吳啟嬌，童毅，曹麗琰，楊德琴，徐君全，常俊，范林霞

(昆明學(xué)院醫(yī)學(xué)院，云南昆明650214)

賽科希德SF-8000凝血測(cè)試系統(tǒng)性能評(píng)價(jià)

吳啟嬌，童毅，曹麗琰，楊德琴，徐君全，常俊，范林霞

(昆明學(xué)院醫(yī)學(xué)院，云南昆明650214)

目的對(duì)國(guó)產(chǎn)賽科希德SF-8000凝血測(cè)試系統(tǒng)(簡(jiǎn)稱SF-8000)進(jìn)行性能評(píng)價(jià)。方法對(duì)SF-8000的精密度、準(zhǔn)確度、線性、可比性等基本性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。將200 g/L血紅蛋白液以1∶200、2∶200、3∶200、4∶200、5∶200比例分別加入到12例新鮮血漿中，獲得實(shí)驗(yàn)血漿，與原血漿及鹽水稀釋對(duì)照血漿凝血結(jié)果進(jìn)行比較;對(duì)15例氣泡標(biāo)本與對(duì)照標(biāo)本進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)，比較檢測(cè)參數(shù)有無差異;對(duì)12例新鮮標(biāo)本應(yīng)用新鮮復(fù)溶試劑及冷藏24 h試劑分別進(jìn)行檢測(cè)，比較測(cè)定結(jié)果的差異;分別對(duì)13例冷藏4 h及24 h標(biāo)本與新鮮標(biāo)本進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)，比較測(cè)定結(jié)果的差異。結(jié)果儀器各項(xiàng)基本性能均符合廠家要求。溶血及氣泡會(huì)不同程度影響凝血4項(xiàng)的檢測(cè)，當(dāng)血紅蛋白濃度達(dá)到1～1.5 g/L時(shí)，活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶原時(shí)間(PT)結(jié)果與原血漿組產(chǎn)生差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，達(dá)到4 g/L時(shí)與對(duì)照血漿組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);試劑復(fù)溶24 h后除APTT試劑外(P＜0.01)，其它項(xiàng)目試劑與新復(fù)溶試劑檢測(cè)結(jié)果無明顯差異，穩(wěn)定性良好;標(biāo)本放置4 h不會(huì)導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)明顯差異，但放置24 h后，APTT、PT、纖維蛋白原(FIB)結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。結(jié)論SF-8000凝血測(cè)試系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)性能符合國(guó)家、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。應(yīng)嚴(yán)格按照使用手冊(cè)操作，避免干擾因素出現(xiàn)，以保證結(jié)果的臨床適用性。

SF-8000凝血測(cè)試系統(tǒng);性能評(píng)價(jià);干擾因素

長(zhǎng)期以來，由于國(guó)內(nèi)醫(yī)療器械技術(shù)水平與國(guó)外差異懸殊，且國(guó)內(nèi)醫(yī)院也不認(rèn)可，所以我國(guó)高端醫(yī)療設(shè)備市場(chǎng)被進(jìn)口產(chǎn)品所壟斷。近日，國(guó)家衛(wèi)生與計(jì)劃生育委員會(huì)啟動(dòng)第1批優(yōu)秀國(guó)產(chǎn)醫(yī)療設(shè)備產(chǎn)品遴選工作［1］。這意味著在推進(jìn)我國(guó)醫(yī)療制度的改革過程中，推進(jìn)國(guó)產(chǎn)醫(yī)療設(shè)備發(fā)展應(yīng)用，降低醫(yī)療成本，也是非常重要的一環(huán)?；谶@樣的國(guó)產(chǎn)醫(yī)械發(fā)展背景，我們對(duì)國(guó)產(chǎn)賽科希德SF-8000凝血測(cè)試系統(tǒng)(簡(jiǎn)稱SF-8000)的性能進(jìn)行了系統(tǒng)評(píng)測(cè)，旨在客觀的評(píng)價(jià)其實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用的可接受性及為產(chǎn)品今后技術(shù)升級(jí)的方向提出些許建議。

