劉震凌　王佳楠

?

HPLC法測定米格來寧片中安替比林與咖啡因的含量

劉震凌王佳楠

【摘要】目的 用HPLC法同時測定米格來寧片中安替比林與咖啡因的含量。方法 采用 Waters C(18)色譜柱；以乙腈-水（20：80）為流動相；檢測波長為273 nm。結(jié)果 安替比林進樣量在0.014 12～0.706 20 μg、咖啡因進樣量在0.002 79～0.139 60 μg，均與峰面積呈良好的線性關(guān)系，安替比林、咖啡因的平均回收率與RSD分別為99.7%、0.6%，100.0%、0.5%（n=9）。結(jié)論 該方法簡便、準(zhǔn)確，專屬性強，重現(xiàn)性好，可用于該制劑的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】米格來寧片；HPLC法；安替比林；咖啡因

作者單位：130033長春，吉林省藥品檢驗所化學(xué)室

米格來寧片又名安比咖片，主要由安替比林與咖啡因組成的復(fù)方制劑，為解熱鎮(zhèn)痛藥，主治偏頭痛。原標(biāo)準(zhǔn)采用三氯甲烷萃取咖啡因，以排除安替比林的干擾，方法操作繁瑣，結(jié)果誤差大，且易造成污染環(huán)境，因此建立HPLC法同時測定安替比林和咖啡因，方法簡便、準(zhǔn)確［1］。

1　儀器與試藥

Agilent1100高效液相色譜儀。安替比林對照品批號：100506-200301，咖啡因?qū)φ掌放枺?71215-200809（含量為99.9%），均為含量測定用，購自中國食品藥品檢定研究院；乙腈為色譜純，甲醇為色譜純，水為純化水。

2　方法與結(jié)果

2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性

色譜柱：Waters C18（4.6×250 mm，5 μm）；流動相：乙腈-水（20：80）；流速： 0.8 ml/min；柱溫：35℃；檢測波長：273 nm；進樣量：20 μl。理論板數(shù)按安替比林峰計算不低于5 000，安替比林峰與咖啡因峰的分離度應(yīng)符合要求。出峰順序為咖啡因、安替比林。

2.2對照品溶液的制備

取安替比林對照品與咖啡因?qū)φ掌愤m量，精密稱定，加水溶解并稀釋制成每1 ml中含安替比林27 μg與咖啡因2.7 μg的溶液。

2.3供試品溶液的制備

取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于安替比林0.27 g），置100ml量瓶中，加水適量振搖使溶解，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1 ml，置100 ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.4陰性對照溶液的制備

按處方比例配制不含安替比林和咖啡因的陰性樣品［2-3］，按供試品溶液的制備方法配制陰性對照溶液，注入液相色譜儀，結(jié)果在陰性對照溶液色譜圖中未檢出與對照品溶液兩個主成分峰保留時間一致的色譜峰。

2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線

取安替比林與咖啡因?qū)φ掌愤m量，精密稱定，加水溶解分別制成每1 ml中含安替比林0.014 12 mg與咖啡因0.002 793 mg 的混合溶液，分別精密吸取1、10、20、35、50 μl，注入液相色譜儀，記錄峰面積，以進樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程，安替比林：Y=5 061.2X+3.641，R=1.000 0；咖啡因：Y=3 585.5X+0.192 4，R=1.000 0。結(jié)果表明安替比林進樣量在0.014 12～0.706 20 μg、咖啡因進樣量在0.002 79～0.139 60 μg，均與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.6 精密度試驗

精密量取對照品溶液20 μl，注入液相色譜儀，重復(fù)進樣6次，記錄色譜峰面積，安替比林與咖啡因的RSD均為0.1%。

2.7穩(wěn)定性試驗

取同一供試品溶液，分別于0、6、12、18、24 h時，注入液相色譜儀，記錄色譜峰面積，安替比林與咖啡因的RSD分別為0.2%，0.6%。

2.8重復(fù)性試驗

取同一批次供試品（批號：140104），按2.3項下方法制備6份供試品溶液，測定含量，安替比林、咖啡因的平均含量與RSD分別為97.1%、0.4%，93.8%、0.9%。

