李忠鴻

【摘要】目的 探討不同抗菌藥物體外對(duì)沙眼衣原體的單獨(dú)和聯(lián)合抗菌的作用；方法 使用培養(yǎng)液稀釋法來(lái)測(cè)定體外抗菌藥物體對(duì)沙眼衣原體的單獨(dú)以及聯(lián)合抗菌作用，并著重分析抗菌藥物聯(lián)合之后相互作用狀況；結(jié)果 對(duì)體外沙眼衣原體而言，大觀霉素以及頭孢曲松同抗菌藥物聯(lián)合之后在體外對(duì)于沙眼衣原體為無(wú)關(guān)作用。大觀霉素以及紅霉素、多西環(huán)素進(jìn)行聯(lián)合的時(shí)候，分別有25%以及50%菌株表現(xiàn)為協(xié)同作用，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），頭孢曲松以及多西環(huán)素聯(lián)合的情況下8%的菌株體現(xiàn)出拮抗作用，氧氟沙星以及頭孢曲松聯(lián)合的情況下17%的菌株體現(xiàn)出協(xié)同作用；結(jié)論 體外聯(lián)合使用莫西沙星以及阿奇霉素，抗菌活性顯著提高，在生殖道感染患者治療過(guò)程當(dāng)中有重要應(yīng)用價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】抗菌藥物；沙眼衣原體；體外；抗菌；作用

【中圖分類(lèi)號(hào)】R-1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1671-8801（2015）05-0158-02

生殖道的沙眼農(nóng)原體感染可以說(shuō)是世界范圍內(nèi)最為常見(jiàn)的性傳播疾病之一，有著發(fā)病率高以及流行廣泛的特點(diǎn)，給人體健康帶來(lái)嚴(yán)重危害，已經(jīng)發(fā)展成為重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題之一。因?yàn)槊谀蛏车赖纳逞坜r(nóng)原體感染在臨床癥狀方面往往無(wú)特異性并且呈現(xiàn)出隱匿性，容易遭到醫(yī)護(hù)人員的忽視，使得病情遷延甚至反復(fù)感染，抗菌藥物敏感性嚴(yán)重下降，治療失敗的患者數(shù)量不斷上升[1]。本研究選取12例體外沙眼衣原體菌株，分析不同抗菌藥物單獨(dú)以及聯(lián)合使用的抗菌效果。

1資料與方法

1.1一般資料

菌株來(lái)源方面，選取12例我院收治的泌尿生殖道疾病患者標(biāo)本。采集患者標(biāo)本并接種于McCoy細(xì)胞，培養(yǎng)篩查得到陽(yáng)性標(biāo)本，增殖傳代3次到一定的濃度之后，使用氨酸磷酸鹽液保存，低溫（-70℃）條件下凍存待檢。

抗菌藥物方面，選用大觀霉素、頭孢曲松、氧氟沙星、多西環(huán)素以及紅霉素，均購(gòu)買(mǎi)于藥品生物制品所?？咕幬锔鶕?jù)試劑說(shuō)明溶解之后，使用維持培養(yǎng)基（培養(yǎng)基+2‰的放線菌酮+0.25%的葡萄糖）稀釋分裝抗菌藥物，-20℃條件下凍存[2]。

1.2方法

1.2.1最低抑菌濃度的測(cè)定方法。首先使用96孔板制備單層細(xì)胞，然后接種沙眼衣原體每ml4×104）到單層細(xì)胞，轉(zhuǎn)速設(shè)定為2500r/min，溫度設(shè)定為3O℃，離心50min，去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基，添加含有濃度（經(jīng)5次倍比稀釋?zhuān)┑目咕幬锱囵B(yǎng)基，在37℃以及5%的CO2環(huán)境中培養(yǎng)48h。去除維持培養(yǎng)基使用丙酮固定，并使用FITC標(biāo)記之后的抗沙眼衣原體抗體染色1h，熒光顯微鏡視野觀察沙眼衣原體的生長(zhǎng)狀況。可以抑制包涵體生長(zhǎng)的藥物濃度是該藥的最低抑菌濃度（MIC）。每個(gè)實(shí)驗(yàn)都需要重復(fù)進(jìn)行3次，同時(shí)設(shè)定陽(yáng)性對(duì)照以及陰性對(duì)照，其中陽(yáng)性對(duì)照不加藥但是接種沙眼衣原體，陰性對(duì)照加入藥物但是并不接種沙眼衣原體）[3]。