材料和方法

一、儀器

SF-8000和法國(guó)STAGO-STA全自動(dòng)血凝儀(簡(jiǎn)稱STAGO-STA)。

二、試劑

SF-8000配套2 mL活化部分凝血活酶時(shí)間(activated partial thromboplastin time，APTT)、凝血酶原時(shí)間(prothrombin time，PT)、凝血酶時(shí)間(thrombin time，TT)、纖維蛋白原(fibrinogen，F(xiàn)IB)測(cè)定試劑和STAGO-STA原裝試劑。

三、標(biāo)本

某高校醫(yī)學(xué)生志愿者靜脈血，109 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝，2500×g離心15 min;賽科希德Ⅰ、Ⅱ水平質(zhì)控血漿用于日間精密度及準(zhǔn)確度測(cè)定。

四、方法

1.批內(nèi)精密度分析將3份高、中、低值標(biāo)本各連續(xù)測(cè)定20次APTT、PT、TT、FIB，計(jì)算各參數(shù)的變異系數(shù)(CV)值。

2.日間精密度及準(zhǔn)確性分析將同批次賽科希德水平Ⅰ、Ⅱ質(zhì)控血漿(批號(hào)D124B001-1、D112C002-2)連續(xù)測(cè)定10 d，每天測(cè)定2次，2次測(cè)定間隔4～6 h，求各參數(shù)的CV值;并同時(shí)進(jìn)行單樣本t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)待評(píng)價(jià)的檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定值與標(biāo)定值是否存在差異，從而評(píng)價(jià)其準(zhǔn)確性。

3.線性分析針對(duì)SF-8000的特點(diǎn)，進(jìn)行FIB的線性相關(guān)度及線性范圍的檢測(cè)，將3 g/L定值血漿用咪唑緩沖液做1∶5、1∶10、1∶20、1∶30稀釋，應(yīng)用線性回歸檢測(cè)其線性相關(guān)性。

4.可比性分析將32份正常及異常標(biāo)本、質(zhì)控血漿分別用SF-8000和STAGO-STA測(cè)定APTT、PT［國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值(international normalization ratio，INR)］、TT和FIB，最后分別進(jìn)行各參數(shù)2個(gè)組之間的相關(guān)性分析。

5.攜帶污染率實(shí)驗(yàn)采用Bioughton法［2］測(cè)定，即高低2個(gè)含量的血漿，先測(cè)定高值樣品3次(H1、H2、H3)，隨時(shí)測(cè)定低值樣品3次(L1、L2、L3)。攜帶污染率=(L1-L3)/(H3-L3)× 100%，本研究主要對(duì)1組標(biāo)本進(jìn)行了APTT、PT、TT、FIB的攜帶污染率抽樣實(shí)驗(yàn)。

6.干擾實(shí)驗(yàn)本研究主要考查了溶血與氣泡對(duì)凝血4項(xiàng)測(cè)定的影響。用洗滌壓積紅細(xì)胞凍融溶血，離心去除細(xì)胞碎片，制作成(200± 2)g/L的血紅蛋白液，以0∶200、1∶200、2∶200、3∶200、4∶200、5∶200、6∶200梯度比例加入到血漿中，對(duì)照血漿用生理鹽水作相同稀釋，分別進(jìn)行凝血4項(xiàng)的測(cè)定;用2 μL加樣槍反復(fù)吹吸，獲取(2.0±0.5)mm氣泡層，從而得到氣泡血漿，與原血漿采用1∶1配對(duì)，分別測(cè)定凝血4項(xiàng)參數(shù)，最后用配對(duì)t檢驗(yàn)分析溶血及氣泡對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾。

7、試劑復(fù)溶冷藏時(shí)間影響分析分別使用復(fù)溶0 h及復(fù)溶24 h冷藏試劑同時(shí)對(duì)12份標(biāo)本進(jìn)行APTT、PT、TT、FIB測(cè)定，應(yīng)用配對(duì)t檢驗(yàn)分析2個(gè)組之間有無差異。

8、標(biāo)本放置時(shí)間影響分析分別對(duì)同一標(biāo)本在采集后0 h及冷藏4、24 h后進(jìn)行APTT、PT、TT、FIB測(cè)定，應(yīng)用配對(duì)t檢驗(yàn)分別分析標(biāo)本冷藏4 h和24 h后結(jié)果有無差異。

