陳小龍　唐榮德　華關(guān)民　陳敏　譚亮慶

[摘要] 目的 探討丙肝病毒核心抗原（HCV-cAg）與丙肝病毒抗體（HCV-Ab）聯(lián)合檢測(cè)對(duì)診斷丙肝病毒（HCV）感染的互補(bǔ)作用及HCV感染陽(yáng)性者與丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）的關(guān)系。方法 檢測(cè)手術(shù)前檢查組2061例患者和ALT>80 U/L組242例患者的HCV-cAg、 HCV-Ab和ALT等指標(biāo)，然后將檢測(cè)結(jié)果作出統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 手術(shù)前檢查組聯(lián)合檢測(cè)有2.7%的陽(yáng)性率，顯著高于單獨(dú)HCV-cAg和單獨(dú)HCV-Ab的1.6%（P<0.05）；ALT>80 U/L組聯(lián)合檢測(cè)有14.5%的陽(yáng)性率，顯著高于單獨(dú)HCV-cAg的7.0%（P<0.01）；手術(shù)前檢查組ALT均值和ALT>80U/L例數(shù)是2項(xiàng)均陽(yáng)性高于HCV-Ab陽(yáng)性、HCV-Ab陽(yáng)性高于HCV-cAg。結(jié)論 HCV-cAg和HCV-Ab 2項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)明顯優(yōu)于單項(xiàng)檢測(cè)，這對(duì)HCV感染的診斷能起到很好的互補(bǔ)作用，加上ALT等肝功能指標(biāo)的檢測(cè)，有利于HCV感染的正確診斷。

[關(guān)鍵詞] 丙肝病毒核心抗原；丙肝病毒抗體；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶；聯(lián)合檢測(cè)；互補(bǔ)作用

[中圖分類號(hào)] R4 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2014）03（a）-0001-03

丙型肝炎（丙肝）是一種主要經(jīng)血液傳播的傳染病，而丙肝病毒（HCV）是其主要的致病因素，HCV感染的實(shí)驗(yàn)室檢查是丙肝診斷的重要依據(jù)。近些年來(lái)的HCV檢測(cè)技術(shù)主要是丙肝病毒抗體（HCV-Ab）和丙肝病毒核酸（HCV-RNA）檢測(cè)，二者均存在一定的局限性。該院于2013年3月起正式開(kāi)展了丙肝病毒核心抗原（HCV-cAg）檢測(cè)，這與HCV-Ab聯(lián)合檢測(cè)能起到一定的互補(bǔ)作用，可望提高HCV感染的陽(yáng)性檢出率。但2項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)到底能起到多少互補(bǔ)作用以及HCV陽(yáng)性者與丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）的關(guān)系如何還值得探討，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

該研究的研究對(duì)象為2013年3月1日—5月31日這一時(shí)段來(lái)我院作疾病診治的并來(lái)源于2個(gè)方面的患者，一是手術(shù)前（含輸血前）作例行檢查的患者，共2 061例；二是ALT>80 U/L的肝炎和疑似肝炎患者，共242例。根據(jù)研究對(duì)象的2個(gè)來(lái)源，本文將其分為兩組，即手術(shù)前檢查組和ALT>80 U/L組。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 基本操作 將患者空腹抽血的血液標(biāo)本離心分離出血清后，手術(shù)前檢查組的標(biāo)本均于抽血當(dāng)天完成HCV-cAg和HCV-Ab，（簡(jiǎn)稱丙肝2項(xiàng)）及ALT等的檢測(cè)；ALT>80 U/L組如果醫(yī)生已開(kāi)出丙肝2項(xiàng)檢查，則于抽血當(dāng)天完成丙肝2項(xiàng)和ALT的檢測(cè)；如果醫(yī)生沒(méi)有開(kāi)出丙肝2項(xiàng)檢查，除ALT于抽血當(dāng)天完成檢測(cè)外，將患者血清置于-20 ℃冰箱保存，每2周集中檢測(cè)其丙肝2項(xiàng)。在正式開(kāi)展HCV-cAg檢測(cè)前，我們按照試劑盒說(shuō)明書作了2周的預(yù)備實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)格掌握其操作方法。

