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        灘羊肉成熟過程中糖酵解與保水性之間的關(guān)系

        2024-04-08 02:41:04王金霞劉吉娟羅瑞明陳雪妍胡麗筠
        食品科學(xué) 2024年6期
        關(guān)鍵詞:宰后灘羊肌原纖維

        王金霞,劉吉娟,羅瑞明,李 榮,陳雪妍,張 倩,胡麗筠

        (寧夏大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,寧夏 銀川 750000)

        灘羊是廣泛分布于寧夏、甘肅、陜西等地的區(qū)域性優(yōu)質(zhì)品種家畜,其肉質(zhì)細(xì)嫩、無膻味、營養(yǎng)豐富、脂肪分布均勻,備受消費(fèi)者喜愛,具有重要的經(jīng)濟(jì)及食用價(jià)值。目前,關(guān)于灘羊肉的研究主要集中于通過宰前控制對(duì)灘羊肉品質(zhì)形成進(jìn)行影響[1-2]以及通過控制宰后因素對(duì)灘羊肉品質(zhì)進(jìn)行影響。

        當(dāng)外力作用于肉制品肌肉時(shí),仍可以保持水分和補(bǔ)充水分的能力稱為肉的保水性[3]。目前,關(guān)于宰后肉品保水性影響的研究主要集中于:AMP依賴的蛋白激酶(adenosine 5′-monophosphate (AMP)-activated protein kinase,AMPK)活性變化影響糖酵解相關(guān)酶活性,從而影響肉品的保水性;不同的貯藏、解凍方式造成肌原纖維解離,從而影響肉品的保水性;宰后胴體關(guān)鍵結(jié)構(gòu)骨架蛋白質(zhì)的氧化、變性、降解引起肌纖維結(jié)構(gòu)發(fā)生斷裂、損傷、肌原纖維小片化等,進(jìn)而導(dǎo)致肉的保水性下降。朱立賢等[4]研究了宰后牛背最長(zhǎng)肌AMPK活性、保水性和糖酵解經(jīng)不同的溫度處理后的變化情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn)AMPK通過調(diào)控丙酮酸激酶活性調(diào)節(jié)糖酵解的速率,導(dǎo)致貯藏?fù)p失發(fā)生改變,最終影響肉品的持水力。李天翔等[5]研究了4 種解凍方式下鰹魚魚肉蛋白質(zhì)和組胺的含量變化,結(jié)果表明冷藏庫解凍較好地保持了肌原纖維蛋白的結(jié)構(gòu)和功能特性,肉品保水性較好。以上研究結(jié)果表明,動(dòng)物屠宰后肌肉所發(fā)生的生化變化對(duì)保水性具有重要影響。

        灘羊屠宰后機(jī)體內(nèi)氧氣供應(yīng)中斷,組織主要依靠糖酵解途徑維持機(jī)體的正常生命活動(dòng),當(dāng)糖酵解相關(guān)酶失活或肌糖原耗盡時(shí),糖酵解進(jìn)程則會(huì)受到阻礙,從而無法正常進(jìn)行。因此,糖酵解對(duì)肉品質(zhì)變化有重要影響。本實(shí)驗(yàn)以灘羊背最長(zhǎng)肌為研究對(duì)象,通過測(cè)定其在4 ℃成熟8 d過程中糖酵解的變化對(duì)保水性的影響,并對(duì)其進(jìn)行相關(guān)性分析,以期闡明灘羊肉成熟過程中糖酵解程度與保水性的關(guān)系,為后續(xù)揭示糖酵解調(diào)控保水性的機(jī)制奠定基礎(chǔ),并為冷卻灘羊肉貯藏期間肉品質(zhì)量控制技術(shù)研發(fā)提供一定的理論參考。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        所用灘羊背最長(zhǎng)肌取自寧夏鹽池縣大夏牧場(chǎng)食品有限公司,選取胴體質(zhì)量相近的6 月齡公灘羊9 只,宰前遵循動(dòng)物管理規(guī)定,屠宰后立即用滅菌刀取下右側(cè)背最長(zhǎng)肌,剔除可見脂肪與結(jié)締組織后,置于聚乙稀薄膜內(nèi),用錫紙包裝后置于帶有編號(hào)的保鮮袋中,貯存在4 ℃條件下,在成熟0、1、2、3、4、8 d時(shí)分別檢測(cè)相應(yīng)指標(biāo)。

