真德智 王曉彬 李云松 李 杰 韓 毅 劉志東*

(1.首都醫(yī)科大學附屬北京胸科醫(yī)院/北京市結核病胸部腫瘤研究所胸外科，北京101149;2.內蒙古林業(yè)總醫(yī)院胸心血管外科，內蒙古牙克石022150;3.首都醫(yī)科大學附屬北京胸科醫(yī)院/北京市結核病胸部腫瘤研究所腫瘤科，北京101149)

雖然近些年肺癌診斷和治療技術不斷發(fā)展，但是肺癌仍是目前全球最致命的癌癥之一［1］。在世界很多國家和地區(qū)肺癌的發(fā)病率已經達到高峰而且成為主要的公共衛(wèi)生問題，這一問題在中國也尤為突出［2］。肺癌的發(fā)病機制至今仍不完全清楚，而除了吸煙之外，宿主因素包括遺傳多態(tài)性已成為導致肺癌的最重要單一因素，而且越來越多的肺癌發(fā)生機制相關研究開始關注這一因素［3］。

作為趨化因子家族的一員白細胞介素-8(interleukin-8，IL-8)是中性粒細胞和淋巴細胞的化學誘導劑［4-5］。單核細胞、中性粒細胞、成纖維細胞和內皮細胞等多種正常細胞均可分泌IL-8［6］。IL-8的首要作用是白細胞趨化活性，主要參與急性炎性反應的啟動和放大［7］。另外，多種腫瘤細胞也可分泌 IL-8［8］，并參與血管生成和新生血管依賴的腫瘤生長［9-10］。在多種類型腫瘤的侵襲和轉移中都能檢測出IL-8過表達［11-13］。IL-8-251T/A(rs4073)的基因多態(tài)性分為主要的T/T純合子基因型、T/A雜合子基因型和罕見的A/A純合子基因型。

目前已有許多關于IL-8-251T/A(rs4073)基因多態(tài)性與肺癌發(fā)生風險相關性的研究，但是結果并不一致。單中心研究，尤其是樣本量特別小的研究，無法檢測出基因多態(tài)性在肺癌中微小的影響。而基因多態(tài)性在不同人群中也會有不同作用。因此，本研究對符合納入標準的研究進行Meta分析，以期得到更準確的IL-8-251T/A(rs4073)基因多態(tài)性與肺癌發(fā)生風險的相關性。

1 材料和方法

1.1 文獻檢索與篩選

在 PubMed 中 應 用“IL-8”、“interleukin-8”、“-251T/A”、“rs4073”、“polymorphism”和“l(fā)ung cancer”詞語檢索2013年12月1日之前、全部語種和研究對象為人類的文獻。同時，對綜述中相關的參考文獻進行手工檢索。只篩選可得到全文的文獻，排除綜述、信件、評述和病理報告。對于相同數據的文獻，只納入近期或有完整數據的文獻進行Meta分析。

文獻納入標準:①評估了IL-8-251T/A基因多態(tài)性和肺癌發(fā)生風險的文獻;② 研究設計為病例對照研究;③提供了肺癌組和對照組的IL-8-251T/A各基因亞型例數。

1.2 數據提取

2名作者分別從符合上述納入標準的文獻中提取數據。如果出現(xiàn)分歧，由2位作者討論解決。

從每篇文獻中提取如下數據:第一作者姓氏、發(fā)表年份、種族、肺癌組例數、對照組例數、肺癌組基因亞型(T/T、T/A和A/A)例數和對照組基因亞型(T/T、T/A和A/A)例數。如果上述項目任何一項沒有在文獻中報道，那么這篇文章不被納入。其中種族按亞裔和非亞裔分類。對于病例數過少的研究不被納入本研究Meta分析。