1.2.2 HCV-cAg檢測(cè) 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法（ELISA）定性檢測(cè)患者血清中的HCV-cAg，試劑盒由湖南海潤(rùn)制藥有限公司生產(chǎn)（產(chǎn)品批號(hào)：20121201），檢測(cè)患者標(biāo)本時(shí)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書所介紹的方法操作。

1.2.3 HCV-Ab檢測(cè) 采用兩步間接酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）定性檢測(cè)患者血清中的HCV-Ab，試劑盒由珠海麗珠試劑有限公司生產(chǎn)（產(chǎn)品批號(hào)：2013010112），檢測(cè)患者標(biāo)本時(shí)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書所介紹的方法操作。

1.2.4 ALT檢測(cè) 采用速率法由Roche全自動(dòng)生化儀完成，我院目前的ALT正常參考區(qū)間為0～40 U/L，故ALT>40 U/L示為升高，ALT>80 U/L示為升高1倍。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（n）和百分率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x-±s）表示，采用t檢驗(yàn)；所有數(shù)據(jù)由該院計(jì)算機(jī)醫(yī)用數(shù)理統(tǒng)計(jì)系統(tǒng)計(jì)算結(jié)果。另外，該研究HCV檢測(cè)陽(yáng)性的概念是丙肝2項(xiàng)檢測(cè)中任何一項(xiàng)出現(xiàn)陽(yáng)性或2項(xiàng)均出現(xiàn)陽(yáng)性被看成是HCV陽(yáng)性，故研究中聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性在手術(shù)前檢查組系已減去2項(xiàng)指標(biāo)均陽(yáng)性的10例，在ALT>80 U/L組系已減去2項(xiàng)指標(biāo)均陽(yáng)性的8例；在HCV陽(yáng)性且ALT升高者中有個(gè)別患者乙型肝炎表面抗原（HBsAg）陽(yáng)性，這是由于重疊感染所致，因病例極少，故該研究忽略不計(jì)。

2 結(jié)果

2.1 兩組丙肝2項(xiàng)的檢測(cè)結(jié)果

通過(guò)組內(nèi)比較，在手術(shù)前檢查組中聯(lián)合檢測(cè)有2.7%的陽(yáng)性率，顯著高于單獨(dú)HCV-cAg和單獨(dú)HCV-Ab的1.6%（P<0.05）；在ALT>80 U/L組中聯(lián)合檢測(cè)有14.5%的陽(yáng)性率，高于單獨(dú)HCV-Ab的10.7%，顯著高于單獨(dú)HCV-cAg的7.0%（P<0.01）。組間比較揭示ALT>80 U/L組各項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性檢出率均顯著高于手術(shù)前檢查組，兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.01），見(jiàn)表1。

2.2 兩組HCV檢測(cè)陽(yáng)性者ALT的變化情況

ALT>80 U/L組的ALT均值和ALT>80 U/L例數(shù)在組內(nèi)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），HCV-cAg和HCV-Ab單項(xiàng)陽(yáng)性與手術(shù)前檢查組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。而手術(shù)前檢查組ALT均值和ALT>80 U/L例數(shù)是2項(xiàng)均陽(yáng)性高于HCV-Ab陽(yáng)性、HCV-Ab陽(yáng)性高于HCV-cAg，ALT均值在HCV-cAg與HCV-Ab和2項(xiàng)均陽(yáng)性比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），ALT>80 U/L例數(shù)僅在HCV-cAg與2項(xiàng)均陽(yáng)性比較中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2、表3。

