郝潔，田小軍，宋新文，申保生，段樹鵬

(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，河南衛(wèi)輝453100)

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聚乙二醇干擾素對慢性丙肝患者血清炎癥細(xì)胞因子及抗體水平的影響

郝潔，田小軍，宋新文，申保生，段樹鵬

(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，河南衛(wèi)輝453100)

目的 探討聚乙二醇干擾素對慢性丙肝患者血清炎癥細(xì)胞因子及抗體水平的影響。方法 選擇慢性丙肝患者120例，隨機(jī)分為觀察組、對照組各60例。兩組均給予改善肝功能等基礎(chǔ)治療，同時(shí)口服利巴韋林250 mg、3次/d；在此基礎(chǔ)上對照組皮下注射普通干擾素3×106IU/d，連用4周后改為3次/周；觀察組皮下注射聚乙二醇干擾素α-2a 180 μg，1次/周；兩組均連續(xù)治療6個(gè)月。比較兩組治療后病毒學(xué)反應(yīng)，觀察兩組治療前后血清γ干擾素、γ干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10)、IL-6、TNF-α、CRP水平，肝功能及抗體水平變化。結(jié)果 觀察組快速應(yīng)答52例、完全應(yīng)答35例、持續(xù)應(yīng)答35例，對照組分別為43、22、24例，兩組快速應(yīng)答、緩慢應(yīng)答及持續(xù)應(yīng)答率比較P均<0.05。兩組治療后血清IL-6、TNF-α、CRP、IP-10、ALT、AST、TBil、抗HCV及HCV-RNA均低于治療前，γ干擾素水平均高于治療前，且觀察組效果更明顯(P均<0.05)。結(jié)論 聚乙二醇干擾素用于慢性丙肝能更好地調(diào)節(jié)患者機(jī)體免疫功能，改善患者預(yù)后。

慢性丙型肝炎；聚乙二醇干擾素；炎癥細(xì)胞因子；抗體表達(dá)

流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，丙肝病程大于10年者有10%～20%發(fā)生肝硬化，其中1%～7%進(jìn)展為肝癌；對肝功能異常、肝組織病理學(xué)有明顯壞死或纖維化的慢性丙肝患者需要積極給予抗病毒治療[1]。普通干擾素是治療慢性丙肝的常用藥物，對HCV復(fù)制具有抑制作用，但部分患者對普通干擾素的病毒學(xué)應(yīng)答不佳甚至無反應(yīng)。聚乙二醇干擾素可促進(jìn)干擾素抑制細(xì)胞內(nèi)病毒復(fù)制及細(xì)胞增殖，同時(shí)增加淋巴細(xì)胞的特異性細(xì)胞毒性等一系列免疫調(diào)控活動，對慢性丙肝效果更佳。但目前其對炎癥細(xì)胞因子及抗體水平影響的研究尚少。2012年1月～2015年2月，我們觀察了聚乙二醇干擾素對慢性丙肝患者血清炎癥細(xì)胞因子及抗體水平的影響?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇同期新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院收治的慢性丙肝患者120例，男66例、女54例，年齡25～60(36.12±4.17)歲。均符合2015年中華醫(yī)學(xué)會《丙型肝炎防治指南》[2]中制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：血清抗-HCV及HCV-RNA陽性；ALT或AST反復(fù)或持續(xù)升高1.5倍以上至少6個(gè)月；肝組織病理學(xué)檢查明確炎癥壞死或中度以上纖維化。排除標(biāo)準(zhǔn)：明確合并其他病毒性肝炎者，近6個(gè)月行抗病毒或免疫抑制治療者，失代償期肝硬化者，罹患結(jié)締組織病、惡性腫瘤者，血小板<5×1012/L者，血紅蛋白<80 g/L者。隨機(jī)將患者分為觀察組、對照組各60例。兩組臨床資料具有可比性。

1.2 治療方法 兩組均給予免疫調(diào)節(jié)、抗炎保肝、抗纖維化及對癥支持治療，同時(shí)口服利巴韋林250 mg，3次/d。對照組在此基礎(chǔ)上皮下注射普通干擾素(重組人干擾素α-2b注射液)3×106IU/d，連用4周后改為3次/周；觀察組皮下注射聚乙二醇干擾素α-2a 180 μg，1次/周。兩組均連續(xù)治療6個(gè)月。

1.3 相關(guān)指標(biāo)觀察

1.3.1 病毒學(xué)反應(yīng) 治療第4、12、24周時(shí)清晨抽取空腹靜脈血，檢測血清病毒學(xué)反應(yīng)。治療4周時(shí)HCV-RNA轉(zhuǎn)陰(<50 IU/mL)為快速應(yīng)答，其余為緩慢應(yīng)答。完全應(yīng)答指治療4周時(shí)HCV-RNA陽性，但治療12周時(shí)轉(zhuǎn)陰(<50 IU/mL)；部分應(yīng)答指治療12周時(shí)HCV-RNA陽性，但比治療前下降≥2 log10IU/mL；無應(yīng)答指治療12周時(shí)HCV-RNA下降<2log10IU/mL。持續(xù)應(yīng)答指停藥24周HCV-RNA仍保持陰性。

1.3.2 血清炎癥細(xì)胞因子 治療前及治療6個(gè)月清晨抽取空腹靜脈血2 mL，3 000 r/min離心5 min，取血清，-80 ℃冰箱保存待檢。采用ELISA法檢測γ干擾素、γ干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10)、IL-6、TNF-α及CRP水平，試劑盒購自北京EIAab生物科技有限公司，操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書。