        磷酸氫二鈉、氯化鎂、乙二胺四乙酸、氯化鉀(均為分析純)國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;磷酸鹽緩沖液(phosphate buffered saline,PBS)(0.01 mol/L,pH 7.4)北京索萊寶科技有限公司;鈣蛋白酶-1、ATP、葡萄糖、糖原、乳酸、乳酸脫氫酶、丙酮酸激酶酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)試劑盒 上海優(yōu)選生物科技有限公司。

        1.2 儀器與設(shè)備

        SJ-3F便攜式pH計(jì) 上海德圖儀器國際貿(mào)易有限公司;TG16W型離心機(jī) 湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司;DZKW-C型電子恒溫水浴鍋 滄州新三思試驗(yàn)儀器有限公司;352型酶標(biāo)儀 芬蘭Labsystems Multiskan MS公司;NM120低場(chǎng)脈沖核磁共振分析儀蘇州(上海)紐邁電子科技有限公司。

        1.3 方法

        1.3.1 樣品采集

        采集0、1、2、3、4、8 d的樣品各200 g,用于測(cè)定pH值、滴水損失率及貯藏?fù)p失率;采集不同成熟期間的樣品各20 g,迅速置于液氮中放置2 h后轉(zhuǎn)移至-80 ℃冰箱中保存,用于其他指標(biāo)測(cè)定。

        1.3.2 pH值測(cè)定

        剔除樣品可見脂肪與結(jié)締組織,使用便攜式pH計(jì)測(cè)定成熟期間肌肉pH值。

        1.3.3 保水性指標(biāo)測(cè)定

        1.3.3.1 滴水損失率

        參照左惠心[6]的方法并略作修改。將約50 g的樣品準(zhǔn)確稱質(zhì)量,記為m1,用繩子懸掛在密閉自封袋中,確保樣品與自封袋不接觸,置于4 ℃冰箱中,待成熟0、1、2、3、4、8 d后取出,用濾紙擦干表面水分后稱質(zhì)量,記為m2。滴水損失率按式(1)計(jì)算:

        1.3.3.2 貯藏?fù)p失率

        參照Cardoso等[7]的方法并略作修改。將約50 g的樣品準(zhǔn)確稱質(zhì)量,記為m3,裝入自封袋中密閉,置于4 ℃的冰箱中貯藏,待成熟0、1、2、3、4、8 d后取出,用濾紙擦干表面水分后稱質(zhì)量,記為m4。貯藏?fù)p失率按式(2)計(jì)算:

        1.3.3.3 離心損失率

        參考Zhang等[8]的方法并稍作修改。將成熟0、1、2、3、4、8 d樣品分別切成4 cm×1 cm×0.5 cm的長(zhǎng)條形,準(zhǔn)確稱質(zhì)量,記為m5,置于10 mL離心管中于4 ℃、4 000×g離心15 min,將離心管中的樣品倒出并用濾紙擦干表面水分,稱質(zhì)量并記為m6。離心損失率按式(3)計(jì)算:

        1.3.3.4 水分分布測(cè)定

        參考孫文彬等[9]的方法并略作修改。設(shè)置儀器溫度為32 ℃,預(yù)熱30 min后使用。測(cè)定前使用標(biāo)樣的自由感應(yīng)衰減(free induction decay,F(xiàn)ID)進(jìn)行校準(zhǔn),F(xiàn)ID的參數(shù)為SF=18、TW=1 000、NS=1、SW=100、DRG1=2、RFD=0.05、TD=1 024、RG1=20。將樣品沿肌纖維方向切割成1 cm×1 cm×2 cm的肉條,稱質(zhì)量后放入核磁共振測(cè)定專用試管底部進(jìn)行測(cè)定,樣品測(cè)定所用CPMG的參數(shù)為SF=18、SW=200、TW=3 000、TE=0.251、NECH=5 000、NS=8、P2=33、DRG1=3、RFD=0.2、RG1=20。