3 討論

HCV感染通常是持續(xù)性的終生感染，它可以通過(guò)輸血、靜脈吸毒、密切接觸等途徑傳播。目前特別在縣以下的基層醫(yī)院對(duì)于HCV感染的臨床診斷仍以ELISA方法檢測(cè)HCV-Ab為主，因基層醫(yī)院暫時(shí)還沒(méi)有條件采用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)來(lái)檢測(cè)HCV-RNA。但由于廠家之間使用丙肝基因重組抗原質(zhì)量及各抗原片段包被比例的不同，各廠家試劑間的敏感性和特異性存在著一定差異，從而導(dǎo)致HCV-Ab檢測(cè)結(jié)果不一致。有人[1]認(rèn)為，因感染丙肝后HCV-Ab出現(xiàn)較慢，一般情況下抗體的血清學(xué)轉(zhuǎn)換可以延遲到暴露后幾個(gè)月才發(fā)生，此時(shí)可出現(xiàn)HCV-Ab的假陰性。另外，在HCV-Ab的ELISA試劑盒中，由于酶標(biāo)抗體是廣譜抗人IgG抗體，容易產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。HCV-cAg是在丙肝感染者體內(nèi)出現(xiàn)的早期感染標(biāo)志，與HCV-RNA符合性較高[2]，故近些年來(lái)有些醫(yī)院開(kāi)展了HCV-cAg的檢測(cè)，也出現(xiàn)了相關(guān)的報(bào)道。如許方[2]等通過(guò)同時(shí)檢測(cè)HCV-cAg和HCV-Ab 2項(xiàng)指標(biāo)，且對(duì)HCV-cAg陽(yáng)性但HCV-Ab陰性的標(biāo)本進(jìn)一步做HCV-RNA定量檢測(cè)，結(jié)果為90例丙肝抗體陽(yáng)性組中，34例為HCV-cAg陽(yáng)性，陽(yáng)性率為37.78%；391例丙肝抗體陰性而ALT升高組中，2例為HCV-cAg陽(yáng)性，陽(yáng)性率為0.51%。史璇[3]在探討HCV-cAg對(duì)HCV感染診斷和治療中的作用中，發(fā)現(xiàn)90例HCV-Ab陽(yáng)性者HCV-cAg檢測(cè)陽(yáng)性率為 42.2%。朱鴻[4]等對(duì)173例HCV感染患者和82例健康對(duì)照者作了HCV-Ab、總HCV-cAg和HCV-RNA檢測(cè)，結(jié)果是HCV感染者HCV-Ab均為陽(yáng)性，而HCV-RNA陽(yáng)性率為49.7%，HCV-cAg陽(yáng)性率為36. 4%。郭華[5]等回顧性分析本院輸血和手術(shù)前檢測(cè)患者HCV的結(jié)果， HCV-Ab為2.0%、HCV-cAg為0.6%，HCVcAg陽(yáng)性率低于HCV-Ab，認(rèn)為HCV-Ab和HCVcAg檢測(cè)均具有一定的特異性。endprint

為了了解HCV-cAg與HCV-Ab聯(lián)合檢測(cè)對(duì)診斷HCV感染的互補(bǔ)作用及HCV陽(yáng)性者與ALT的關(guān)系，從研究結(jié)果可以看出，在手術(shù)前檢查組中聯(lián)合檢測(cè)丙肝2項(xiàng)有2.7%的陽(yáng)性率，顯著高于單獨(dú)HCV-cAg和單獨(dú)HCV-Ab的1.6%（P<0.05）；在ALT>80 U/L組中聯(lián)合檢測(cè)有14.5%的陽(yáng)性率，高于單獨(dú)HCV-Ab的10.7%，顯著高于單獨(dú)HCV-cAg的7.0%（P<0.01）。結(jié)果說(shuō)明丙肝2項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)明顯優(yōu)于單項(xiàng)檢測(cè)，這對(duì)HCV感染的診斷起到了很好的互補(bǔ)作用，大大提高了陽(yáng)性檢出率。由于該研究特地選擇ALT>80U/L的肝炎和疑似肝炎病例來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，故組間比較揭示ALT>80 U/L組各項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性檢出率均顯著高于手術(shù)前檢查組（P<0.01），ALT>80 U/L組的ALT均值和ALT>80 U/L例數(shù)在組內(nèi)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而與手術(shù)前檢查組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。值得注意的是，手術(shù)前檢查組ALT均值和ALT>80 U/L例數(shù)是2項(xiàng)均陽(yáng)性高于HCV-Ab陽(yáng)性、HCV-Ab陽(yáng)性高于HCV-cAg，結(jié)果提示ALT的變化與HCV的感染過(guò)程有關(guān)。由于ALT是反映肝功能是否正常的最靈敏的指標(biāo)，它在丙肝中多呈輕度或中度升高。HCV-cAg是HCV感染者體內(nèi)的早期標(biāo)志物，在HCV感染早期，患者雖然出現(xiàn)HCV-cAg陽(yáng)性，但許多患者肝臟還未受損，故肝功能異常者較少；HCV-Ab的出現(xiàn)是在HCV感染后的6～12周[6]，大部分病毒攜帶者已發(fā)展為丙肝導(dǎo)致肝臟受損，但有些患者已經(jīng)過(guò)治療使得ALT降低，故僅一部分HCV-Ab陽(yáng)性者肝功能異常；而HCV-cAg與HCV-Ab2項(xiàng)指標(biāo)均陽(yáng)性的病例，說(shuō)明患者正在丙肝患病之中且還未得到治療，肝臟正在受損，故大部分患者肝功能異常。

