摘要 目的：探討梓醇-川芎嗪方（CT）對快速老化（SAMP8）小鼠認(rèn)知功能的改善作用及其機(jī)制。方法：將50只14周齡SAMP8小鼠隨機(jī)分為模型（Model）組、梓醇-川芎嗪方低劑量（CT-L）組、中劑量（CT-M）組、高劑量（CT-H）組、鹽酸多奈哌齊組（DH組），10只14周齡快速衰老模型對照（SAMR1）小鼠作為對照（Control）組。Control組及Model組均以生理鹽水灌胃，各用藥組以相應(yīng)藥物灌胃，每日1次，連續(xù)8周。采用自主活動實(shí)驗(yàn)、筑巢行為實(shí)驗(yàn)、新物體辨別實(shí)驗(yàn)、Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)等行為學(xué)觀察。行為學(xué)觀察后，檢測各組小鼠海馬組織超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、β-淀粉樣蛋白（Aβ）_1-42、p-Tau、核因子-κB（NF-κB）p65、核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3（NLRP3）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）及活性氧（ROS）水平，檢測各組小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS含量。結(jié)果：與Model組比較，DH、CT-M、CT-H組小鼠自主活動次數(shù)、筑巢行為評分升高、對新物體辨別時(shí)間增加、新舊物體辨別時(shí)間比值升高、逃避潛伏期明顯縮短、跨平臺次數(shù)和目標(biāo)象限停留時(shí)間增加（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高、探索新物體辨別時(shí)間明顯增加、新舊物體辨別時(shí)間比值升高、逃避潛伏期明顯縮短、跨平臺次數(shù)和目標(biāo)象限停留時(shí)間增加（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高、探索新物體辨別時(shí)間增加、新舊物體辨別時(shí)間比值升高、逃避潛伏期明顯縮短、跨平臺次數(shù)和目標(biāo)象限停留時(shí)間增加（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高、探索新物體辨別時(shí)間增加、新舊物體辨別時(shí)間比值升高、逃避潛伏期明顯縮短、跨平臺次數(shù)和目標(biāo)象限停留時(shí)間增加（P＜0.05）。與Model組比較，DH組和CT-M、CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高，Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降，小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高，Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降，小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高、Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降，小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高、Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降，小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。結(jié)論：梓醇-川芎嗪方可能通過改善氧化/還原失衡狀態(tài)，抑制腦內(nèi)炎癥反應(yīng)從而改善SAMP8小鼠的認(rèn)知功能障礙，且其量效關(guān)系呈正相關(guān)。

關(guān)鍵詞 阿爾茨海默?。谎趸瘧?yīng)激；梓醇-川芎嗪方；神經(jīng)炎癥；實(shí)驗(yàn)研究

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.21.009

Effect of Catalpol-Tetramethylpyrazine Prescription on Cognitive Function of SAMP8 Mice

DENG Chujun¹， MENG Shengxi¹， YANG Ruoyu²， CHEN Huize¹， YANG Ran²， YU Jialuo²， ZHANG Bochao²

1. Shanghai Sixth People′s Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of Medicine， Shanghai 200233， China; 2. Shanghai Jiao Tong University School of Medicine， Shanghai 200025， China

