究組對流感病毒的檢出率（95.2%）明顯高于對照組（71.4%），研究組對幽門螺桿菌病毒的檢出率（100.0%）明顯高于對照組（82.3%），研究組對支原體病毒的檢出率（100.0%）明顯高于對照組（70.0%），研究組對金黃色葡萄桿菌毒素基因的檢出率（95.5%）明顯高于對照組（77.3%），兩組對比差異顯著（P<0.05），見表1。

三、討論

在人們生存的各個領(lǐng)域均具有生物技術(shù)的存在，例如水質(zhì)、空氣、食品、疾病檢測等，而了解和評估水質(zhì)、空氣、食品的構(gòu)成成份或質(zhì)量好壞以及明確疾病的類型和分型均需依賴于微生物檢測技術(shù)的支持。以往對微生物檢驗和鑒定都是采用大量的特征試驗進行分離純化，這樣的檢驗方式不僅操作繁雜和需耗費較多的人力、時間，同時其還難以保證檢測結(jié)果的準確率，導(dǎo)致檢測結(jié)果易出現(xiàn)誤差，從而難以保證被檢測食品的安全以及可能造成疾病延誤診斷與治療。而隨著檢驗檢疫技術(shù)的不斷改革與發(fā)展，現(xiàn)代臨床與檢驗免疫中心已引進了分子生物學(xué)技術(shù)進行微生物檢驗，分子生物學(xué)技術(shù)包含了聚合酶鏈反應(yīng)、基因克隆和重組、核酸雜交法、變性凝膠電泳及生物芯片等多種現(xiàn)代化的檢驗技術(shù)，其不僅能有效縮短微生物分離鑒定的速度，同時還能使微生物檢驗檢疫達到全面、快速、微量、準確等檢驗要求，因此該項檢驗技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于各種微生物的檢驗檢疫中。

在微生物檢驗中，屬聚合酶鏈反應(yīng)、生物芯片及核酸雜交法等分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用最為廣泛，其中聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)又包含了普通聚合酶鏈反應(yīng)、巢式聚合酶鏈反應(yīng)、多重聚合酶鏈反應(yīng)、反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)、熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)、聚合酶鏈反應(yīng)單鏈構(gòu)象多態(tài)性、RAPD技術(shù)、限制性片段長度多態(tài)性、重復(fù)序列聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)、隨機擴增的多態(tài)性DNA技術(shù)等多個類別，這種類型的檢測技術(shù)主要是通過將多種特異性引物加入到病原體中，從而避免了分離純化的操作，其不僅能對多種病原體進行同時檢測，同時還能準確鑒定出病原體的感染類型[2]。例如，本次研究中所檢測的流感病毒，通過在病原體標本中加入特異性引物擴增，可依據(jù)擴增片段的大小判定流感屬于什么類型。另外，對于病毒重疊感染的病原體，其能通過對病原體的霍亂、痢疾和傷寒指征進行快速檢測，從而明確疾病的感染分型。而對于傳統(tǒng)檢測方式難于培養(yǎng)的微生物或生長緩慢的病毒進行鑒定，可以應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)聯(lián)合分子熒光檢測技術(shù)進行檢測。對于包括死菌在內(nèi)的菌體進行檢驗，采用聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)鑒定只需挑取菌體，無需提取核酸，因此能有效加快檢測的速率。

食品檢測安全也是人們重點關(guān)注的內(nèi)容之一，食品中的微生物主要包含了金黃色葡萄桿菌毒素基因、頑固性梭狀芽孢桿菌、腸毒素大腸桿菌及單核細胞增多性李斯特氏菌等，在以往的檢測過程中，多采用血清學(xué)檢驗方法和細菌學(xué)檢驗方法，如凝集反應(yīng)、細菌分離培養(yǎng)等方式進行檢測，這兩種檢測方式操作均較為繁瑣和檢測耗時較長，從本次的檢驗結(jié)果也可以看出其檢測的準確率并不高，而采用分子生物學(xué)檢驗技術(shù)，將能有效避免上述缺陷和問題發(fā)生，采用聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)通過設(shè)計金黃色葡萄桿菌毒素基因引物，不僅具有較高的敏感性和特異性，同時還能在較短時間內(nèi)檢出葡萄球菌毒株。另外對于食品中一些

常見的病原菌，如發(fā)酵食品中的益生菌、奶酪表面的微生物、酒中的乳酸菌等，可采用核酸探針技術(shù)進行檢測；對于食品的營養(yǎng)成分、微生物種群以及對食品安全、質(zhì)量、衛(wèi)生進行監(jiān)測，還可采用基因芯片技術(shù)進行檢測，其是一種基于基因功能和表達的最新分子生物學(xué)檢驗技術(shù)。

本次研究結(jié)果顯示，分子生物學(xué)檢驗技術(shù)在對多種微生物病毒和食品檢測指標中的檢出率均明顯高于傳統(tǒng)檢測方法，說明了分子生物學(xué)技術(shù)不僅可以應(yīng)用于多種領(lǐng)域的檢驗檢驗，并且與傳統(tǒng)的檢測方式相比，分子生物學(xué)檢驗技術(shù)對微生物的檢測敏感度和特異性更強。

綜上所述，分子生物學(xué)技術(shù)能有效提升微生物檢驗檢疫的準確率，因此其具有良好的檢驗檢疫價值。

參考文獻：

[1]章志建，潘虹.分子生物學(xué)技術(shù)在檢驗檢疫中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2015，42（03）：526-527+536

[2]王金鳳，王建昌，付琦，等.分子生物學(xué)技術(shù)在出入境動物檢疫中的應(yīng)用[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2014，（17）：216-218