1.2.2聯(lián)合藥敏試驗(yàn)方法?；具^(guò)程類(lèi)似于MIC測(cè)定試驗(yàn)。使用棋盤(pán)格模型稀釋需要測(cè)量的藥物，設(shè)定抗菌藥物的濃度范圍為3-1/12倍的MIC。使用無(wú)菌96孔板進(jìn)行藥物稀釋。分別在縱向以及橫向上對(duì)A藥以及B藥做好倍比稀釋?zhuān)_保獲得含有系列濃度的藥物A以及B的培養(yǎng)基。使用稀釋板當(dāng)中含有的藥物A以及藥物B的培養(yǎng)基，離心之后替換接種板上各個(gè)孔內(nèi)的內(nèi)生長(zhǎng)培養(yǎng)基。試驗(yàn)結(jié)果中FIC（部分抑菌濃度）的指數(shù)越高，表明拮抗作用越強(qiáng)，同時(shí)FIC指數(shù)越低，表明協(xié)同作用越強(qiáng)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

將所檢測(cè)的數(shù)據(jù)用統(tǒng)計(jì)學(xué)專(zhuān)業(yè)軟件數(shù)據(jù)包SPSS18.0進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)用（x±s）表示，以P<0.05具有差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

大觀霉素以及頭孢曲松同抗菌藥物聯(lián)合之后在體外對(duì)于沙眼衣原體為無(wú)關(guān)作用。大觀霉素以及紅霉素、多西環(huán)素進(jìn)行聯(lián)合的時(shí)候，分別有25%以及50%菌株表現(xiàn)為協(xié)同作用，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），頭孢曲松以及多西環(huán)素聯(lián)合的情況下8%的菌株體現(xiàn)出拮抗作用，氧氟沙星以及頭孢曲松聯(lián)合的情況下17%的菌株體現(xiàn)出協(xié)同作用，具體結(jié)果見(jiàn)表1。

3結(jié)論

沙眼衣原體作為臨床上的常見(jiàn)病原體，迄今為止并沒(méi)有有效疫苗，所以抗生素是治療衣原體引發(fā)泌尿生殖道感染的常規(guī)途徑，尤其是喹喏酮類(lèi)的抗生素有著比較明顯的抗沙眼衣原體活性，因此在近年來(lái)被推薦作為沙眼衣原體宮頸炎以及尿道炎感染治療的藥物，同時(shí)用來(lái)治療沙眼衣原體感染誘發(fā)的慢性盆腔炎，臨床上有著比較理想的使用價(jià)值。其中氧氟沙星在臨床上的應(yīng)用不夠廣泛，其抑菌以及殺菌的濃度最低，并且抗沙眼衣原體的活性也最強(qiáng)，并且氧氟沙星的半衰期比較長(zhǎng)，能夠每天單次給藥，因此在治療泌尿生殖道的沙眼衣原體感染過(guò)程當(dāng)中，使用前景理想。不過(guò)需要注意的是，體外藥物敏感性實(shí)驗(yàn)的抗沙眼衣原體活性強(qiáng)，并不等同與治療沙眼衣原體泌尿生殖道炎癥的臨床效果一定滿(mǎn)意，仍需要進(jìn)行體內(nèi)藥物的敏感性實(shí)驗(yàn)。

綜上所述，體外聯(lián)合使用莫西沙星以及阿奇霉素，抗菌活性顯著提高，在生殖道感染患者治療過(guò)程當(dāng)中有重要應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

[1]韓建德，陳木開(kāi)，李斌，等.沙眼衣原體致小鼠輸卵管炎的病理研究[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)科學(xué)版，2014，26（5）：520-522.

[2]韓建德，張?jiān)魄?，涂裕英，?泌尿生殖道沙眼衣原體體外藥物敏感性測(cè)定[J].中國(guó)抗生素雜志，2013，27（7）：441-442.

[3]楊曉靜，楊昕娜，江勇，等.天津地區(qū)泌尿生殖道沙眼衣原體臨床株藥敏分析[J].中華皮膚科雜志，2014.42（1）：56-57.