戴愛玲 ， 林巧芹 ， 張 敏 ， 李曉華 ， 黃思瓊 ， 王德永 ， 楊小燕

(1.龍巖學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院 ， 福建 龍巖 364012 ； 2.福建省生豬疫病防控工程技術(shù)研究中心 ， 福建 龍巖 364012)

福建省龍巖市是生豬出欄和豬肉產(chǎn)品的重要基地[1]，生豬養(yǎng)殖業(yè)已成為當(dāng)?shù)刂饕?jīng)濟支柱之一，而生豬疫病是制約生豬產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的主要問題，嚴重影響生豬產(chǎn)業(yè)產(chǎn)值收入。豬偽狂犬病是生豬主要疫病之一，我國于1948年發(fā)現(xiàn)首個貓偽狂犬病病例，1987年首次分離到偽狂犬病病毒，之后偽狂犬病在我國長期流行[2]。但隨著疫苗的普遍應(yīng)用，該病逐漸得到控制，在21世紀的第一個10年里，規(guī)?；i場很少檢測到豬偽狂犬病野毒抗體。然而自2011年底起，豬偽狂犬病再度席卷而來[3]，先在華北、華中，再到華東、華南，從北到南，一路蔓延，再度呈現(xiàn)大規(guī)模暴發(fā)。因此，了解2011年后龍巖市規(guī)?；i養(yǎng)殖場中偽狂犬病野毒感染情況對偽狂犬病防控具有重要意義，故本試驗檢測 2011-2015年龍巖6個區(qū)縣1 018個豬場共21 840份商品豬血清樣品的PR-gE抗體，對龍巖地區(qū)商品豬偽狂犬病野毒流行情況進行調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 血清樣品 2011— 2015年間，于龍巖市所轄的新羅區(qū)、永定區(qū)、漳平市、上杭縣、長汀縣、武平縣6個區(qū)縣的1 018個規(guī)模化生豬養(yǎng)殖場內(nèi)分批次采取商品豬血清，共21 840份。

1.2 試劑 PRV-gE酶聯(lián)免疫試劑盒(IDEXX)，購自北京愛德士元亨生物科技有限公司。

1.3 gE抗體檢測 按IDEXX PRV-gE酶聯(lián)免疫試劑盒使用說明書進行操作及結(jié)果判定。

1.4 統(tǒng)計分析 使用SPSS 21.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 不同區(qū)縣豬偽狂犬病野毒感染情況 在2011-2015年間，龍巖地區(qū)豬偽狂犬病野毒的平均血清陽性率為19.9%，野毒陽性豬場占檢測豬場的55.4%。新羅區(qū)、永定區(qū)、漳平市、上杭縣、長汀縣、武平縣6個區(qū)縣在5年檢測總的血清陽性率分別為26.2%、23.1%、17.9%、5.0%、9.1%、6.1%，野毒陽性豬場占檢測豬場的比率分別為64.8%、58%、57.1%、30.0%、34.5%、36.9%。

各區(qū)縣歷年來豬場偽狂犬病野毒感染情況見圖1。新羅區(qū)歷年豬偽狂犬病野毒陽性的豬場所占比率均在50%以上，2014年、2015年顯著高于往年(P<0.05)；永定區(qū)、長汀縣2013年偽狂犬病野毒陽性的豬場比率顯著低于往年(P<0.05)；漳平市偽狂犬病野毒陽性豬場所占比率在2011年、2012年相對較低，而后顯著上升(P<0.05)；武平縣2011年到2013年偽狂犬病野毒陽性豬場所占比率總體比較平穩(wěn)，2014年、2015年顯著上升(P<0.05)。

圖1 龍巖市不同區(qū)縣5年間豬偽狂犬病野毒陽性豬場所占比率

各區(qū)縣規(guī)?；i養(yǎng)殖場歷年來豬偽狂犬病野毒血清陽性率情況見圖2。新羅區(qū)、漳平市2014年開始偽狂犬病野毒血清陽性率顯著高于往年(P<0.05)；永定區(qū)2015年開始偽狂犬病野毒血清陽性率顯著高于往年(P<0.05)；長汀縣2011-2015年豬偽狂犬病野毒血清陽性率逐年下降(P<0.05)；上杭縣、武平縣2011-2015年豬偽狂犬病野毒血清陽性率相對穩(wěn)定。