2.9樣品的測定

按上述方法測定3批樣品中安替比林與咖啡因的含量，結(jié)果見表1。

表1　3批樣品含量測定結(jié)果

3　討論

經(jīng)紫外-可見分光光度計掃描，安替比林分別在242 nm與255 nm波長處有最大吸收，咖啡因在273 nm波長處有最大吸收，因咖啡因處方量小，故選擇273 nm為該方法的測定波長［4-5］。

參考氨基比林咖啡因片［1］的色譜條件，以甲醇—水（35： 65）為流動相，結(jié)果安替比林色譜峰的拖尾因子較大，經(jīng)試驗將流動相優(yōu)化為乙腈—水（20：80）后，安替比林色譜峰對稱性較好。考察不同品牌色譜柱測定本品，兩個主成分均分離效果良好，且測定結(jié)果重現(xiàn)性較好，本品對不同品牌色譜柱均適用［6-8］。

參考文獻

［1］國家藥典委員會.國家藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)（化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)）第十一冊［S］.2002：1.

［2］閆海燕.高效液相色譜法測定小兒氨酚烷胺顆粒中咖啡因含量［J］.化學(xué)與生物工程，2010，27（10）：92-94.

［3］王軍，權(quán)勤波，宋健健，等.UFLC同時測定復(fù)方氨酚烷胺片中對乙酰氨基酚與和咖啡因的含量［J］.中國藥師，2009，12（12）：1775-1777.

［4］劉玲，蘇仁俊.高效液相色譜法測定復(fù)方氨林巴比妥注射液中氨基比林和安替比林的含量［J］.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2008，28（11）：84-85.

［5］朱瑩，趙霓，王璐.HPLC法測定復(fù)方柳安咖注射液中水楊酸鈉、安替比林和咖啡因的含量［J］.西北藥學(xué)雜志，2012，27（1）：34-36.

［6］李安平，楊錫，丁永輝，等.一測多評HPLC法測定丹參注射液中7個水溶性成分含量［J］.藥物分析雜志，2012，32（9）：1534-1540.

［7］郝愛魚，趙麗元，劉英慧，等.HPLC法測定中藥飲片中黃曲霉毒素殘留量的假陽性研究［J］.藥物分析雜志，2013，33（3）：458-464.

［8］張春玲.HPLC法測定金赤苓膠囊中鹽酸小檗堿含量［J］.中國社區(qū)醫(yī)師（醫(yī)學(xué)專業(yè)），2011，13（26）：8-9.

Determination of Antipyrine and Caffeine Contents of Antipyriineand Caffeine Citrate Tablets by HPLC

LIU Zhenling WANG Jia’nan Jilin Province Institute for Drug Control，Chemical Room，Changchun 130033，China

【Abstract】

Objective We measured antipyrine and caffeine content in the Antipyriineand Caffeine Citrate Tablets by HPLC.Methods We used Waters C18 column， and used acetonitrile-water（20:80）as the mobile phase，and the detection wavelength was 273 nm.Results The injection volume of antipyrine was 0.014 12 to 0.706 20 μg， and the injection volume of caffeine was 0.002 79 to 0.139 60 μg.They were associated with the peak area showed a good linear relationship.The antipyrine’s and caffeine’s average recovery and RSD respectively 99.7%，0.6%，100.0%，0.5%（n=9）.Conclusion The method is simple，accurate，specific，reproducible，and can be used for quality control of the preparation.

【Key words】Antipyriineand Caffeine Citrate Tablets，HPLC，Antipyrine，Caffeine

doi：10.3969/j.issn.1674-9316.2016.04.083

【中圖分類號】R927

【文獻標(biāo)識碼】A

【文章編號】1674-9316（2016）04-0118-02