1.3.3 肝功能及抗體水平 取1.3.2中保存的血清，檢測肝功能指標(biāo)[ALT、AST、總膽紅素(TBil)]。采用熒光定量PCR儀及rt-6000酶標(biāo)儀檢測HCV-RNA，采用人抗-HCV ELISA定量試劑盒檢測抗-HCV，以O(shè)D值表示。

2 結(jié)果

2.1 兩組病毒學(xué)反應(yīng)比較 觀察組快速應(yīng)答52例，緩慢應(yīng)答8例，對照組分別為43、17例；兩組比較P均<0.05。觀察組完全應(yīng)答35例、部分應(yīng)答17例、未應(yīng)答 8例，對照組分別為22、22、16例，兩組完全應(yīng)答率比較P<0.05。觀察組中持續(xù)應(yīng)答35例，對照組為24例，兩組比較P<0.05。

2.2 兩組血清炎癥細(xì)胞因子水平比較 見表1。

2.3 兩組肝功能及抗體水平比較 見表2。

表1 兩組血清炎癥細(xì)胞因子水平比較±s)

注：與同組治療前比較，*P<0.05；與對照組治療后比較，#P<0.05。

表2 兩組肝功能及抗體水平比較±s)

注：與同組治療前比較，*P<0.05；與對照組治療后比較，#P<0.05。

3 討論

慢性丙肝可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化，部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。有研究發(fā)現(xiàn)，患者感染HCV后不能自行清除，病情最終可發(fā)展為終末期肝病[3]。臨床上血清HCV-RNA陽性的丙肝患者無論ALT水平升高還是正常，均需行抗病毒治療。有研究發(fā)現(xiàn)，80%以上ALT水平正常的丙肝患者有不同程度的肝損傷，19%的患者可出現(xiàn)中度以上的纖維化，且有10%的患者出現(xiàn)橋接纖維化或肝硬化[4]。抗病毒治療的目的是清除或長期抑制體內(nèi)的HCV，以改善或減輕肝損害、阻止進(jìn)展為肝硬化，提高患者的生活質(zhì)量[5]。干擾素是治療慢性丙肝的常用藥物，但普通干擾素療效持續(xù)時(shí)間短，且不良反應(yīng)較多。聚乙二醇干擾素是將支鏈結(jié)構(gòu)的聚乙二醇附著在干擾素分子上，不影響與細(xì)胞膜上的干擾素受體結(jié)合，還能改變干擾素的藥代動力學(xué)，延長半衰期。目前主要用于慢性乙肝及丙肝的治療。

聚乙二醇干擾素可延緩干擾素的體內(nèi)吸收及消除過程，促進(jìn)干擾素抑制細(xì)胞內(nèi)病毒復(fù)制，同時(shí)可增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬活動、增加淋巴細(xì)胞的特異性細(xì)胞毒性等一系列免疫調(diào)控活動。因此，聚乙二醇干擾素有利于增強(qiáng)機(jī)體的病毒學(xué)反應(yīng)[6]。本研究觀察組快速病毒學(xué)應(yīng)答、完全應(yīng)答及持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答均高于對照組，進(jìn)一步證實(shí)了上述觀點(diǎn)。

HCV感染可激活巨噬細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子，其中IL-6是由單核巨噬細(xì)胞、Th2細(xì)胞等分泌的多肽類物質(zhì)，不僅參與炎癥細(xì)胞因子的活化，刺激肝細(xì)胞合成急性期蛋白，參與炎癥反應(yīng)，在炎癥反應(yīng)中起核心調(diào)節(jié)作用[7]。TNF-α通過增強(qiáng)中性粒細(xì)胞趨化作用損傷肝細(xì)胞，并促進(jìn)肝臟成纖維細(xì)胞增殖，導(dǎo)致肝纖維化的發(fā)生[8]；此外，TNF-α還能通過參與細(xì)胞間信號傳遞起免疫調(diào)節(jié)作用[9]。CRP是典型的細(xì)胞炎癥因子，可活化巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞，通過參與免疫應(yīng)答損傷肝細(xì)胞[10]。γ干擾素具有免疫調(diào)節(jié)作用，可參與病毒性肝炎感染免疫活化、病理學(xué)改變的發(fā)生、發(fā)展過程[11]。IP-10與其受體CXC3結(jié)合后可引導(dǎo)CTL遷移至感染的肝組織，進(jìn)而引起肝細(xì)胞的大量損傷[12]。聚乙二醇干擾素通過增加體內(nèi)γ干擾素水平，促進(jìn)T細(xì)胞增殖，抑制IP-10的趨化作用[13]；還可降低IP-10水平，進(jìn)而降低其對肝臟的損傷[14]。本研究兩組治療后血清IL-6、TNF-α、CRP及IP-10水平均降低，γ干擾素水平升高，且觀察組效果更明顯。表明聚乙二醇干擾素能更好地抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生。

肝功能是丙肝病情的主要觀察指標(biāo)?？?HCV對人體無保護(hù)作用，亦是目前丙肝的主要觀察指標(biāo)之一。HCV-RNA是HCV的遺傳物質(zhì)，是反映體內(nèi)感染HCV的直接指標(biāo)。本研究兩組治療后ALT、AST、TBil、抗-HCV及HCV-RNA均明顯降低，且觀察組降低更明顯。說明聚乙二醇干擾素可更好地抑制體內(nèi)的HCV，改善或減輕肝損傷。

綜上所述，聚乙二醇干擾素用于慢性丙肝能更好地調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能，改善患者預(yù)后。

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