        1.3.4 鈣蛋白酶-1活性測(cè)定

        取適量肌肉于預(yù)冷后的PBS(0.01 mol/L、pH 7.4)中清洗去除血液,稱取1 g樣品剪碎后,加入10 倍體積PBS(0.01 mol/L、pH 7.4),置于勻漿器中,在0 ℃、65 Hz條件下勻漿60 s。將所得液體5 000×g離心10 min,取其上清液進(jìn)行檢測(cè)。鈣蛋白酶-1活性測(cè)定按照鈣蛋白酶-1 ELISA檢測(cè)試劑盒的要求進(jìn)行,使用酶標(biāo)儀于450 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。

        1.3.5 肌原纖維小片化指數(shù)(myofibril fragmentation index,MFI)測(cè)定

        參考Ilian等[10]的方法并略作修改。取稱取0.5 g樣品,加入10 倍體積的緩沖液(0.02 mol/L磷酸氫二鈉、0.001 mol/L氯化鎂、乙二胺四乙酸0.001 mol/L、0.1 mol/L氯化鉀,pH 7.1),在0 ℃、65 Hz條件下勻漿30 s,4 ℃、3 000×g離心15 min,倒掉上清液,取沉淀重復(fù)上述操作1 次。向最終沉淀中加入5 mL上述緩沖液重懸3 min,懸濁液用200 目尼龍篩網(wǎng)過濾,得到肌原纖維蛋白溶液。用BCA法在540 nm波長(zhǎng)處測(cè)定肌原纖維蛋白吸光度,將得到的數(shù)值乘以200即為MFI。

        1.3.6 糖酵解指標(biāo)測(cè)定

        樣品處理同1.3.4節(jié),實(shí)驗(yàn)操作按照ATP、葡萄糖、糖原、乳酸、乳酸脫氫酶、丙酮酸激酶ELISA檢測(cè)試劑盒的要求進(jìn)行,使用酶標(biāo)儀于450 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。

        1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

        2 結(jié)果與分析

        2.1 宰后灘羊成熟期間pH值變化

        糖酵解可以產(chǎn)生丙酮酸和ATP,ATP發(fā)生水解生成H+,隨著糖酵解的進(jìn)行H+大量堆積,導(dǎo)致肌肉pH值下降,因此,宰后肌肉的糖酵解水平可以決定肉的pH值。由圖1可知,宰后0~4 d pH值顯著降低(P<0.05),并在4 d時(shí)降至最低(5.63),4 d后pH值顯著升高(P<0.05),并于8 d時(shí)升高至5.75。Tao Yingmei[11]及姬琛[12]等的研究表明,宰后成熟期間灘羊pH值變化范圍為5.4~6.3,本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果符合這一規(guī)律。宰后成熟期間,肌肉pH值的變化顯著影響機(jī)體內(nèi)代謝酶的活性,對(duì)于肉品的色澤、保水性、嫩度和風(fēng)味前體物質(zhì)等具有重要影響[13]。宰后成熟早期,AMPK活性的升高導(dǎo)致糖酵解相關(guān)酶活性發(fā)生改變,促進(jìn)了糖酵解代謝進(jìn)程,而機(jī)體產(chǎn)生的乳酸無法通過三羧酸循環(huán)系統(tǒng)排出體外,只能堆積在肌肉組織中,所以導(dǎo)致肌肉pH值的下降[14]。宰后成熟后期,機(jī)體進(jìn)行一系列分解代謝,逐漸消耗了堆積在肌肉組織中的酸性物質(zhì),因此肌肉pH值開始上升[15]。