由于HCV感染的早期存在“窗口期”[7]，在這一階段檢測(cè)不到HCV-Ab，因此開(kāi)展HCV-cAg檢測(cè)有利于丙肝感染患者的早期發(fā)現(xiàn)，可以在一定程度上彌補(bǔ)HCV-Ab檢測(cè)的不足；且2項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)明顯優(yōu)于單項(xiàng)檢測(cè)，這對(duì)HCV感染的診斷起到了很好的互補(bǔ)作用，加上ALT等肝功能指標(biāo)的檢測(cè)，有利于HCV感染的正確診斷。

[參考文獻(xiàn)]

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[2] 許方，李曉蘭，祝琳.丙肝病毒核心抗原檢測(cè)對(duì)于丙型肝炎診斷的價(jià)值[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2010，14（5）：713-715.

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[7] Legrer TJ， Riggert J， Simson G， et al. Testing of individual blood donations for HCV RNA reduces the residual risk of transfusion-transmitted HCV infection [J]. Transfusion， 2000， 40：192-197.

（收稿日期：2013-11-28）endprint

為了了解HCV-cAg與HCV-Ab聯(lián)合檢測(cè)對(duì)診斷HCV感染的互補(bǔ)作用及HCV陽(yáng)性者與ALT的關(guān)系，從研究結(jié)果可以看出，在手術(shù)前檢查組中聯(lián)合檢測(cè)丙肝2項(xiàng)有2.7%的陽(yáng)性率，顯著高于單獨(dú)HCV-cAg和單獨(dú)HCV-Ab的1.6%（P<0.05）；在ALT>80 U/L組中聯(lián)合檢測(cè)有14.5%的陽(yáng)性率，高于單獨(dú)HCV-Ab的10.7%，顯著高于單獨(dú)HCV-cAg的7.0%（P<0.01）。結(jié)果說(shuō)明丙肝2項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)明顯優(yōu)于單項(xiàng)檢測(cè)，這對(duì)HCV感染的診斷起到了很好的互補(bǔ)作用，大大提高了陽(yáng)性檢出率。由于該研究特地選擇ALT>80U/L的肝炎和疑似肝炎病例來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，故組間比較揭示ALT>80 U/L組各項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性檢出率均顯著高于手術(shù)前檢查組（P<0.01），ALT>80 U/L組的ALT均值和ALT>80 U/L例數(shù)在組內(nèi)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而與手術(shù)前檢查組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。值得注意的是，手術(shù)前檢查組ALT均值和ALT>80 U/L例數(shù)是2項(xiàng)均陽(yáng)性高于HCV-Ab陽(yáng)性、HCV-Ab陽(yáng)性高于HCV-cAg，結(jié)果提示ALT的變化與HCV的感染過(guò)程有關(guān)。由于ALT是反映肝功能是否正常的最靈敏的指標(biāo)，它在丙肝中多呈輕度或中度升高。HCV-cAg是HCV感染者體內(nèi)的早期標(biāo)志物，在HCV感染早期，患者雖然出現(xiàn)HCV-cAg陽(yáng)性，但許多患者肝臟還未受損，故肝功能異常者較少；HCV-Ab的出現(xiàn)是在HCV感染后的6～12周[6]，大部分病毒攜帶者已發(fā)展為丙肝導(dǎo)致肝臟受損，但有些患者已經(jīng)過(guò)治療使得ALT降低，故僅一部分HCV-Ab陽(yáng)性者肝功能異常；而HCV-cAg與HCV-Ab2項(xiàng)指標(biāo)均陽(yáng)性的病例，說(shuō)明患者正在丙肝患病之中且還未得到治療，肝臟正在受損，故大部分患者肝功能異常。

