牛曉蕊 許雯 邸驛淇
【摘 要】本文對國標(biāo)GB 11893-1989中過硫酸鉀消解、鉬酸銨分光光度法測定水中總磷的方法進行實踐和研究。并對主要影響因素如水樣保存、消解方法、濁度干擾、顯色時間、顯色溫度等影響測定結(jié)果的條件進行探討,并將水樣前處理改用恒溫干燥箱消解法測定結(jié)果符合精密度和準(zhǔn)確度的要求,操作簡便安全,具有一定實用價值。
【關(guān)鍵詞】總磷;影響因素;探討;改進
1.實驗原理
在中性條件下用過硫酸鉀使試樣消解,將所含磷全部氧化為正磷酸鹽。在酸性介質(zhì)中,正磷酸鹽與鉬酸銨反應(yīng),在銻鹽存在下生成磷鉬雜多酸后,立即被抗壞血酸還原,生成藍(lán)色絡(luò)合物。[1]
2.儀器和試劑
2.1儀器
醫(yī)用手提式蒸汽消毒器或一般壓力鍋(1.1~1.4kg/cm2)。
恒溫干燥箱
50mL具塞比色管
分光光度計
2.2試劑
(1)過硫酸鉀溶液,50g/L 。
(2)抗壞血酸溶液,100g/L。
(3)鉬酸鹽溶液。
(4)磷標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:1.00mL此標(biāo)準(zhǔn)溶液含50.0μg磷。
(5)磷標(biāo)準(zhǔn)使用溶液:1.00mL此標(biāo)準(zhǔn)溶液含2.0μg磷。
3.影響總磷測定的因素及方法改進
3.1樣品采集及保存
水樣總磷不穩(wěn)定,采樣后應(yīng)立即分析。如果不能立即進行分析,需取500mL水樣后加入1mL濃硫酸調(diào)節(jié)水樣的pH值≤1,或不加任何試劑于冷處保存,并在24h內(nèi)盡快測定,當(dāng)采集含磷量較低的水樣時不要用塑料瓶采樣,因磷酸鹽易吸附在塑料瓶壁上,應(yīng)保存于玻璃瓶中。[1]
3.2玻璃器皿的清洗和處理
分析過程中所用的玻璃器皿都必須用稀硝酸或鉻酸洗液浸泡1h 以上,用自來水清洗后用蒸餾水淋洗數(shù)遍,不可用含磷洗滌劑刷洗。新的比色管需先進行與樣品完全相同的處理,測定其空白吸光度值。如果比色管空白吸光度值經(jīng)過多次消解測得較高的,必須剔除。
3.3 pH值的調(diào)節(jié)
由于樣品保存時pH≤1,因此測定前需將水樣調(diào)節(jié)至中性。移取25mL(濃度高時酌量少?。┑臉悠分?0mL的燒杯中,用移液管慢慢滴加50%氫氧化鈉溶液,至pH試紙測試溶液為中性,記住所滴加氫氧化鈉的用量。然后另取25mL的樣品至50mL比色管中,用移液管滴加等量的50%氫氧化鈉溶液。
3.4水樣的消解方法對比分析
國標(biāo)GB11893-1989水樣預(yù)處理采用蒸汽消毒器消解,此消解方法費時費力、安全性穩(wěn)定性較差、而且工作中經(jīng)常會出現(xiàn)試樣外溢等現(xiàn)象,且壓力容器需要專人經(jīng)培訓(xùn)合格后持證操作等繁瑣問題。恒溫干燥箱消解法,溫度更易于控制,操作簡便安全,其自然冷卻時間比蒸汽消毒器降溫降壓的工作時間耗時短,為此本文選用恒溫干燥箱消解法與蒸汽消毒器消解法對比試驗。
(1)操作過程。
采用環(huán)境保護部標(biāo)準(zhǔn)樣品研究所研制的總磷標(biāo)樣,按標(biāo)樣使用說明書的要求,稀釋至規(guī)定體積。分別用兩種消解方法對其進行測定。取6組×5支50mL具塞比色管,1號和2號每個比色管架各放3排×5支比色管,每排為同一濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的5次重復(fù)性試驗。1號試管架上樣品用于蒸汽滅菌器消解前處理,2號用于恒溫干燥箱消解前處理。分別取標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)待測液25mL于比色管中,加入4mL過硫酸鉀溶液,將具塞刻度管的蓋塞緊后,用一小塊布和線將玻璃塞扎緊。將1號比色管架置于高壓蒸汽消毒器中加熱,待壓力達(dá)1.1kg/cm2,相應(yīng)溫度為120℃時,保持30min后停止加熱。待壓力表讀數(shù)降至零后,取出放冷。然后用水稀釋試樣至50mL標(biāo)線。[1]
將2號比色管架放入恒溫干燥箱中,待溫度達(dá)到120℃時計時30min,消解結(jié)束后,關(guān)閉開關(guān),自然冷卻,然后用水稀釋試樣至50mL標(biāo)線。
分別向兩組比色管中加入1mL抗壞血酸溶液,混勻,30s后加2mL鉬酸鹽溶液充分混勻。室溫放置15min后,使用光程30mm比色皿,在700nm波長下,以水做參比,測定吸光度,并繪制工作曲線。
(2)測定結(jié)果的對比分析。
表1是用恒溫干燥箱消解法和蒸汽消毒器消解法同時對三種濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品進行測定的比較,從表1可以看出用恒溫干燥箱消解法前處理,測得的結(jié)果準(zhǔn)確度和精密度也符合實驗室要求。
表1 兩種消解方法測定結(jié)果比較
3.5 樣品過濾順序