        圖1 宰后灘羊成熟期間pH值的變化Fig.1 Changes in pH of Tan sheep meat during postmortem aging

        劉秋鳳等[16]的研究表明,pH值的下降一方面影響肌原纖維蛋白降解酶活性,另一方面還影響蛋白質(zhì)與水分的結(jié)合度,當(dāng)pH值達(dá)到蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)時(shí),蛋白質(zhì)發(fā)生變性,肌纖維空間結(jié)構(gòu)逐漸減小,導(dǎo)致不易流動(dòng)水轉(zhuǎn)化為自由水并流失,引起灘羊肉保水性下降;當(dāng)pH值偏離蛋白質(zhì)等電點(diǎn)時(shí),造成肌動(dòng)球蛋白解離,肌原纖維空間結(jié)構(gòu)逐漸擴(kuò)大,細(xì)胞外的水分重新滲入,引起灘羊肉保水性上升[17]。因此,宰后成熟過程中肌肉pH值通過改變蛋白質(zhì)等電點(diǎn)引起肌原纖維空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,進(jìn)而對(duì)保水性產(chǎn)生重要的影響。

        2.2 宰后灘羊成熟期間保水性指標(biāo)變化

        由圖2可知,隨成熟時(shí)間的延長(zhǎng),灘羊背最長(zhǎng)肌的滴水損失率、貯藏?fù)p失率及離心損失率均呈先增大后減小的趨勢(shì)(P<0.05),并在4 d時(shí)達(dá)到最大值,分別為7.42%、5.14%與5.24%。左惠心[6]以牦牛背最長(zhǎng)肌為研究對(duì)象,探究了成熟過程中的高保水性組和低保水性組滴水損失情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn)高、低保水性組滴水損失均呈先上升后下降的趨勢(shì)。牛克蘭[18]以牦牛背最長(zhǎng)肌為研究對(duì)象,探究了冷鮮牦牛肉貯藏?fù)p失情況,結(jié)果表明宰后成熟期間貯藏?fù)p失呈先增大后減小趨勢(shì)。馬旭華[19]以秦川牛背最長(zhǎng)肌為研究對(duì)象,探究了成熟期間離心損失的變化規(guī)律,結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著成熟時(shí)間的延長(zhǎng)離心損失率呈先增大后減小的趨勢(shì)。本研究結(jié)果與以上研究結(jié)果相符。

        圖2 宰后灘羊成熟期間保水性指標(biāo)的變化Fig.2 Changes in water retention indexes of Tan sheep meat during postmortem aging

        滴水損失、貯藏?fù)p失與離心損失越高,肉的保水性越差。肌肉中的水分主要有3 種存在形式,即自由水、結(jié)合水、不易流動(dòng)水。宰后成熟初期,鈣蛋白酶的水解作用導(dǎo)致肌肉組織結(jié)構(gòu)的完整性遭到破壞[20],存在于細(xì)胞間隙的自由水在重力作用下流失。隨成熟時(shí)間的延長(zhǎng),pH值的下降、肌原纖維蛋白的解離以及肌細(xì)胞的收縮,導(dǎo)致肌原纖維與肌原纖維之間、肌原纖維和肌膜之間形成滴水通道,引起不易流動(dòng)水向自由水轉(zhuǎn)換,并在重力作用下造成滴水、貯藏及離心損失的升高,最終導(dǎo)致宰后成熟期間灘羊肉保水性變差[12]。宰后成熟后期肌肉解僵成熟,大多數(shù)自由水和不易流動(dòng)水均已損失,pH值偏離蛋白質(zhì)的等電點(diǎn),導(dǎo)致蛋白質(zhì)對(duì)水的吸附能力增強(qiáng),引起細(xì)胞外的水分重新滲入組織內(nèi),滴水損失貯藏?fù)p失和離心損失逐漸減少。

        2.3 宰后灘羊成熟期間水分分布的變化

        宰后灘羊肉成熟過程中的橫向弛豫時(shí)間分布如圖3所示,不同成熟時(shí)間灘羊肉的橫向弛豫時(shí)間T2圖譜中均出現(xiàn)3 個(gè)特征峰,在0.1~10 ms(T21)范圍內(nèi)出現(xiàn)第1個(gè)峰,在10~100 ms(T22)范圍內(nèi)出現(xiàn)最大峰,在100~1 000 ms(T23)出現(xiàn)第3個(gè)峰,此峰的弛豫時(shí)間最長(zhǎng)。各峰所占的峰面積、峰比例均不同,其中T22占據(jù)的峰面積最大、峰比例最高,可以反映出灘羊肉中存在不同狀態(tài)的水,且水分大多以不易流動(dòng)水的形式存在。