Corresponding Author MENG Shengxi， E-mail： mengsx163@163.com

Abstract Objective：To explore the effect of catalpol-tetramethylpyrazine（CT） prescription on cognitive function in SAMP8 mice.Methods：Fifty 14-week-old SAMP8 mice were randomly divided into Model group，low dose CT prescription（CT-L） group，medium dose CT prescription（CT-M） group，high dose CT prescription（CT-H） group and donepezil hydrochloride（DH） group.Ten 14-week-old SAMR1 mice were chosen as Control group.The Control group and Model group were both gavaged with physiological saline，and each medication group was gavaged with corresponding drugs once a day for 8 consecutive weeks.Autonomous activity experiment，nesting behavior experiment，new object recognition experiment，and morris water maze experiment were adopted.After behavioral observations，superoxide dismutase（SOD），glutathione（GSH），β-amyloid protein（Aβ） 1-42，p-Tau，nuclear factor-κB（NF-κB） p65，nucleotide-bound oligomerized domain-like receptor protein 3（NLRP3），tumor necrosis factor-α（TNF-α），interleukin-1β（IL-1β），and reactive oxygen species（ROS） levels were detected in the hippocampus of each group.The contents of NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS in serum of each group were detected.Results：Compared with Model group，the number of autonomous activities，nesting behavior scores，the time to distinguish new objects increased，the ratio of time to distinguish new，and old objects increased，the escape latency significantly shortened，the cross-platform number and residence time in the target quarter increased in DH group，CT-M group and CT-H group（P＜0.05）.Compared with CT-L group，the number of free activities，nesting behavior score increased，the identification time of exploring new objects significantly increased，the ratio of old and new object identification time increased，the escape latency shortened，the cross-platform number and the residence time in the target quarter increased in CT-M group，CT-H group，DH group（P＜0.05）.Compared with the CT-M group，the number of free activities，the score of nesting behavior，the identification time of exploring new objects，the ratio of old and new objects identification time，the escape latency period，the cross-platform number，and the target quadrant residence time of mice in the CT-H group increased（P＜0.05）.Compared with DH group，the number of free activities increased，nesting behavior score，identification time of exploring new objects increased，ratio of old and new object identification time increased，escape latency decreased significantly，cross-platform frequency，and target quadrant residence time increased in CT-H group（P＜0.05）.Compared with Model group，SOD and GSH levels in hippocampus of mice in DH group，CT-M group and CT-H group increased，while Aβ1-42，p-Tau，NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS levels decreased，the levels of serum NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS in mice decreased（P＜0.05）.Compared with CT-L group，the levels of SOD and GSH in hippocampus of mice in CT-M group，CT-H group and DH group increased，while the levels of Aβ1-42，p-Tau，NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β and ROS decreased，the levels of serum NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS in mice decreased（P＜0.05）.Compared with the CT-M group，the levels of SOD and GSH in the hippocampus of mice in the CT-H group increased，and the levels of Aβ1-42，p-Tau，NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS decreased，the levels of serum NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS in mice decreased（P＜0.05）.Compared with DH group，the levels of SOD and GSH in hippocampus of mice in CT-H group increased，and the levels of Aβ1-42，p-Tau，NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS decreased，the levels of serum NF-κB p65，NLRP3，TNF-α，IL-1β，and ROS in mice decreased（P＜0.05）.Conclusion：CT prescription could improve the imbalance between oxidation and reduction，inhibit inflammation in the brain，and thus improve cognitive impairment of SAMP8 mice，and the dose-effect relationship is positive.

Keywords Alzheimer′s disease; oxidative stress; catalpol-tetramethylpyrazine prescription; neuroinflammation; experimental study

基金項(xiàng)目 上海市第六人民醫(yī)院“腦科學(xué)與類腦研究”腦項(xiàng)目功能和針灸腦圖譜光聲成像技術(shù)應(yīng)用研究（No.ynnkxyb202415）；上海市第六人民醫(yī)院醫(yī)療服務(wù)能級提升工程臨床醫(yī)療技術(shù)骨干隊(duì)伍培育項(xiàng)目（No.20220213）；上海市第六人民醫(yī)院院級課題（No.ynxg202218）；上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院“大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練計(jì)劃”項(xiàng)目（No.1723Z002，1824011）；上海市進(jìn)一步加快中醫(yī)藥傳承創(chuàng)新發(fā)展三年行動計(jì)劃項(xiàng)目（2021年—2023年）［No.ZY（2021-2023）-0205-04］；華東片區(qū)及市級中醫(yī)專科專病聯(lián)盟建設(shè)項(xiàng)目［No.ZY（2021-2023）-0302］

作者單位 1.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第六人民醫(yī)院（上海200233）；2.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院（上海 200025）

通訊作者 孟勝喜，E-mail：mengsx163@163.com

引用信息 鄧楚珺，孟勝喜，楊若瑜，等.梓醇-川芎嗪方對SAMP8小鼠認(rèn)知功能的改善作用及機(jī)制［J］.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2024，22（21）：3907-3912.

阿爾茨海默?。ˋlzheimer′s disease，AD）作為一種神經(jīng)退行性疾病，以漸進(jìn)性認(rèn)知功能障礙和行為損害為主要臨床表現(xiàn)^［1］。隨著全球老齡化的不斷加劇，AD患病率也在逐年激增^［2-3］。這不僅給AD病人及其家庭帶來沉重的經(jīng)濟(jì)和精神負(fù)擔(dān)，也給社會和國家?guī)砭薮髩毫?sup>［4^］。梓醇-川芎嗪（Catalpol-Tetramethylpyrazine prescription，CT）方是本課題組經(jīng)過反復(fù)篩選和驗(yàn)證出來治療AD的中藥組分復(fù)方^［5-6］。本實(shí)驗(yàn)研究梓醇-川芎嗪方對快速老化（SAMP8）小鼠認(rèn)知功能的作用并闡明其可能的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥物

