李琴,謝瓊
(華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬荊州醫(yī)院,湖北荊州434020)
?
鼻咽癌組織Ezrin、E-cadherin表達及其與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及患者預(yù)后的關(guān)系
李琴,謝瓊
(華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院附屬荊州醫(yī)院,湖北荊州434020)
目的 探討埃茲蛋白(Ezrin)、上皮細胞鈣黏蛋白(E-cadherin)在鼻咽癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。方法 選擇鼻咽癌患者53例(觀察組)、慢性鼻咽炎癥患者50例(對照組),取兩組病變組織,采用免疫組化法觀察Ezrin、E-cadherin蛋白表達;分析鼻咽癌組織Ezrin、E-cadherin表達與患者臨床病理參數(shù)及預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果 觀察組Ezrin陽性表達率明顯高于對照組,E-cadherin陽性表達率明顯低于對照(P均<0.05);臨床分期Ⅲ~Ⅳ期、伴淋巴轉(zhuǎn)移、浸潤深度T3~4者Ezrin陽性表達率明顯升高(P均<0.05),E-cadherin陽性表達率明顯降低(P均<0.05);Ezrin陰性者3年生存率明顯高于Ezrin陽性者,E-cadherin陽性者3年生存率明顯高于E-cadherin陰性者(P均<0.05)。結(jié)論 鼻咽癌組織Ezrin高表達、E-cadherin低表達,其表達變化與鼻咽癌侵襲、轉(zhuǎn)移及患者預(yù)后有關(guān)。
鼻咽癌;埃茲蛋白;上皮細胞鈣黏蛋白;預(yù)后
上皮細胞鈣黏蛋白(E-cadherin)屬于Ca2+依賴性的細胞黏附分子,對胚胎發(fā)育的細胞識別、遷移等具有重要作用。有研究證實,E-cadherin功能或表達缺失與惡性腫瘤的進展和轉(zhuǎn)移有關(guān)[1~3]。埃茲蛋白(Ezrin)屬于ERM家族的一員,為膜蛋白骨架連接蛋白,在維持細胞形態(tài)穩(wěn)定、連接黏附分子及調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面具有重要作用。Ognibene等[4]研究發(fā)現(xiàn),在乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌、骨癌等侵襲和轉(zhuǎn)移能力較強的惡性腫瘤組織中Ezrin過表達。但目前關(guān)于Ezrin、E-cadherin在鼻咽癌侵襲和轉(zhuǎn)移中的研究較少,二者是否參與了鼻咽癌的不良預(yù)后亦不十分明確。本研究觀察了鼻咽癌組織Ezrin、E-cadherin表達變化,并分析其表達與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及患者預(yù)后的關(guān)系。
1.1 臨床資料 選擇2010年5月~2012年5月我院收治的鼻咽癌患者53例(觀察組),均經(jīng)術(shù)后組織病理檢查確診,入組前未行放療、化療及手術(shù)治療。排除合并其他惡性腫瘤及既往給予其他抗腫瘤治療者。其中,男31例、女22例,年齡21~84(47±5)歲;臨床分期[5]:Ⅰ期3例,Ⅱ期10例,Ⅲ期22例,Ⅳ期18例;浸潤深度:T1~223例,T3~430例;合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移34例。同期選擇在我院就診的慢性鼻咽炎癥患者50例(對照組),男29例、女21例,年齡18~87(48±4)歲,鼻竇炎27例、咽炎23例。兩組性別、年齡具有可比性。
1.2 病變組織Ezrin、E-cadherin表達檢測 留取兩組相應(yīng)的病變組織,10%甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋,4 μm厚切片。切片常規(guī)脫蠟、水化,去除內(nèi)源性過氧化物酶,微波修復(fù),封閉組織非特異性抗原,以鼠抗人Ezrin單克隆抗體或鼠抗人E-cadherin單克隆抗體作為一抗,4 ℃孵育24 h,陰性對照以PBS代替一抗;以生物素標記的羊抗兔IgG作為二抗,37 ℃孵育30 min;滴加辣根過氧化酶標記的復(fù)合物,37 ℃孵育20 min;最后DAB顯色,蘇木精復(fù)染,二甲苯透明,中性樹膠封片,鏡檢。隨機取5個高倍鏡視野(×400),計數(shù)陽性細胞數(shù),以染色強度和陽性細胞所占比例綜合評定。Ezrin陽性主要定位于細胞質(zhì)和細胞膜,呈黃色;E-cadherin陽性主要定位于細胞質(zhì)或細胞膜,呈棕黃色或棕色。染色強度判定:無染色為0分,淺黃色為1分,棕黃色為2分,棕紅色為3分;陽性細胞所占比例:無陽性細胞為0分,陽性細胞所占比例<30%為1分、≥30%~<60%為2分、≥60%為3分。二者之和≤2分為陰性,≥3分為陽性。
1.3 術(shù)后治療及隨訪 鼻咽癌患者術(shù)后行常規(guī)局部根治性放療聯(lián)合化療。放療劑量:原發(fā)灶65~76 Gy,頸淋巴結(jié)50~65 Gy;放療時間35~54天。其中31例患者聯(lián)合1~6個療程輔助化療,化療方案為PF方案。術(shù)后隨訪3年,隨訪方式包括電話和門診復(fù)查,記錄患者生存期。