五、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié)果

一、批內(nèi)精密度及日間精密度分析

SF-8000日間精密度略高于批內(nèi)精密度，與廠家提供的CV范圍吻合，即正常樣本FIB≤5.0%，其余3項(xiàng)均≤3.0%;異常樣本FIB≤10.0%，其余3項(xiàng)均≤5.0%，同時(shí)也符合美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(the National Committee for Clinical Laboratory Standards，NCCLS)EP5-A2文件［3］的要求。見表1、表2。

二、準(zhǔn)確性分析

SF-8000檢測(cè)水平Ⅰ質(zhì)控血漿PT、APTT、FIB的結(jié)果與質(zhì)控品靶值進(jìn)行比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.05)，但偏倚均＜±10%(SF-8000產(chǎn)品使用手冊(cè)要求)。而水平Ⅰ質(zhì)控血漿TT及水平Ⅱ質(zhì)控血漿各指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果與靶值比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＞0.05)。因此，可認(rèn)為SF-8000的準(zhǔn)確度符合要求。見表3。

表1 批內(nèi)精密度

三、線性分析

FIB濃度在0.88～5.98 g/L之間有良好的線性相關(guān)(P=0.000)，回歸方程為Y=-0.66+ 1.011X，線性系數(shù)=1.011，在廠家要求的范圍(1.00±0.02)內(nèi)，同時(shí)線性范圍與廠家說明的0.8～8.0 g/L符合，能滿足大多數(shù)臨床標(biāo)本的檢測(cè)線性范圍。

表2 日間精密度

四、可比性分析

采用SF-8000和STAGO-STA同時(shí)測(cè)定32份正常及異常標(biāo)本。結(jié)果顯示2個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)PT、APTT、TT、FIB測(cè)定結(jié)果的相關(guān)性良好［相關(guān)系數(shù)(r)分別為0.911、0.962、0.844、0.887，P均= 0.00］，TT、FIB項(xiàng)目的r值略低。見表4。

五、攜帶污染率

本研究中PT、APTT、TT 3項(xiàng)參數(shù)時(shí)間延長(zhǎng)定為低值樣品，時(shí)間正常為高值樣品，F(xiàn)IB濃度高者為高值樣品，反之為低值樣品。SF-8000攜帶污染率＜±5%，符合廠家的要求。見表5。

表3 SF-8000的準(zhǔn)確性

表4 SF-8000與STAGO-STA的相關(guān)性分析

表5 SF-8000的攜帶污染率分析

六、干擾實(shí)驗(yàn)

隨著血紅蛋白加入量的增加，干擾越來越明顯，特別是對(duì)PT、APTT測(cè)定的影響更為顯著。溶血血漿血紅蛋白濃度為1.0～1.5 g/L時(shí)，測(cè)定結(jié)果與原血漿結(jié)果的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，血紅蛋白濃度達(dá)到4 g/L時(shí)與鹽水稀釋血漿對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。將200 g/L血紅蛋白以1∶50～1∶40比例加入血漿時(shí)，儀器在2項(xiàng)以上測(cè)定中無法獲得結(jié)果(即結(jié)果＞100或顯示＞max)。由此可見，SF-8000有一定的抗溶血干擾能力，但對(duì)于特殊的重度溶血標(biāo)本應(yīng)注意結(jié)果的偏倚。

氣泡血漿在PT、APTT、TT項(xiàng)目的檢測(cè)上與對(duì)照組有明顯差異(P＜0.05)。說明吸入氣泡對(duì)檢測(cè)結(jié)果有明顯干擾，應(yīng)注意避免。

七、SF-8000配套試劑復(fù)溶冷藏時(shí)間對(duì)檢測(cè)的影響

SF-8000配套試劑說明書上聲明試劑復(fù)溶后在2～8℃條件下可穩(wěn)定5～30 d。本研究采用復(fù)溶后4℃冷藏24 h的試劑測(cè)定新鮮標(biāo)本的PT、APTT、TT和FIB，其中APTT結(jié)果與新鮮復(fù)溶試劑測(cè)定結(jié)果比較有明顯差異(P=0.00)，其余3項(xiàng)未出現(xiàn)差異，見表8。由此可見，APTT試劑在冷藏24 h后質(zhì)量出現(xiàn)異常，會(huì)干擾到標(biāo)本測(cè)定。

