馮玲 黃朝霞 秦樂樂 胡玉姍 張永勤

摘 要：肝血管瘤是常見的良性腫瘤之一，臨床上常采用柴胡疏肝散進行治療，但其具體的作用機制仍是未知的。本研究利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接方法，通過成分-靶點網(wǎng)絡(luò)圖分析得出關(guān)鍵靶點和成分信息，對關(guān)鍵靶點和成分進行分子對接，獲得相應(yīng)分子對接圖譜，并探討其作用機制。結(jié)果顯示，共獲得柴胡疏肝散活性成分142個，相對應(yīng)靶點269個，肝血管瘤疾病靶點351個，兩者共同交集靶點61個?；虮倔w（GO）功能富集有184條生物學(xué)過程，主要涉及轉(zhuǎn)錄因子活性、DNA結(jié)合及轉(zhuǎn)錄的正向調(diào)控。京都基因和基因組百科全書（KEGG）通路富集分析篩選得到138條信號通路，主要涉及PI3K-Akt、乙型肝炎、MAPK、AGE-RAGE等信號通路。分子對接結(jié)果顯示，AKT1蛋白與活性成分β-谷甾醇結(jié)合穩(wěn)定，VEGFA蛋白與活性成分槲皮素和異鼠李素均結(jié)合穩(wěn)定，ESR1和MAPK3分別與β-谷甾醇和柚皮素結(jié)合穩(wěn)定。柴胡疏肝散可能是通過槲皮素、異鼠李素、β-谷甾醇、山柰酚和柚皮素等活性成分作用于STAT3、AKT1、VEGFA、ESR1、MAPK3等靶點的，通過誘導(dǎo)血管新生、保護血管和肝細胞的活化等發(fā)揮治療肝血管瘤的作用，這為臨床上應(yīng)用柴胡疏肝散治療肝血管瘤提供了理論研究依據(jù)。

關(guān)鍵詞：柴胡疏肝散；肝血管瘤；網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)；分子對接；信號通路

中圖分類號：R285；R289. 5 文獻標(biāo)志碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1007-7146.2023.02.011

A Study on the Mechanism of Chaihu Shugan Powder in the Teatment of Hepatic Hemangioma Based on Network Pharmacology and

Molecular Docking

FENG Linga， HUANG Zhaoxiab， QIN Lelea， HU Yushana， ZHANG Yongqinb*

（Guizhou University of Traditional Chinese Medicine a. College of Pharmacy; b. College of Basic Medicine，

Guiyang 550025， China）

Abstract： Hepatic hemangioma is one of the common benign tumors， which is treated with Chaihu Shugan Powder in clinical， but its specific mechanism of action is still unknown. In this study， network pharmacology and molecular docking methods were used to obtain the information of key targets and components through the analysis of the compositional target network diagram， and molecular docking of key targets and components was carried out to obtain the corresponding molecular docking map and explore the mechanism of action. A total of 142 ingredients of Chaihu Shugan Powder were obtained， and 61 targets were intersections with hepatic hemangioma. There were 184 biological processes for gene ontology （GO） functional enrichment， which mainly involving transcription factor activity， DNA binding， and positive regulation of transcription. 138 signaling pathways were identified by Kyoto encyclopedia of genes and genomes （KEGG） pathway enrichment analysis， which mainly involve PI3K-Akt signaling pathway， Hepatitis B signaling pathway， MAPK signaling pathway， and AGE-RAGE signaling pathway， etc. Molecular docking showed that AKT1 protein was stable with β-sitosterol， VEGFA protein was stable with quercetin and isorhamnetin， ESR1 and MAPK3 were stable with β-sitosterol and naringin， respectively. The mechanism of Chaihu Shugan Powder in the treatment of hepatic hemangioma may be related to inducing angiogenesis and protecting the activation of blood vessels and liver cells， in which active ingredients such as quercetin， isorhamnetin， β-sitosterol， kaempferol and naringin， through act on targets such as STAT3， AKT1， VEGFA， ESR1 and MAPK3， which has provided theoretical reference for clinical aplication.