1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗或Fishers確切概率法。相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性分析。生存分析采用Kaplan-Meier法,生存率比較采用Log-rank檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 兩組Ezrin、E-cadherin陽性表達比較 觀察組及對照組Ezrin陽性表達率分別為67.9%(36/53)、6.0%(3/50),E-cadherin陽性表達率分別為17.0%(9/53)、98.0%(49/50)。觀察組Ezrin陽性表達率明顯高于對照組,E-cadherin陽性表達率明顯低于對照組(P均<0.05)。
2.2 鼻咽癌組織Ezrin、E-cadherin表達的關(guān)系 鼻咽癌組織Ezrin陽性表達與E-cadherin陽性表達呈負相關(guān)關(guān)系(r=-0.471,P<0.01)。
2.3 鼻咽癌組織Ezrin、E-cadherin陽性表達與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系 見表1。
表1 鼻咽癌組織Ezrin、E-cadherin陽性表達與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系
2.4 生存分析 鼻咽癌Ezrin陰性者17例,3年生存率為22.3%;Ezrin陽性者36例,3年生存率為6.2%;二者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=6.071,P<0.01)。鼻咽癌E-cadherin陽性者9例,3年生存率為40.8%;E-cadherin陰性者44例,3年生存率為22.7%;二者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=4.715,P<0.01)。
現(xiàn)已證實,Ezrin、E-cadherin異常表達與惡性腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移有關(guān)。Ezrin是維持細胞形態(tài)和功能完整的主要蛋白之一。正常情況下,Ezrin蛋白在體內(nèi)以激活狀態(tài)和休眠狀態(tài)兩種形式存在[6,7];當(dāng)Ezrin末端被活化后能誘導(dǎo)其與黏附分子連接,從而導(dǎo)致細胞發(fā)生遷移。有研究證實,Ezrin通過介導(dǎo)細胞膜與細胞骨架的連接來調(diào)節(jié)細胞活動[8,9]。細胞內(nèi)Ezrin異常變化可導(dǎo)致某些腫瘤的進展,并與患者預(yù)后有關(guān)。如王繁等[10]報道,子宮內(nèi)膜癌組織Ezrin過表達與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān),且患者生存期縮短。本研究觀察組Ezrin陽性表達率明顯高于對照組,臨床分期Ⅲ~Ⅳ期、伴淋巴轉(zhuǎn)移、浸潤深度T3~4者Ezrin陽性表達率明顯升高,且Ezrin陰性者3年生存率明顯高于Ezrin陽性者。說明Ezrin過表達與鼻咽癌侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān),且其過表達多預(yù)示患者預(yù)后不良。
E-cadherin在各種上皮細胞中廣泛存在,可介導(dǎo)同型細胞發(fā)生連接。Nakagawa等[11]研究證實,E-cadherin在維持上皮細胞形態(tài)、組織結(jié)構(gòu)和功能完整等方面具有重要作用。正常組織中E-cadherin表達穩(wěn)定;上皮性腫瘤組織中E-cadherin表達下調(diào)[12]。Ohishi等[13]報道,E-cadherin表達降低會抑制其與細胞內(nèi)catenin形成穩(wěn)定復(fù)合物,導(dǎo)致細胞骨架發(fā)生松動,細胞脫離原位而侵襲周圍組織。Koyuncuoglu等[14]研究證實,E-cadherin表達降低可導(dǎo)致由其介導(dǎo)的細胞間黏附性降低,細胞脫離原發(fā)灶并穿透基膜侵襲周圍組織。劉青等[15]研究發(fā)現(xiàn),鼻咽癌組織E-cadherin低表達與鼻咽癌臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。本研究觀察組E-cadherin陽性表達率明顯低于對照組,臨床分期Ⅲ~Ⅳ期、伴淋巴轉(zhuǎn)移、浸潤深度T3~4者E-cadherin陽性表達率明顯降低;E-cadherin陽性者3年生存率明顯高于E-cadherin陰性者。提示E-cadherin陽性表達可抑制腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移。本研究還發(fā)現(xiàn),鼻咽癌組織Ezrin陽性表達率與E-cadherin陽性表達率呈負相關(guān),說明Ezrin高表達、E-cadherin低表達均與鼻咽癌的侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān)。
綜上所述,Ezrin高表達、E-cadherin低表達參與了鼻咽癌的侵襲、轉(zhuǎn)移并與患者預(yù)后有關(guān)。
[1] Liu XW, Xie CM, Mo YX, et al. Magnetic resonance imaging features of nasopharyngeal carcinoma and nasopharyngeal non-Hodgkin′s lymphoma: are there differences[J]. Eur J Radiol, 2012,81(6):1146-1154.