梓醇-川芎嗪方由梓醇4.274 mg和川芎嗪1.554 mg組成。梓醇，純度（HPLC）≥98.0%，上海滬崢生物科技有限公司提供，批號：DSTDZ000502。川芎嗪，純度（HPLC）≥98.0%，由上海滬崢生物科技有限公司提供，批號：DST200602-032。鹽酸多奈哌齊（安理申），衛(wèi)材（中國）藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H20050978，批號：1705080，規(guī)格：每片5 mg。

1.2 儀器與試劑

小鼠自由活動箱（北京諾達(dá)思信息技術(shù)有限責(zé)任公司），筑巢行為實(shí)驗(yàn)裝置、新物體識別實(shí)驗(yàn)裝置（深圳瑞沃德公司），實(shí)驗(yàn)Morris水迷宮（上海吉量軟件科技有限公司生產(chǎn)，型號：JLBehv-MWMG-1），記錄系統(tǒng)（美國Smart3.0公司），攝像頭（日本Sony公司）。超氧化物歧化酶（SOD）、還原型谷胱甘肽（GSH）、β-淀粉樣蛋白（amyloid-β protein，Aβ）_1-42、p-Tau、核因子-κB（NF-κB）p65、核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3（NLRP3）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）及活性氧（ROS）等酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）檢測試劑盒（北京普利萊基因技術(shù)有限公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)動物及分組

14周齡無特定病原體（SPF）級SAMP8小鼠50只，體質(zhì)量（30±5）g；14周齡SPF級同源雄性快速衰老模型鼠對照（SAMR1）小鼠10只，體質(zhì)量（30±5）g。上述SAMP8與SAMR1小鼠均購自至善（北京）健康醫(yī)學(xué)研究院有限公司，許可證號SCXX（京）2016-0010。小鼠購進(jìn)后，飼養(yǎng)在上海吉凱基因化學(xué)技術(shù)有限公司動物房，飼養(yǎng)至24周齡。分別單籠喂養(yǎng)，光照/黑暗：12 h/12 h，自由飲水和進(jìn)食，溫度（22±2）℃，相對濕度（60±5）%。所有動物飼養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)操作程序均符合上海市第六人民醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動物福利倫理委員會相關(guān)規(guī)定，并經(jīng)上海市第六人民醫(yī)院動物倫理委員會批準(zhǔn)，編號：2023-0463。SAMR1設(shè)為對照組（Control），SAMP8按隨機(jī)數(shù)字法隨機(jī)分為模型（Model）組、梓醇-川芎嗪方低劑量（CT-L）組、梓醇-川芎嗪方中劑量（CT-M）組、梓醇-川芎嗪方高劑量（CT-H）組、鹽酸多奈哌齊（DH）組，每組10只。

1.4 實(shí)驗(yàn)動物干預(yù)

CT-L組、CT-M組、CT-H組分別對應(yīng)給予低劑量、中劑量、高劑量梓醇-川芎嗪方灌胃，DH組以鹽酸多奈哌齊（安理申）溶液灌胃。梓醇-川芎嗪方低、中、高劑量及鹽酸多奈哌齊溶液給藥濃度，依據(jù)人和動物體表面積折算系數(shù)換算^［7］，計(jì)算結(jié)果分別為梓醇-川芎嗪方25、50、100 mg/kg灌胃。DH組小鼠每天給予鹽酸多奈哌齊5 mg/kg灌胃。Control組、Model組小鼠給予等體積生理鹽水灌胃。各組小鼠均每天1次，連續(xù)灌胃8周。

1.5 檢測指標(biāo)

1.5.1 行為學(xué)觀察

干預(yù)前后，對各組小鼠進(jìn)行行為學(xué)觀察。

1.5.1.1 自主活動實(shí)驗(yàn)

觀察各組小鼠自由活動次數(shù)。自由活動箱（長×寬×高＝0.30 m×0.30 m×0.45 m），箱體底部和側(cè)壁均不透光，頂端安置有紅外攝像機(jī)。小鼠置于箱中即開始實(shí)驗(yàn)，小鼠自由活動10 min后開始記錄，采集30 min內(nèi)各組小鼠自由活動次數(shù)。以自由活動次數(shù)代表小鼠自主活動能力。

1.5.1.2 筑巢行為實(shí)驗(yàn)