圖2 龍巖市不同區(qū)縣5年間豬偽狂犬病野毒抗體血清陽性率

2.2 不同年份豬偽狂犬病野毒感染情況 2011年、2012年、2013年、2014年、2015年龍巖整個地區(qū)偽狂犬病野毒陽性豬場占檢測豬場的比率分別為55.8%、47.8%、39.4%、62.9%、68.1%；血清陽性率分別為17.1%、12.5%、12.9%、23.3%、28.4%。2012年、2013年龍巖地區(qū)偽狂犬病野毒陽性的豬場、血清陽性率均低于其他年份；2014年、2015年持續(xù)上升。

龍巖市2011-2015年間豬偽狂犬病野毒感染陽性豬場情況如圖3所示。2011年，新羅區(qū)、永定區(qū)偽狂犬病野毒陽性豬場比率最高，武平縣最低。2012年，長汀縣偽狂犬病野毒陽性豬場比率最高，漳平市最低。2013年，漳平市偽狂犬病野毒陽性豬場比率最高，長汀縣最低。2014年，新羅區(qū)偽狂犬病野毒陽性豬場比率再度升高至6區(qū)縣最高，長汀縣偽狂犬病野毒陽性豬場比率仍然是6區(qū)縣最低。2015年，新羅區(qū)、永定區(qū)偽狂犬病野毒陽性豬場比率再次躍居第一，上杭縣偽狂犬病野毒陽性豬場比率最低。

圖3 20112015年龍巖市各區(qū)縣偽狂犬病野毒陽性豬場所占比率

龍巖市2011-2015年間豬偽狂犬病野毒感染血清陽性率如圖4所示。2011年，新羅區(qū)、長汀縣偽狂犬病野毒血清陽性率最高，武平縣最低。2012年，新羅區(qū)、長汀縣偽狂犬病野毒血清陽性率有所下降，但仍是最高，武平縣最低。2013年，新羅區(qū)、長汀縣偽狂犬病野毒血清陽性率仍維持較高水平，但永定和漳平偽狂犬病野毒血清陽性率上升至10%以上，上杭縣最低。2014年，新羅區(qū)偽狂犬病野毒血清陽性率急劇上升至36.6%，永定區(qū)、漳平縣偽狂犬病野毒血清陽性率維持在22%，長汀縣偽狂犬病野毒血清陽性率降低至6區(qū)縣最低。2015年，新羅區(qū)、永定區(qū)偽狂犬病野毒血清陽性率上升至40%以上，長汀縣、上杭縣、武平縣偽狂犬病野毒血清陽性率較低。

圖4 20112015年龍巖市各區(qū)縣偽狂犬病野毒血清陽性率

2011-2015年間，新羅區(qū)一直處于偽狂犬病野毒感染的高峰期；2012年，長汀縣偽狂犬病野毒流行，豬場紛紛轉(zhuǎn)陽，偽狂犬病野毒陽性豬場所占比率達62.5%，2013年偽狂犬病野毒流行至漳平，陽性豬場所占比率達59.3%，且此次流行一直持續(xù)到2015年，陽性豬場比率上升至70%以上。2015年，永定區(qū)出現(xiàn)偽狂犬病野毒暴發(fā)趨勢，陽性豬場比率高達80%以上。

3 討論

2011-2015年龍巖地區(qū)1 018個規(guī)?；i養(yǎng)殖場共送檢商品豬血清21 840份。5年來，龍巖地區(qū)偽狂犬病野毒陽性的豬場占檢測豬場的55.4%，血清陽性率平均值為19.9%，說明目前龍巖地區(qū)半數(shù)以上豬場存在偽狂犬病野毒感染，且近1/5豬只攜帶偽狂犬病毒。5年來，龍巖市6個區(qū)縣偽狂犬病野毒陽性豬場比率分別為64.8%、58%、57.1%、30.0%、34.5%、36.9%。新羅區(qū)、永定區(qū)、漳平市較為嚴重，已有接近2/3的豬場存在偽狂犬病野毒感染，而長汀縣、上杭縣、武平縣也有1/3以上的豬場偽狂犬病野毒轉(zhuǎn)陽。龍巖市6個區(qū)縣偽狂犬病野毒血清陽性率的5年平均值分別為26.2%、23.1%、17.9%、5.0%、9.1%、6.1%，新羅區(qū)、永定區(qū)、漳平市血清陽性率明顯高于其他3個縣區(qū)，近1/5的豬只攜帶偽狂犬病野毒，與豬場間距小，飼養(yǎng)密度大，沒有規(guī)范好小型豬場偽狂犬病防控等因素有關(guān)。新羅區(qū)、永定區(qū)、漳平市3個區(qū)縣比較平坦，靠近城鎮(zhèn)，人群密度大，便于偽狂犬病野毒的空間傳播；另外，飼養(yǎng)密度大、環(huán)境消毒不徹底、豬只免疫力低下等因素也促成偽狂犬病野毒傳播。根據(jù)該調(diào)查結(jié)果，豬場應(yīng)加強監(jiān)測系統(tǒng)建設(shè)，調(diào)整免疫程序，淘汰陽性種豬，盡可能減少區(qū)縣偽狂犬病的傳播。