[2] 陳奇松,林少俊,潘建基,等.779例鼻咽癌頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移規(guī)律分析[J].中國癌癥雜志,2010,20(1):50-54.
[3] Hoy B, Geppert T, Boehm M, et al. Distinct roles of secreted HtrA proteases from gram-negative pathogens in cleaving the junctional protein and tumor suppressor E-cadherin[J]. J Biol Chem, 2012,287(13):10115-10120.
[4] Ognibene M, Vanni C, Segalerba D, et al. The tumor suppressor hamartin enhances Dbl protein transforming activity through interaction with ezrin[J]. J Biol Chem, 2011,286(34):29973-29983.
[5] 王鋒剛,陸雪官,宦堅,等.鼻咽癌中國1992、2008分期和國際抗癌聯(lián)盟2010分期標準的比較研究[J].中華放射腫瘤學(xué)雜志,2011,20(4):270-275.
[6] 李海英.埃茲蛋白、轉(zhuǎn)移相關(guān)黏附分子44V6、E-鈣黏附素在人結(jié)腸癌組織中的表達及其意義[J].中國全科醫(yī)學(xué),2011,14(12):1318-1320.
[7] Morales FC, Molina JR, Hayashi Y, et al. Overexpression of ezrin inactivates NF2 tumor suppressor in glioblastoma[J]. Neuro Oncol, 2010,12(6):528-539.
[8] Yogesha SD, Sharff AJ, Giovannini M, et al. Unfurling of the band 4.1, ezrin, radixin, moesin (FERM) domain of the merlin tumor suppressor[J]. Protein Sci, 2011,20(12):2113-2120.
[9] Yonglitthipagon P, Pairojkul C, Chamgramol Y, et al. Prognostic significance of peroxiredoxin 1 and ezrin-radixin-moesin-binding phosphoprotein 50 in cholangiocarcinoma[J]. Hum Pathol, 2012,43(10):1719-1730.
[10] 王繁,王瑛嫦,周潔.MMP-9和Ezrin在子宮內(nèi)膜癌中的表達及與ER、PR的相關(guān)性[J].實用腫瘤雜志,2012,27(3):240-244.
[11] Nakagawa Y, Ohira M, Kubo N, et al. Tumor budding and E-cadherin expression are useful predictors of nodal involvement in T1 esophageal squamous cell carcinoma[J]. Anticancer Res, 2013,33(11):5023-5029.
[12] Hirano T, Satow R, Kato A, et al. Identification of novel small compounds that restore E-cadherin expression and inhibit tumor cell motility and invasiveness[J]. Biochem Pharmacol, 2013,86(10):1419-1429.
[13] Ohishi Y, Kurihara S, Takeuchi T, et al. E-cadherin nuclear staining is useful for the diagnosis of ovarian adult granulosa cell tumor[J].Hum Pathol, 2012,43(6):808-817.
[14] Koyuncuoglu M, Okyay E, Saatli B, et al. Tumor budding and E-Cadherin expression in endometrial carcinoma: are they prognostic factors in endometrial cancer[J]. Gynecol Oncol, 2012,125(1):208-213.
[15] 劉青,王雅棣,董稚明,等.錳超氧化物歧化酶和E-鈣黏蛋白在鼻咽癌組織中的表達及意義[J].中華放射腫瘤學(xué)雜志,2009,18(1):37-41.
謝瓊(E-mail: 1279566754@qq.com)
10.3969/j.issn.1002-266X.2016.40.032
R739.6
B
1002-266X(2016)40-0094-03
2016-07-24)