        圖3 宰后灘羊成熟期間橫向弛豫時(shí)間分布圖Fig.3 T2 distribution of Tan sheep meat during postmortem aging

        宰后灘羊肉成熟過程中弛豫時(shí)間T2的變化如圖4所示,隨成熟時(shí)間延長(zhǎng),橫向弛豫時(shí)間T21總體無明顯變化,這可能是因?yàn)榻Y(jié)合水緊密地附著在蛋白質(zhì)等大分子的極性基團(tuán)上,并不隨成熟過程流失[21]。T22總體呈顯著下降趨勢(shì)(P<0.05),這可能是因?yàn)殡S成熟時(shí)間延長(zhǎng),肌纖維的結(jié)構(gòu)被破壞,肌肉不斷收縮產(chǎn)生壓力,在壓力的作用下,肌肉中自由度較高的不易流動(dòng)水逐漸流失,而自由度較低的不易流動(dòng)水仍被束縛在肌原纖維中[22]。T23總體呈顯著下降趨勢(shì)(P<0.05),這是由于自由水在成熟期間最先流失。

        圖4 宰后灘羊成熟期間橫向弛豫時(shí)間T2的變化Fig.4 Changes in transverse relaxation time T2 of Tan sheep meat during postmortem aging

        2.4 宰后灘羊成熟期間鈣蛋白酶-1活性的變化

        由圖5可知,灘羊在宰后成熟過程中,鈣蛋白酶-1活性呈現(xiàn)持續(xù)下降趨勢(shì)(P<0.05),這與杜曼婷等[23]的研究結(jié)果一致。灘羊宰后鈣蛋白酶-1活性隨成熟時(shí)間延長(zhǎng)而下降,說明鈣蛋白酶-1的活性結(jié)構(gòu)在成熟過程中逐漸喪失。這可能是因?yàn)樵缀蟪墒爝^程中,機(jī)體內(nèi)主要進(jìn)行糖酵解反應(yīng),pH值的快速下降導(dǎo)致鈣蛋白酶-1自溶后激活其活性,催化肌原纖維蛋白降解[24]。鈣蛋白酶-1為水解肌原纖維的蛋白質(zhì),大量研究表明鈣蛋白酶-1參與肌原纖維裝配過程。Huff-Lonergan等[25]研究發(fā)現(xiàn),鈣蛋白酶系統(tǒng)會(huì)引起肌纖維蛋白不斷降解,造成肌原纖維小片化,導(dǎo)致細(xì)胞纖維之間形成滴水損失通道,引起大部分不易流動(dòng)水轉(zhuǎn)換為自由水,在重力作用下不斷流失,最終對(duì)灘羊肉的保水性造成影響。

        圖5 宰后灘羊成熟期間鈣蛋白酶-1活性的變化Fig.5 Changes in calpain-1 activity of Tan sheep meat during postmortem aging

        2.5 宰后灘羊成熟期間MFI的變化

        由圖6可知,MFI在宰后0~4 d內(nèi)迅速從111.93上升至165.93(P<0.05),但宰后4~8 d灘羊的MFI隨成熟時(shí)間的延長(zhǎng)并未發(fā)生顯著性變化(P>0.05)。這可能是因?yàn)樵缀蟪墒斐跗阝}蛋白酶-1的水解作用導(dǎo)致肌肉組織Z線結(jié)構(gòu)崩塌、肌鈣蛋白T消失、肌動(dòng)蛋白和結(jié)蛋白降解,進(jìn)而造成肌原纖維小片化[26],成熟后期由于鈣蛋白酶活性持續(xù)下降、不斷降解,肌肉組織結(jié)構(gòu)不再發(fā)生改變,因此MFI并未發(fā)生顯著變化。Delgado[27]和Veiseth[28]等的研究結(jié)果均表明羊肉的MFI上升主要發(fā)生在宰后初期,之后的上升速率和幅度并不明顯,這與本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果相似。灘羊超過90%的MFI增加量發(fā)生在宰后成熟的4 d內(nèi),即0~4 d內(nèi)灘羊肌纖維蛋白降解程度較高,肌纖維結(jié)構(gòu)遭到嚴(yán)重破壞,導(dǎo)致細(xì)胞纖維之間形成滴水損失通道,引起大部分不易流動(dòng)水轉(zhuǎn)換為自由水,在重力作用下不斷流失,最終對(duì)灘羊肉的保水性造成影響。

