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        養(yǎng)殖場利用ELISA方法建立自家IB抗體基準線的意義

        2014-04-29 00:44:03李玉燕等
        家禽科學 2014年10期
        關鍵詞:野毒基準線滴度

        李玉燕等

        雞傳染性支氣管炎(IB)是由傳染性支氣管炎病毒(IBV)引起雞的一種急性、高度接觸性傳染病,主要侵害雞的呼吸、泌尿生殖和消化系統(tǒng)等。IBV對不同日齡的雞產(chǎn)生不同程度的危害:雛雞感染后,開產(chǎn)時變成假母雞,引起生殖系統(tǒng)受損,如輸卵管永久性退化,輸卵管短小,管腔狹窄,閉塞,導致生產(chǎn)力衰竭,甚至發(fā)生死亡;產(chǎn)蛋雞感染后產(chǎn)蛋下降,蛋品質(zhì)降低,飼料報酬降低,死淘率增加。該病致使國內(nèi)養(yǎng)雞業(yè)的直接經(jīng)濟損失達數(shù)億元人民幣。目前,傳染性支氣管炎呈世界分布,是危害世界養(yǎng)禽業(yè)的重大傳染病之一。

        目前IB血清學診斷方法有病毒中和試驗(VN)、血凝試驗(HA)和血凝抑制試驗(HI)、瓊脂擴散試驗(AGP)、干擾試驗、免疫熒光技術(IFA)、ELISA技術、膠體金檢測方法(DIGFA)和對流免疫電泳等。其中ELISA方法靈敏性高、特異性強,是檢測群特異性抗體的常用方法,適于做傳染性支氣管炎的血清學鑒定和免疫狀態(tài)的評估。酶聯(lián)免疫系統(tǒng)被證明在IBV抗體水平的定量檢測中是有效的,適用于雞群免疫狀態(tài)的監(jiān)測。

        ELISA技術需要檢測目前IB抗體滴度值是否在正常范圍內(nèi),證實沒有野毒感染。這就需要有大量的數(shù)據(jù)積累作參考,以便對新的檢測數(shù)據(jù)和以前檢測儲存的數(shù)據(jù)做比較,必須有大量的數(shù)據(jù)積累做參考。常規(guī)的血清學群體監(jiān)測需要各養(yǎng)殖企業(yè)建立自己的基準線,也就是所謂的“baseline values”。我們必須認識到“baseline values”是雞場特異性的,它受飼養(yǎng)品種、日齡、免疫程序、疫苗類型及其他的環(huán)境因素的影響。但是一旦建立了屬于自己的基線,就會快速的監(jiān)測免疫程序是否合理,整個雞群有無潛在的安全隱患。如果檢測的滴度值遠高于正常的抗體滴度,則存在野毒感染的可能性;如果檢測的滴度值低于預期的疫苗免疫應答滴度,就表明免疫程序不合理或者疫苗的質(zhì)量有問題。

        如何建立各養(yǎng)殖企業(yè)自己的基準線呢?以BioChek公司的IB檢測試劑盒為例,不同類型疫苗產(chǎn)生抗體的平均抗體效價是在一定范圍內(nèi)的,低于這個范圍存在免疫的失敗可能,需要與疫苗生產(chǎn)商或試劑生產(chǎn)商討論;如果高于這個范圍則存在野毒感染的可能性,如表1所示。

        以上僅僅是舉例說明不同類型的疫苗對抗體基準線的影響,在現(xiàn)場養(yǎng)殖工作中,需要綜合考慮各種因素,建立各養(yǎng)殖企業(yè)自己的基準線。首先要與“標準的陰性對照做比較”,即根據(jù)各養(yǎng)殖企業(yè)自己的免疫程序,統(tǒng)計幾批健康雞群不同時期采集的抗體滴度,合理評估制定出正常的抗體滴度范圍。表2為山東省某公司種雞不同周齡正常的抗體滴度及可疑野毒感染范圍。

        根據(jù)以上統(tǒng)計結果,若IB ELISA抗體滴度異常升高3000~4000,則存在野毒感染的可能。

        通過建立各養(yǎng)殖企業(yè)自己的基準線,能夠快速地監(jiān)測傳染性支氣管炎疫情,及時采取防控措施。根據(jù)疫情統(tǒng)計,2周齡內(nèi)及開產(chǎn)前感染野毒的幾率較高,這兩個時間段內(nèi)感染對雞群的危害最嚴重,由此造成的經(jīng)濟損失也最大。所以針對傳支的發(fā)病周齡,各養(yǎng)殖企業(yè)必須落實好生物安全控制措施,制定出合理的免疫程序,按照既定計劃進行采血檢測抗體水平,使抗體水平符合公司的抗體基準線范圍,達到免疫保護作用。筆者根據(jù)現(xiàn)場管理經(jīng)驗,建議采取以下防控措施:

        空舍期落實好各種消毒措施,養(yǎng)殖場需要一個真正的隔離時間,這是最基礎有效的工作,也是防止IB野毒的入侵前提。

        雛雞的早期感染是引發(fā)腎臟病變和輸卵管發(fā)育抑制造成假母雞的重要原因,所以防止早期感染是防制IB的重要措施。建議將首免放在1日齡,可使用毒力較弱的H120或Ma5,最好的免疫方式是滴鼻或點眼。因噴霧免疫操作簡便,父母代的批量較大,目前父母代養(yǎng)殖場采取群體免疫方式較多。

        IB血清型多,臨床癥狀復雜,定性困難,免疫效果不理想。在尚不能確定本地主要流行株的地區(qū),建議多種血清型的疫苗交叉免疫程序,利用相互之間抗原決定簇的交叉保護來預防變異株。

        不要忽視消化道的免疫,因為該部位局部免疫力差使越來越多的變異株從腸道分離出來,毒力強、死亡率高。

        弱毒苗免疫之后要用滅活苗加強免疫,使機體產(chǎn)生較高的循環(huán)抗體保護腎臟和卵巢。

        蛋雞和種雞開產(chǎn)后也要重視IB的免疫,常采用Clone30-Ma5噴霧免疫。

        免疫前后應避免一切應激反應,供應充足飲水,并在飲水中添加電解多維素或腎腫解毒藥。

        避免同場多批次雞群的問題,若確實難以避免,盡量將免疫程序調(diào)整為同步進行。

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