1.3 統(tǒng)計學方法

所有的統(tǒng)計應用STATA11.0(Stata Corporation，College Station，TX)軟件進行分析。用比值比(odds ratios，OR)及95%置信區(qū)間(confidence intervals，CI)來計算IL-8-251T/A基因多態(tài)性和肺癌發(fā)生風險的相關性。A/A純合子基因型和攜帶A等位基因的(T/A+A/A)雜合子基因型與T/T純合子基因型的OR值進行合并計算。根據種族進行亞組分析。用基于卡方的Q檢驗對異質性進行評估［14］。當Q檢驗P＞0.1時表明研究間沒有異質性，采用固定效應模型(Mantel-Haenszel method)對OR進行合并計算［15］，否則用隨機效應模型(DerSimonian and Laird method)［16］。用單向敏感性分析來評估結果的穩(wěn)定性，即每次從Meta結果中剔除一項研究，以反映該項被剔除研究對結果的影響［17］。對于潛在的發(fā)表偏倚采用log(OR)的標準誤和log(OR)為橫縱坐標的漏斗圖進行評估。不對稱的點表示可能存在的發(fā)表偏倚。漏斗圖的不對稱性用OR的自然對數作為坐標的線性回歸方法進行評估即Egger’s線性回歸檢驗。其截距的意義用t檢驗反映Egger結果(P＜0.05被認為有顯著的發(fā)表偏倚)［18］。

2 結果

2.1 文獻檢索結果

本篇Meta分析，根據納入標準共納入6篇文獻，其中肺癌組3 265例和對照組3 607例［19-24］，主要特征見表1。所納入的6篇均為英文文獻，標本量從231～4 260例不等，所有病例均有病理證實，其中對照組主要是健康人群。6篇文獻中2篇為針對亞裔人群的研究，另外4篇為非亞裔人群。

2.2 Meta 分析結果

Meta分析的主要結果見表2。合并計算所有納入研究A/A純合子和攜帶A等位基因的(T/A+A/A)雜合子與野生型純合子(T/T)的OR值，肺癌組3 265例OR=1.03(95%CI:0.92～1.14，異質性 P=0.235)，對照組3 607例 OR=1.07(95%CI:0.96～1.19，異質性P=0.245，圖1)。對數據按種族進行亞組分析，發(fā)現(xiàn)在亞裔人群中攜帶A等位基因(T/A+A/A)雜合子(OR=1.48，95%CI:1.04 ～2.11，異質性P=0.030)和 A/A純合子(OR=1.35，95%CI:

1.02～1.92，異質性P=0.090)與T/T純合子有著顯著的肺癌發(fā)生風險相關性。而在非亞裔人群中，無論是A/A純合子和T/T野生型純合子(OR=1.12，95%CI:0.72～1.25，異質性P=0.284)還是攜帶A等位基因(T/A+A/A)雜合子和野生型T/T純合子(OR=1.03，95%CI:0.92 ～1.15，異質性 P=0.602)都沒有發(fā)現(xiàn)顯著的肺癌發(fā)生風險相關性。

表1 納入Meta分析的IL-8-251T/A基因多態(tài)性與肺癌發(fā)生風險相關性研究主要特點Tab.1 Main characteristics of studies investigated the association between IL-8-251 T/A polymorphisms and lung cancer risk in the Meta-analysis

表2 Meta 分析中合并的比值比(OR)和95%置信區(qū)間(CI)Tab.2 Main results of pooled odds ratios(OR)with confidence interval(CI)in the meta-analysis

圖1 IL-8-251 T/A基因多態(tài)性(TA+AA)和TT與肺癌發(fā)生風險相關性的森林圖Fig.1 Forest plot(fixed-effects model)of lung cancer risk associated with IL-8-251 T/A polymorphism for(TA+AA)versus TT

2.3 敏感性分析

每次剔除Meta分析中的一項研究重新合并計算OR值，來觀察剔除該單個研究后的OR值是否有改變，結果證實沒有某一研究被剔除后導致合并后OR值發(fā)生明顯變化。

2.4 發(fā)表偏倚

用Begg’s漏斗圖和Egger’s檢驗來評估文獻的發(fā)表偏倚。經Egger’s檢驗評估發(fā)表偏倚，未發(fā)現(xiàn)明顯的發(fā)表偏倚(P=0.283)。此外，發(fā)表偏倚的漏斗圖也沒顯示不對稱性(圖2)。上述檢驗結果未發(fā)現(xiàn)潛在的發(fā)表偏倚。

圖2 IL-8-251 T/A基因多態(tài)性(TA+AA)和TT與肺癌發(fā)生風險相關性的Begg’s漏斗圖Fig.2 Begg’s funnel plot of IL-8-251 T/A polymorphism and lung cancer risk for(TA+AA)versus TT