Key words： Chaihu Shugan Powder; hepatic hemangioma; network pharmacology; molecular docking; signal pathway

（Acta Laser Biology Sinica， 2023， 32（2）： 184-192）

肝血管瘤是臨床上較為常見的良性腫瘤，發(fā)病率為0.4%～20.0%［1］。肝血管瘤又名肝癥瘕，屬于中醫(yī)學(xué)癥瘕范疇，其病因常以氣滯血瘀者較多見，或因飲食失節(jié)、水濕不化、脾虛失運、痰滯脈絡(luò)與血氣相結(jié)聚積而成癥瘕［2］。目前，肝血管瘤的發(fā)病機制尚未完全清楚，一般認(rèn)為是由異常的血管生成和促血管生成因子的增加引起的肝內(nèi)血管生長異常［3］。西醫(yī)常采取手術(shù)切除、肝動脈結(jié)扎和放射治療等方法對此病進行治療，但許多患者因懼怕手術(shù)常求治于中醫(yī)。中醫(yī)臨床治療則常以行氣疏肝、活血化瘀、軟堅散結(jié)為主［4］。柴胡疏肝散出自于《景岳全書》，處方為柴胡和陳皮各二錢，川芎、芍藥、香附和枳殼各一錢半，炙甘草五分，具有活血止痛、疏肝行氣的功效。方中柴胡具有調(diào)肝散結(jié)的作用，為君藥；川芎行氣開郁，活血化瘀，香附疏肝理氣、解郁止痛，二者為臣藥；佐以枳殼、陳皮行滯理氣，白芍、甘草養(yǎng)血柔肝；甘草調(diào)和諸藥，兼作使藥。諸藥合用，主治肝氣郁結(jié)和氣滯血瘀證［5-6］。臨床研究發(fā)現(xiàn)，益氣化瘀法中的經(jīng)典方柴胡疏肝散對肝血管瘤具有良好的治療效果，能夠顯著降低患者肝血管瘤的大小［7］，但其治療的作用機制及其物質(zhì)基礎(chǔ)仍是未知的。

中藥網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是從整體角度研究中藥單藥或復(fù)方對疾病的作用機制，通過構(gòu)建中藥成分-靶點-疾病的相互作用關(guān)系網(wǎng)絡(luò)，揭示中藥復(fù)方多成分、多靶點、多通路共協(xié)同治療疾病的作用機理，為中藥復(fù)方治療疾病的物質(zhì)基礎(chǔ)和機制研究提供新的思路和方法［8］。分子對接技術(shù)能夠反應(yīng)一些小分子化合物與重要的相關(guān)蛋白的結(jié)合位點和結(jié)合能力，為小分子化合物在機體中的作用機制提供了良好的研究思路和方法［9］。為了進一步研究柴胡疏肝散治療肝血管瘤的作用機制，本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接技術(shù)探究柴胡疏肝散的有效成分和作用靶點及其治療肝血管瘤的調(diào)控機制，為臨床上應(yīng)用柴胡疏肝散治療肝血管瘤提供理論研究依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 鑒定柴胡疏肝散有效化合物作用靶點

根據(jù)口服生物利用度（oral bioavailability，OB）≥30%、類藥性（drug-likeness，DL） ≥0.18的標(biāo)準(zhǔn)，從中藥系統(tǒng)藥理學(xué)分析平臺TCMSP［10］（http：//tcmspw.com/tcmsp.php）檢索柴胡疏肝散（柴胡、陳皮、白芍、川芎、枳殼、香附、甘草）的有效化合物和蛋白靶點。篩選完成后，利用UniProt數(shù)據(jù)庫（https：//www.uniprot.org）將靶點轉(zhuǎn)換為標(biāo)準(zhǔn)基因名稱。