八、標(biāo)本放置時(shí)間對(duì)檢測(cè)的影響

SF-8000配套試劑說明書上聲明標(biāo)本應(yīng)在4 h內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。本研究中標(biāo)本放置4 h后凝血4項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果與新鮮標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果比較無明顯差異(P＞0.05)，而標(biāo)本冷藏24 h再進(jìn)行PT、APTT測(cè)定，檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)明顯變化。

表6 溶血干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表7 氣泡干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表8 新鮮復(fù)溶試劑與復(fù)溶后冷藏24 h試劑測(cè)定結(jié)果比較

表9 放置4 h、冷藏24 h與0 h標(biāo)本的測(cè)定結(jié)果比較

討論

SF-8000主要檢測(cè)的參數(shù)為APTT、PT［凝血酶原比率(prothrombin rate，PTR)、INR］、TT、FIB值，其主要在民營(yíng)、社區(qū)等一級(jí)醫(yī)院應(yīng)用較為廣泛。本研究對(duì)SF-8000的精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍、與同類儀器相關(guān)性、攜帶污染率、干擾因素等方面進(jìn)行了系統(tǒng)測(cè)評(píng)。總體來看，該檢測(cè)系統(tǒng)性能符合實(shí)驗(yàn)室的診斷要求，與同類型進(jìn)口血凝儀有良好的相關(guān)性。且該型儀器操作方便，設(shè)計(jì)合理，安裝條件不苛刻，非常適用于一、二級(jí)醫(yī)院的診斷需求。

SF-8000的檢測(cè)原理為凝固磁珠法，判斷方法為渦流感應(yīng)，不易受特異性血漿的干擾［4］。因此本研究未對(duì)高脂及黃疸標(biāo)本進(jìn)行干擾檢測(cè)。SF-8000采用一次性檢測(cè)杯，可減少攜帶污染，提高準(zhǔn)確度。SF-8000的FIB參數(shù)使用Clauss法測(cè)定。該方法為NCCLS推薦的臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定FIB的常規(guī)方法，能真實(shí)反映人體內(nèi)具有凝血功能的FIB水平［5］。SF-8000的線性范圍能滿足各級(jí)醫(yī)院的診斷需求，若超出線性范圍應(yīng)按說明對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋后再測(cè)定。

在使用SF-8000時(shí)應(yīng)注意產(chǎn)品使用手冊(cè)中明確提到的主要干擾因素，如溶血、血小板聚集及吸入氣泡。應(yīng)嚴(yán)格按照操作說明進(jìn)行操作。對(duì)于溶血標(biāo)本對(duì)測(cè)定結(jié)果的干擾，從本研究結(jié)果來看，有部分因素來源于血紅蛋白液對(duì)血漿標(biāo)本的稀釋作用，這與光學(xué)法溶血、黃疸、高脂等特異性標(biāo)本能改變樣品的透射或散射濁度的成因是不同的［4］。氣泡在雙磁路磁珠法中一般不會(huì)嚴(yán)重影響測(cè)定結(jié)果［4］，但在本研究中其仍是影響結(jié)果的一項(xiàng)重要因素。分析原因可能是由于本研究使用的是低規(guī)格樣品吸入模式，吸入的氣泡較易造成標(biāo)本吸入量誤差［5］。

綜上所述，在操作中應(yīng)嚴(yán)格進(jìn)行分析前質(zhì)量控制工作，保證標(biāo)本采集合格。同時(shí)應(yīng)注意試劑復(fù)溶后及時(shí)使用，中間運(yùn)輸、轉(zhuǎn)運(yùn)等因素會(huì)導(dǎo)致復(fù)溶后的試劑實(shí)際使用時(shí)間縮短。對(duì)于標(biāo)本而言，采集后也應(yīng)及時(shí)進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間收集標(biāo)本后統(tǒng)一上機(jī)檢測(cè)。另外，由于各實(shí)驗(yàn)室條件不一，當(dāng)正常實(shí)驗(yàn)對(duì)象測(cè)定值不在95%參考區(qū)間內(nèi)，建議建立自己實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間［6］。通過本次評(píng)測(cè)，希望相關(guān)醫(yī)療同行能客觀看待國(guó)產(chǎn)醫(yī)療器械，并也希望民族品牌在我國(guó)的醫(yī)療行業(yè)中能不斷壯大、繁榮。

［1］中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì).國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委、工業(yè)和信息化部聯(lián)合召開推進(jìn)國(guó)產(chǎn)醫(yī)療設(shè)備發(fā)展應(yīng)用會(huì)議［EB/OL］.(2014-08-18)［2014-09-30］.http://www.nhfpc.gov.cn/ guihuaxxs/s3586/201408/71ce8bb4267 c4578a2ce 169a72bf4c60.shtml.