2011年、2012年、2013年、2014年、2015年龍巖整個地區(qū)的偽狂犬病野毒陽性豬場比率分別為55.8%、47.8%、39.4%、62.9%、68.1%；血清陽性率分別為17.1%、12.5%、12.9%、23.3%、28.4%。2012-2013年龍巖地區(qū)偽狂犬病野毒陽性豬場比率、血清陽性率均低于其他年份，2014-2015年龍巖地區(qū)野毒陽性豬場比率、血清陽性率持續(xù)上升，與2014年豬價低迷，豬只流通混亂，缺乏嚴把引種關(guān)，區(qū)域偽狂犬病的防控意識薄弱有關(guān)。另一方面與偽狂犬病病毒變異，現(xiàn)有偽狂犬病疫苗免疫保護力不足也有一定關(guān)系。綜合來看，新羅區(qū)一直處于偽狂犬病野毒感染的高峰期；2012年，偽狂犬病野毒流行至長汀縣，豬場紛紛轉(zhuǎn)陽，偽狂犬病野毒陽性豬場比率達62.5%，2013年，偽狂犬病野毒流行至漳平，陽性豬場比率達59.3%，且此次流行一直持續(xù)到2015年，陽性豬場比率上升至70%以上。2015年，永定區(qū)出現(xiàn)偽狂犬病野毒呈暴發(fā)趨勢，陽性豬場比率高達80%以上。2011-2015年間，豬偽狂犬病野毒在龍巖市各區(qū)縣間流行。

豬偽狂犬病野毒在龍巖市流行主要由以下原因造成:(1)養(yǎng)殖場對疫苗免疫不重視，豬群免疫程序不完善，導(dǎo)致肥育豬和后備豬的母源抗體很低，很容易感染偽狂犬病野毒[4]；(2)養(yǎng)殖場消毒不到位，場區(qū)內(nèi)病原復(fù)雜，豬群存在混合感染，豬只免疫力低下[5]；(3)偽狂犬病野毒變異，現(xiàn)有偽狂犬病疫苗免疫效果不佳，保護力不足。范克偉等報道，豬源偽狂犬病毒龍巖分離株gE氨基酸序列第48位和第496位各有1個天冬氨酸插入[6]，TK氨基酸序列在16位和129位發(fā)生了獨特性的氨基酸突變[7]，使其與2012年以來國內(nèi)不同省份分離的變異株親緣關(guān)系較近，而與經(jīng)典株親緣關(guān)系相對較遠，證明了龍巖地區(qū)存在偽狂犬病野毒變異；(4)抗體監(jiān)測不到位，引種前、免疫后沒有進行相應(yīng)gE、gB抗體監(jiān)測，使偽狂犬病野毒輕易進入陰性場。

[1] 李應(yīng)豐. 龍巖市畜牧業(yè)轉(zhuǎn)型升級的措施[J]. 福建畜牧獸醫(yī), 2015, 37(6): 44-46.

[2] 葉超, 趙款, 郭金潮, 等. 豬偽狂犬病病毒 HeN1 株全基因組測序及感染和毒力相關(guān)基因的變異特征分析[J]. 中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報, 2015, 37(8): 581-584.

[3] 劉吉山, 李峰, 姚春陽, 等. 豬偽狂犬病的流行特點與防控誤區(qū)[J]. 北方牧業(yè), 2015 (15): 18-19.

[4] 陳葉, 付新亮, 粟碩, 等. 豬偽狂犬的防控策略和凈化[J]. 廣東飼料, 2014 (6): 46-48.

[5] 宋冰. 山西省介休市豬偽狂犬病防控技術(shù)研究[D]. 太谷:山西農(nóng)業(yè)大學(xué), 2015.

[6] 范克偉, 戴愛玲, 李曉華, 等. 豬源偽狂犬病病毒福建龍巖分離株的鑒定及其TK基因和gE基因的分子特征[J]. 中國獸醫(yī)科學(xué), 2015, 45(10): 1 021-1 030.

[7] 范克偉, 戴愛玲, 劉建奎, 等. 閩西地區(qū)豬偽狂犬病毒變異株TK基因新變異序列鑒定[J]. 中國獸醫(yī)學(xué)報, 2015, 35(9): 1 415-1 421.