        圖6 宰后灘羊成熟期間MFI的變化Fig.6 Changes in MFI of Tan sheep meat during postmortem aging

        2.6 宰后灘羊成熟期間糖酵解指標(biāo)變化

        糖酵解是宰后肌肉細(xì)胞能量的主要來源。由圖7A可知,宰后0~8 d灘羊背最長(zhǎng)肌中ATP含量顯著下降(P<0.05)。這可能是因?yàn)闉┭蛟缀蟪墒炱陂g為保證細(xì)胞各項(xiàng)生命活動(dòng)正常進(jìn)行,ATP被快速消耗,雖然ATP和ADP時(shí)刻不停地發(fā)生相互轉(zhuǎn)化,但這僅能緩解短期內(nèi)的能量缺乏[29],糖酵解可以產(chǎn)生丙酮酸和ATP,但ATP發(fā)生水解可以生成H+,糖酵解的不斷進(jìn)行會(huì)導(dǎo)致H+大量堆積,最終導(dǎo)致肌肉pH值下降[30]。因此,ATP水平在宰后成熟期間呈持續(xù)降低趨勢(shì)。如圖7B所示,隨著成熟時(shí)間的延長(zhǎng)糖原含量呈持續(xù)下降趨勢(shì)(P<0.05),這是因?yàn)闉┭蛟缀髾C(jī)體內(nèi)氧氣供應(yīng)中斷,主要依靠糖酵解途徑分解糖原提供機(jī)體所需能量,本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果與田甲春等[31]的研究結(jié)果一致。如圖7C所示,宰后0~4 d葡萄糖含量顯著升高(P<0.05),并在4 d時(shí)達(dá)到最高(209.19 pg/mL),肌肉組織在宰后初期通過糖酵解將糖原轉(zhuǎn)化為葡萄糖以維持能量供應(yīng)。宰后4~8 d葡萄糖含量顯著下降(P<0.05),這是因?yàn)闄C(jī)體宰后受缺氧、缺血的刺激,加快了糖酵解進(jìn)程,導(dǎo)致糖原含量不足,為維持組織內(nèi)能量供應(yīng),進(jìn)一步消耗了組織中有限的能源物質(zhì)葡萄糖。本實(shí)驗(yàn)中灘羊背最長(zhǎng)肌葡萄糖含量變化規(guī)律與Bai Yuqiang等[32]的研究結(jié)果一致。如圖7D、E所示,宰后成熟期間,乳酸含量呈先上升后下降的趨勢(shì)(P<0.05),3 d時(shí)乳酸濃度達(dá)到最大,為11.89 μmol/mL;丙酮酸激酶活性呈顯著下降的趨勢(shì)(P<0.05),在8 d時(shí)降至最低,為0 d時(shí)的58%,這與高永芳等[33]的研究結(jié)果相似。丙酮酸可以在乳酸脫氫酶的催化下進(jìn)一步生成乳酸,最終造成乳酸的積累,成熟后期,糖酵解速率由于能源物質(zhì)供應(yīng)不足而逐漸減緩,導(dǎo)致乳酸含量開始不斷下降[34]。如圖7F所示,宰成熟期間乳酸脫氫酶活性呈先上升后下降的趨勢(shì)(P<0.05),這可能是因?yàn)樵缀蟪跗贏MPK活性的升高,提高了糖酵解過程中乳酸脫氫酶的活性,成熟后期pH值的下降則抑制了乳酸脫氫酶的活性,這與李澤[35]的研究結(jié)果一致。乳酸生成的過程可將還原型輔酶I(nicotinamide adenine dinucleotide,NADH)再生為NAD+,NAD+可進(jìn)一步被還原為NADH。該過程是糖酵解過程中唯一的氧化反應(yīng),而糖酵解的維持需要糖原和NAD+的再生[36]。因此,糖原含量、乳酸含量可以反映宰后肌肉糖酵解的程度,影響肉質(zhì)性狀。