［2］International Committee for Standardization in Haematology and International Committee on Thrombosis and Haemostasis.ICSH/ICTH recommendation for reporting prothrombin time in oral anticoagulant control［J］.J Clin Pathol，1985，38 (7):133-134.

［3］National Committee for Clinical Laboratory Standards.Evaluation of precision performance of quantitative measurement methds［S］.EP5-A2，NCCLS，2004.

［4］曾照芳，洪秀華.臨床檢驗(yàn)儀器［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2010:223.

［5］陸玉靜，馬駿龍，叢玉隆.UF-100分析儀檢測(cè)結(jié)果偏低原因與故障排除［J］.江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2007，25 (6):631.

［6］陳曉蓓.ACL-TOP全自動(dòng)血凝儀纖維蛋白原測(cè)定方法學(xué)評(píng)價(jià)［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，27(12):1021-1023.

［7］馮厚梅，孫德華，鄭磊，等.Sysmex CA 7000全自動(dòng)凝血儀性能評(píng)價(jià)［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2011，26(1):58-62.

Performance evaluation of SUCCEEDER SF-8000 coagu lation testing system

WU Qijiao，TONG Yi，CAO Liyan，YANG Deqin，XU Junquan，CHANG Jun，F(xiàn)AN Linxia.(The Medical College of Kunming University，Yunnan Kunming 650214，China)

ObjectiveTo evaluate the performance of domestic SUCCEEDER SF-8000 coagulation testing system (SF-8000).MethodsThe precision，accuracy，linearity，comparability and so on of SF-8000 were evaluated.The 200 g/L hemoglobin solution was added to 12 cases of fresh plasma in the proportions of 1∶200，2∶200，3∶200，4∶200 and 5∶200，and the experimental plasma was prepared.The differences of the results in the experimental plasma，the original plasma and the brine-diluted control plasma were analyzed.The differences of 15 cases of bubble specimens and control specimens＇results were analyzed by pairedt-test.The 12 fresh specimens were measured with fresh dissolvedreagents and 24h-refrigerated reagents separately，and the differences of the 2 sets of results were analyzed.A total of 13 cases of 4h-refrigerated specimens，24h-refrigerated specimens and fresh specimens were measured，and the differences were analyzed.ResultsThe basic properties of the instrument were all in accordance with the requirements of manufacturers.Hemolysis and bubbles affected the results of SF-8000 in different levels.When hemoglobin concentration reached 1-1.5 g/L，the results of activated partial thromboplastin time(APTT)and prothrombin time(PT) had significantly statistical differences from those of the original plasma group(P＜0.01)，when it reached 4 g/L，they had statistically significant differences from the control plasma group(P＜0.01).In addition to the reagent of APTT (P＜0.01)，the results of 24 h-refrigerated reagents and fresh refrigerated reagents had no statistical differences with good stability.The results of 4h-refrigerated specimens and fresh specimens had no statistical difference，but the results of 24 h-refrigerated specimens and fresh specimens in APTT，PT and fibrinogen(FIB)had statistical significance(P＜0.01).ConclusionsThe performance of SF-8000 meets the national and industrial standards.The manual operation should be strictly carried out to avoid appearing confounding factors，in order to ensure the results with clinical applicability.

SF-8000 coagulation testing system;Performance evaluation;Confounding factor

1673-8640(2015)09-0921-05

R446.11

A

10.3969/j.issn.1673-8640.2015.09.013

2014-09-30)

(本文編輯:范基農(nóng))

昆明學(xué)院大學(xué)生科研項(xiàng)目(DXS14057)

吳啟嬌，女，1992年生，主要從事血液學(xué)檢驗(yàn)工作。

曹麗琰，聯(lián)系電話:087-65098540。