3 討論

IL-8基因位于4號染色體q13-21，包括4個外顯子、3個內含子和鄰近的啟動子區(qū)。這個基因的編碼序列表現(xiàn)出多種功能上的基因多態(tài)性，已知的特征有15個。研究［25］發(fā)現(xiàn)，在同樣的致癌因素暴露中一些個體對某類腫瘤存在易感性。宿主因素即參與致瘤作用的基因多態(tài)性，導致這種易感性的差異。因此，癌癥的基因易感性已成為目前研究的熱點。最近，IL-8基因多態(tài)性與多種腫瘤的發(fā)生相關性被越來越多的關注。近期，有2篇關于IL-8-251A＞T基因多態(tài)性的Meta分析［26-27］發(fā)現(xiàn)IL-8-251T/A基因多態(tài)性與胃癌、乳腺癌和鼻咽癌發(fā)病風險增加有顯著相關性。本研究Meta分析總結了IL-8-251T/A基因多態(tài)性與肺癌發(fā)生風險相關性的數據，包括肺癌組3 265例和對照組3 607例。本研究結果顯示在全部人群中IL-8-251T/A基因多態(tài)性和肺癌發(fā)生風險沒有相關性，但是在亞裔人群中IL-8-251T/A基因多態(tài)性與肺癌發(fā)生風險相關性顯著增加。

當按種族進行亞組分析［28］時，發(fā)現(xiàn)在亞裔人群中攜帶A等位基因(T/A+A/A)雜合子和A/A純合子個體比野生型T/T純合子個體表現(xiàn)出更高的肺癌發(fā)生風險。而在非亞裔人群中，無論何種基因型均未發(fā)現(xiàn)與肺癌發(fā)生風險具有相關性。這一發(fā)現(xiàn)表明IL-8-251T/A基因多態(tài)性在某個特定種族中是肺癌發(fā)生的重要影響因素，A等位基因對于肺癌發(fā)生風險的影響因種族而有所不同。種族不同反映的是遺傳背景及環(huán)境因素的不同，對于全部人群可能出現(xiàn)疾病與標志物相關性的假陽性或假陰性結果，因此按人群特征分層研究具有重要意義。

IL-8-251T/A的A等位基因可以增加肺癌發(fā)病率的機制還不清楚。T/A單核苷酸多態(tài)性在具有251對堿基的IL-8基因的啟動子區(qū)上游的轉錄啟始位點，并且體外實驗已經證實其可影響IL-8的產生和IL-8啟動子的轉錄活性［29-30］。幾乎先前所有的研究［30-32］都證實-251的A等位基因與較高的IL-8轉錄活性直接相關。因此，A/A基因型可能具有激活代謝誘導劑和致癌物質作用。

本研究Meta分析存在局限性。第一，Meta的結果分析存在潛在的異質性。雖然試圖通過全面的檢索策略、嚴格的納入標準和嚴謹的數據提取及分析盡可能最小化異質性的影響，但異質性仍出現(xiàn)在幾乎所有研究間。異質性可因為對照組選擇、年齡分布、生存環(huán)境因素等的差異而產生。盡管大多數研究選擇健康人群作為對照組，但一些研究在肺癌患者的親屬或朋友中或在其他疾病的患者中選擇對照組，從而產生不可避免的異質性。第二，僅納入已發(fā)表的文獻，那些得到不明顯的陽性或陰性結果的研究沒有被發(fā)表導致發(fā)表偏倚的存在。第三，本研究結果均是未修正的，如果能夠得到個人數據，可以根據年齡、種族、家族史、環(huán)境因素和生活習慣等因素對結果進行修正，從而得到更加精確的分析結果。最后，即便觀察到種族差異，也可能是因為標本量少導致的統(tǒng)計效力不足所致。本篇Meta分析僅納入2篇亞裔人群的研究，因此所觀察到的種族差異也可能是樣本量少導致的偶然結果。因此，還需要進行采用標準化、科學方法，入組同質性肺癌患者和匹配的對照組的大樣本雙盲實驗進一步驗證。

綜上所述，本篇Meta分析表明IL-8-251T/A基因多態(tài)性在全部人群中與肺癌發(fā)生風險無相關性，但是在亞裔人群中A等位基因的存在與肺癌發(fā)生風險顯著相關。

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