由于HCV感染的早期存在“窗口期”[7]，在這一階段檢測(cè)不到HCV-Ab，因此開(kāi)展HCV-cAg檢測(cè)有利于丙肝感染患者的早期發(fā)現(xiàn)，可以在一定程度上彌補(bǔ)HCV-Ab檢測(cè)的不足；且2項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)明顯優(yōu)于單項(xiàng)檢測(cè)，這對(duì)HCV感染的診斷起到了很好的互補(bǔ)作用，加上ALT等肝功能指標(biāo)的檢測(cè)，有利于HCV感染的正確診斷。

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為了了解HCV-cAg與HCV-Ab聯(lián)合檢測(cè)對(duì)診斷HCV感染的互補(bǔ)作用及HCV陽(yáng)性者與ALT的關(guān)系，從研究結(jié)果可以看出，在手術(shù)前檢查組中聯(lián)合檢測(cè)丙肝2項(xiàng)有2.7%的陽(yáng)性率，顯著高于單獨(dú)HCV-cAg和單獨(dú)HCV-Ab的1.6%（P<0.05）；在ALT>80 U/L組中聯(lián)合檢測(cè)有14.5%的陽(yáng)性率，高于單獨(dú)HCV-Ab的10.7%，顯著高于單獨(dú)HCV-cAg的7.0%（P<0.01）。結(jié)果說(shuō)明丙肝2項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)明顯優(yōu)于單項(xiàng)檢測(cè)，這對(duì)HCV感染的診斷起到了很好的互補(bǔ)作用，大大提高了陽(yáng)性檢出率。由于該研究特地選擇ALT>80U/L的肝炎和疑似肝炎病例來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，故組間比較揭示ALT>80 U/L組各項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性檢出率均顯著高于手術(shù)前檢查組（P<0.01），ALT>80 U/L組的ALT均值和ALT>80 U/L例數(shù)在組內(nèi)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而與手術(shù)前檢查組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。值得注意的是，手術(shù)前檢查組ALT均值和ALT>80 U/L例數(shù)是2項(xiàng)均陽(yáng)性高于HCV-Ab陽(yáng)性、HCV-Ab陽(yáng)性高于HCV-cAg，結(jié)果提示ALT的變化與HCV的感染過(guò)程有關(guān)。由于ALT是反映肝功能是否正常的最靈敏的指標(biāo)，它在丙肝中多呈輕度或中度升高。HCV-cAg是HCV感染者體內(nèi)的早期標(biāo)志物，在HCV感染早期，患者雖然出現(xiàn)HCV-cAg陽(yáng)性，但許多患者肝臟還未受損，故肝功能異常者較少；HCV-Ab的出現(xiàn)是在HCV感染后的6～12周[6]，大部分病毒攜帶者已發(fā)展為丙肝導(dǎo)致肝臟受損，但有些患者已經(jīng)過(guò)治療使得ALT降低，故僅一部分HCV-Ab陽(yáng)性者肝功能異常；而HCV-cAg與HCV-Ab2項(xiàng)指標(biāo)均陽(yáng)性的病例，說(shuō)明患者正在丙肝患病之中且還未得到治療，肝臟正在受損，故大部分患者肝功能異常。

由于HCV感染的早期存在“窗口期”[7]，在這一階段檢測(cè)不到HCV-Ab，因此開(kāi)展HCV-cAg檢測(cè)有利于丙肝感染患者的早期發(fā)現(xiàn)，可以在一定程度上彌補(bǔ)HCV-Ab檢測(cè)的不足；且2項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)明顯優(yōu)于單項(xiàng)檢測(cè)，這對(duì)HCV感染的診斷起到了很好的互補(bǔ)作用，加上ALT等肝功能指標(biāo)的檢測(cè)，有利于HCV感染的正確診斷。

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