觀察各組小鼠社會行為和日?；顒幽芰?。筑巢行為實(shí)驗(yàn)更關(guān)注小鼠日常活動和執(zhí)行功能^［8］。小鼠分成單籠飼養(yǎng)，適應(yīng)48 h，每籠中換入厚度為1 cm的玉米芯墊料，12 h后放入方形無味薄紙片16張（邊長4 cm），18 h后按照4分法對筑巢質(zhì)量進(jìn)行評分。1分：紙片無規(guī)則地分散在籠子中，未被撕咬；2分：紙片較松散地聚集于籠子一側(cè)，但無成型的巢，無明顯的撕咬痕跡；3分：紙片聚攏折疊成型，但只有較平的巢，無明顯的撕咬痕跡；4分：紙片聚攏折疊成較深的巢，并被撕咬成小塊。

1.5.1.3 新物體辨別實(shí)驗(yàn)

新物體識別實(shí)驗(yàn)通過記錄小鼠對不同物體探索時(shí)間的區(qū)別，從而檢測小鼠的非空間記憶能力^［9］。操作方法^［10］：裝置要求隔音、避光，以長×寬×高＝0.25 m×0.25 m×0.40 m預(yù)備3個(gè)物體，其中2個(gè)物體為顏色形狀相同的立方體，另1個(gè)物體為與前2個(gè)物體不一致的圓錐體。測試裝置上方采用60 W白光燈照射，消除陰影。第1天將小鼠置入盒中央，適應(yīng)活動5 min；第2天在盒內(nèi)置入2個(gè)顏色形狀完全相同的物體，位置固定，小鼠背對物體置于裝置中，探索10 min；第3天取出相同物體中的1個(gè)物體，并于相同位置放入顏色外觀不同的物體，小鼠背對物體置于裝置中，探索10 min。記錄不同階段探索新物體辨別時(shí)間，并計(jì)算新舊物體辨別時(shí)間比值。新舊物體辨別時(shí)間比值＝探索新物體時(shí)間/探索物體總時(shí)間。

1.5.1.4 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)前在水池壁上標(biāo)注不同標(biāo)記作為參照物。水池均分為4個(gè)象限，平臺始終置于第1象限的中間。小鼠頭朝池壁置于任一象限水中，逃避潛伏期為小鼠找到平臺所用時(shí)間。引導(dǎo)其學(xué)習(xí)上臺并停留10 s。每次學(xué)習(xí)上限90 s，如果未能登陸平臺，記為90 s，每天間歇性訓(xùn)練3次，連續(xù)訓(xùn)練5 d。第7天，移去平臺，開始空間探索。小鼠從第3象限置于水中，記錄逃避潛伏期和90 s內(nèi)小鼠跨平臺次數(shù)以及目標(biāo)象限停留時(shí)間。

1.5.2 生化檢驗(yàn)

行為學(xué)觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，采集各組小鼠的外周血，血液在室溫下靜置2 h，血清完全析出后，4 ℃，3 000 r/min，離心20 min，然后收集上清。取各組小鼠海馬組織，海馬組織按質(zhì)量/體積比1∶9加入磷酸緩沖鹽溶液（phosphate buffer saline，PBS），組織研磨儀勻漿，勻漿液4 ℃、12 000 r/min離心10 min，取上清液。

1.5.2.1 檢測各組小鼠海馬組織中SOD、GSH、Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平

取小鼠腦組織，根據(jù)所取組織質(zhì)量，加入PBS（1 g組織樣品加入9 mL PBS）制成10%腦組織勻漿。然后按照ELISA試劑盒說明書檢測各組小鼠海馬組織中SOD、GSH、Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平。采用酶標(biāo)儀檢測波長450 nm和412 nm處A值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和A值計(jì)算海馬組織中SOD、GSH、Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平。

1.5.2.2 檢測各組小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平

通過特異性ELISA試劑盒分別測定各組小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用GraphPad Prism 9.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的定量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（xˉ±s）表示，采用Levene進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，多組間數(shù)據(jù)比較采用One-way ANOVA，進(jìn)一步采用LSD-t檢驗(yàn)對有統(tǒng)計(jì)意義的數(shù)據(jù)進(jìn)行兩兩比較。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組小鼠自主活動次數(shù)和筑巢行為評分

與Control組比較，Model組小鼠自由活動次數(shù)、筑巢行為評分降低（P＜0.05）。與Model組比較，DH組和CT-M組、CT-H組小鼠自由活動次數(shù)、筑巢行為評分明顯升高（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高（P＜0.05）。詳見表1。