當(dāng)水樣消解后出現(xiàn)渾濁,水樣需先過濾再顯色。也有試驗者在顯色后才對樣品進行過濾,本文比較顯色前過濾和顯色后過濾影響結(jié)果的情況。分析準(zhǔn)確度過程見表2,標(biāo)樣203939 濃度為0.272±0.015mg/L顯色前后過濾測定的結(jié)果比較,顯色前過濾相對誤差較小,結(jié)果在受控范圍內(nèi)。顯色后過濾檢測結(jié)果相對誤差較大,結(jié)果不在受控范圍內(nèi)。因此水樣經(jīng)消解后,過濾只能在顯色之前操作。
表2顯色前后過濾測定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)結(jié)果
3.6顯色溫度與顯色時間條件改進
在國標(biāo)GB 11893-1989中規(guī)定顯色溫度為室溫,標(biāo)注如果顯色時室溫低于13℃可在20~30℃水浴上顯色15min,但沒有明確的一個最佳顯色溫度。試液顯色反應(yīng)的吸光度隨時間的增加而增加直至達(dá)到一個最大值而后基本穩(wěn)定不變,顯色時間是吸光度達(dá)到最大值的時間。由表3看出,25℃時各濃度水樣反應(yīng)時間相差最少,且最高濃度與最低濃度顯色時間相差最短,10min的顯色時間即可滿足高濃度和低濃度的樣品同時檢測的需求。不會出現(xiàn)15~20℃時高濃度和低濃度樣品顯色時間均較長的問題。也不會出現(xiàn)30℃以上低濃度未顯色完全而高濃度顯色完成后等待比色時間較長的現(xiàn)象。因此樣品的最佳顯色溫度為水浴控制的25℃,顯色時間為10min。
表3 顯色溫度和顯色時間關(guān)系
4.改進方法后分析步驟
取25mL樣品于50mL具塞比色管中,加入4mL過硫酸鉀溶液,將具塞比色管的蓋塞緊后,用一小塊布和線將玻璃塞扎緊,置于恒溫干燥箱中,打開開關(guān),待溫度達(dá)到120℃時計時30min,消解結(jié)束后,關(guān)閉烘箱開關(guān),自然冷卻。取出比色管,冷卻。加入1mL抗壞血酸溶液,混勻,30s后加2mL鉬酸鹽溶液充分混勻。25℃水浴中放置10min后,使用光程30mm比色皿,在700nm波長下,以水做參比,測定吸光度。標(biāo)曲同上述操作并繪制工作曲線。
5.改進方法后準(zhǔn)確度實驗
采用環(huán)境保護部標(biāo)準(zhǔn)樣品研究所研制的總磷標(biāo)樣,按標(biāo)樣使用說明書的要求,稀釋至規(guī)定體積,對其進行測定。
本文將國標(biāo)試驗中的部分反應(yīng)條件進行改進,同時解決影響測定準(zhǔn)確度的問題,所得測試結(jié)果的準(zhǔn)確度如表4, 其測定值在標(biāo)樣濃度允許范圍內(nèi)。相對誤差為-0.12%,分析準(zhǔn)確度達(dá)到實驗室質(zhì)量控制要求。
表4改進方法后準(zhǔn)確度分析
6.改進方法后精密度實驗
在相同的條件下對同一試樣重復(fù)測定多次,然后計算n次測定結(jié)果的符合程度,精密度通常用相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示[3]。用3種地表水樣進行重復(fù)性試驗所得測試結(jié)果的精密度如表5,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.25%~0.51%,分析精密度達(dá)到實驗室質(zhì)量控制要求。
表5 改進方法后精密度分析
7.改進方法后水樣加標(biāo)回收率
取不同水樣進行測定及加標(biāo)回收分析,結(jié)果見表6,回收率在90~105%之間,結(jié)果達(dá)到實驗室要求。
表6改進方法后回收率分析
8.結(jié)論
本文分析了水質(zhì)總磷測定的過程中影響測定結(jié)果準(zhǔn)確性的因素。水樣應(yīng)酸化至pH≤1保存,24h內(nèi)進行分析,并于試驗前用50%的氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至中性再檢測使結(jié)果更準(zhǔn)確。檢驗恒溫干燥箱消解法處理水樣,其測定結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定,可應(yīng)用于實際操作。并確定了樣品的最佳顯色溫度為水浴控制的25℃,顯色時間為10min,測定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和實際水樣準(zhǔn)確度、精密度、回收率均符合實驗室質(zhì)量控制要求,具有一定的實際意義。
【參考文獻(xiàn)】
[1]GB11893-1989,水質(zhì)總磷的測定鉬酸銨分光光度法[S].
[2]索有芳.鉬酸銨分光光度法測定總磷的主要影響因素[J].青海環(huán)境,2010,20(2):89.
[3]葛興.分析化學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2004,17.