        圖7 宰后灘羊成熟期間糖酵解指標(biāo)的變化Fig.7 Changes in glycolytic indexes of Tan sheep meat during postmortem aging

        2.7 宰后灘羊成熟期間糖酵解程度與保水性的相關(guān)性分析

        通過Pearson法算出糖酵解與保水性的相關(guān)性系數(shù),如圖8所示,pH值與滴水損失呈極顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01),與貯藏?fù)p失、離心損失呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05),而與T22、T23均呈顯著正相關(guān)(P<0.05);AT P 含量與滴水損失、離心損失呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05),與貯藏?fù)p失呈極顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01),與T21、T22、T23均呈顯著正相關(guān)(P<0.05,P<0.01);糖原與滴水損失呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05),與貯藏?fù)p失、離心損失呈極顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01),與T21、T22、T23均呈顯著正相關(guān)(P<0.05,P<0.01);乳酸含量與滴水損失呈高度顯著正相關(guān)(P<0.001),與貯藏?fù)p失、離心損失呈極顯著正相關(guān)(P<0.01),而與T21、T22、T23均無相關(guān)性;T23與滴水損失、貯藏?fù)p失和離心損失均呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05)。

        圖8 宰后灘羊成熟期間糖酵解程度與保水性的相關(guān)性Fig.8 Correlation between glycolysis and water-holding capacity of Tan sheep meat during postmortem aging

        相關(guān)性分析結(jié)果表明,灘羊肉宰后成熟過程中ATP含量的迅速降低可能加快了糖酵解進(jìn)程,從而促進(jìn)了糖原的消耗,引起乳酸的蓄積并降低肌肉pH值,導(dǎo)致蛋白質(zhì)對(duì)水的吸附能力降低,同時(shí),肌肉pH值的降低使鈣蛋白酶-1活力持續(xù)下降,促使肌原纖維不斷收縮,使不易流動(dòng)水向自由水轉(zhuǎn)化,導(dǎo)致肌肉中的水分在重力作用下不斷流失,引起灘羊肉滴水損失率、貯藏?fù)p失率與離心損失率升高。綜上所述,灘羊宰后糖酵解可能通過影響結(jié)構(gòu)蛋白對(duì)水分吸附、酶的活性及水分狀態(tài)的轉(zhuǎn)化從而影響保水性。

        3 結(jié)論

        灘羊肉4 ℃成熟過程中,其背最長(zhǎng)肌的滴水損失、貯藏?fù)p失呈先增大后減小的趨勢(shì);ATP、糖原含量持續(xù)下降;葡萄糖、乳酸含量呈上升后下降趨勢(shì);乳酸脫氫酶活性呈先增大后減小的趨勢(shì);丙酮酸激酶活性呈持續(xù)下降趨勢(shì)。灘羊肉宰后糖酵解過程迅速被激活,為保證細(xì)胞各項(xiàng)生命活動(dòng)正常進(jìn)行,能量物質(zhì)被快速消耗,引起糖酵解過程中的相關(guān)酶活性及代謝物含量發(fā)生改變,從而導(dǎo)致H+的不斷蓄積,使得肌肉pH值發(fā)生改變,一方面,肌肉pH值的降低使鈣蛋白酶-1活力持續(xù)下降,使得細(xì)胞纖維之間形成滴水損失通道,肌肉中的水分在重力作用下通過滴水損失通道不斷流失,引起灘羊肉滴水損失率、貯藏?fù)p失率與離心損失率發(fā)生改變。另一方面肌肉pH值的變化使得蛋白質(zhì)對(duì)水的吸附能力不斷發(fā)生改變,最終影響宰后灘羊肉的保水性。

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