2.2 各組小鼠新物體辨別時(shí)間及新舊物體辨別時(shí)間比值比較

與Control組比較，Model組小鼠探索新物體辨別時(shí)間減少，且新舊物體辨別時(shí)間比值降低（P＜0.05）。與Model組比較，DH組和CT-M組、CT-H組小鼠探索新物體辨別時(shí)間增加，且新舊物體辨別時(shí)間比值升高（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠探索新物體辨別時(shí)間增加，且新舊物體辨別時(shí)間比值升高（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠探索新物體辨別時(shí)間增加，且新舊物體辨別時(shí)間比值升高（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠探索新物體辨別時(shí)間明顯增加，且新舊物體辨別時(shí)間比值升高（P＜0.05）。詳見表2。

2.3 各組小鼠Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)記憶能力比較

與Control組比較，Model組小鼠逃避潛伏期延長，跨平臺次數(shù)和目標(biāo)象限停留時(shí)間減少（P＜0.05）；與Model組比較，DH組和CT-M組、CT-H組小鼠逃避潛伏期縮短，跨平臺次數(shù)和目標(biāo)象限停留時(shí)間增加（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠逃避潛伏期縮短，跨平臺次數(shù)和目標(biāo)象限停留時(shí)間增加（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組逃避潛伏期縮短，跨平臺次數(shù)和目標(biāo)象限停留時(shí)間增加（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組逃避潛伏期縮短、跨平臺次數(shù)和目標(biāo)象限停留時(shí)間增加（P＜0.05）。詳見表3。

2.4 各組小鼠海馬組織SOD活性及GSH水平

與Control組比較，Model組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平降低（P＜0.05）。與Model組比較，DH組、CT-M組、CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高（P＜0.05）。詳見表4。

2.5 各組小鼠海馬組織Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平比較

與Control組比較，Model組小鼠海馬組織中Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平升高（P＜0.05）。與Model組比較，DH組、CT-M組、CT-H組小鼠海馬組織中Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠海馬組織中Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠海馬組織中Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠海馬組織中Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。詳見表5。

2.6 各組小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平比較

與Control組比較，Model組小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS含量升高（P＜0.05）。與Model組比較，DH組、CT-M組、CT-H組小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β、ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。詳見表6。

3 討 論

氧化應(yīng)激產(chǎn)生的大量ROS及其氧化損傷在AD的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用^［11］。氧化應(yīng)激被認(rèn)為是AD中神經(jīng)元損傷的主要原因^［12］。在AD中，抗氧化酶的活性受到抑制，氧化與抗氧化之間的平衡被打破，從而導(dǎo)致氧化損傷的無限制積累，最終引起細(xì)胞損傷^［13］。

本研究結(jié)果顯示，與Model組比較，DH組和CT-M組、CT-H組小鼠自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高，探索新物體辨別時(shí)間增加，新舊物體辨別時(shí)間比值升高，逃避潛伏期縮短，跨平臺次數(shù)和目標(biāo)象限停留時(shí)間增加（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高，探索新物體辨別時(shí)間增加，新舊物體辨別時(shí)間比值升高，逃避潛伏期縮短，跨平臺次數(shù)和目標(biāo)象限停留時(shí)間增加（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高，探索新物體辨別時(shí)間增加，新舊物體辨別時(shí)間比值升高，逃避潛伏期縮短，跨平臺次數(shù)和目標(biāo)象限停留時(shí)間增加（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠的自由活動次數(shù)、筑巢行為評分升高，探索新物體辨別時(shí)間增加，新舊物體辨別時(shí)間比值升高，逃避潛伏期縮短，跨平臺次數(shù)和目標(biāo)象限停留時(shí)間增加（P＜0.05）。表明梓醇-川芎嗪方可以改善SAMP8小鼠的認(rèn)知功能，且其作用與劑量呈正相關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，與Model組比較，DH組和CT-M組、CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高，Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β、ROS水平下降，小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β、ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-L組比較，CT-M組、CT-H組、DH組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高，Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降，小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與CT-M組比較，CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高，Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降，小鼠血清NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。與DH組比較，CT-H組小鼠海馬組織中SOD及GSH水平升高，Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平均下降，小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平下降（P＜0.05）。表明梓醇-川芎嗪方可以升高SAMP8小鼠海馬組織中SOD及GSH水平，降低小鼠海馬組織中Aβ_1-42、p-Tau、NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平，降低小鼠血清中NF-κB p65、NLRP3、TNF-α、IL-1β及ROS水平。

綜上所述，梓醇-川芎嗪方可能通過改善氧化/還原失衡狀態(tài)，抑制腦內(nèi)炎癥反應(yīng)從而改善SAMP8小鼠的認(rèn)知功能障礙，且其量效關(guān)系呈正相關(guān)。

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（收稿日期：2023-05-04）

（本文編輯 鄒麗）