1.2 柴胡疏肝散治療肝血管瘤的作用靶點

在GeneCards數(shù)據(jù)庫（https：//www. genecards.org）和OMIM數(shù)據(jù)庫（http：//www. omim.org）中，以“hepatic hemangioma”為關(guān)鍵詞檢索治療肝血管瘤的潛在靶點。在Genecards數(shù)據(jù)庫中，靶點與疾病的聯(lián)系的密切性與Relevance score值成正相關(guān)，篩選Relevance score≥7的靶點，合并OMIM數(shù)據(jù)庫靶點后刪除重復(fù)值，得到肝血管瘤的作用靶點，將肝血管瘤蛋白靶點與柴胡疏肝散作用靶點利用在線網(wǎng)站venny2.1進行交集，得到柴胡疏肝散治療肝血管瘤的關(guān)鍵作用靶點。

1.3 構(gòu)建柴胡疏肝散活性成分與靶點網(wǎng)絡(luò)

利用Cytoscape 3.8.2軟件導(dǎo)入柴胡疏肝散有效成分和靶點及肝血管瘤疾病的相關(guān)靶點信息，構(gòu)建柴胡疏肝散治療肝血管瘤的“中藥-成分-靶點-疾病”網(wǎng)絡(luò)圖，然后利用CytoHubba插件分析網(wǎng)絡(luò)特征，利用“Analyze Network”的分析功能得出柴胡舒肝散治療肝血管瘤的重要活性成分。

1.4 構(gòu)建柴胡疏肝散治療肝血管瘤蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)

將柴胡疏肝散治療肝血管瘤的作用靶點導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫（https：//stringdb.org/），選擇物種為“Homo sapiens”，獲得交集蛋白靶點互作信息。將蛋白互作信息導(dǎo)入Cytoscape 3.8.2軟件構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（protein-protein interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)，并進行拓撲分析，篩選核心作用靶點。

1.5 基因本體（GO）功能富集分析和京都基因和基因組百科全書（KEGG）通路富集分析

利用DAVID平臺（https：//david. ncifcrf. gov）輸入柴胡疏肝散與肝血管瘤作用所得的交集靶點，對將柴胡疏肝散與肝血管瘤的相互作用靶點基因進行基因本體（gene ontology，GO）功能分析［如生物過程（biological process，BP）、分子功能（molecular function，MF）和細胞成分（cellular component，CC）分析］，以P<0.05為篩選條件，取排名前20的條目繪制氣泡圖。同時進行京都基因和基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）通路富集分析，以P<0.05為顯著富集篩選條件，得到柴胡疏肝散治療肝血管瘤的主要作用通路。根據(jù)P<0.05，選擇排名前20的信號通路繪制氣泡圖。

1.6 分子對接

從Protein Data Bank中下載拓撲分析中排名前5的核心蛋白，使用AutoDock Tools 1.5.7軟件對蛋白質(zhì)進行去水、氫化等處理。在TCMSP數(shù)據(jù)庫中根據(jù)柴胡舒肝散藥物成分，通過Pubchem（https：//pubchem. ncbi. nlm. nih. gov/）檢索InChIKey，獲得藥物活性成分3D結(jié)構(gòu)的SDF格式，使用OpenBabel 2.4.1進行mol2的格式轉(zhuǎn)換［11］。將處理好的蛋白質(zhì)與活性成分通過AutoDock Vina進行分子對接，利用Pymol 2.8.0對結(jié)果進行分析及可視化分析和處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 柴胡疏肝散有效成分收集及靶點預(yù)測

通過TCMSP平臺檢索，以O(shè)B≥30%、DL≥0.18為標(biāo)準(zhǔn)篩選出有效成分160個，其中柴胡17個、陳皮5個、白芍14個、川芎8個、枳殼5個、香附19個、甘草92個。本方以柴胡為君藥，香附、川芎為臣藥，陳皮、枳殼、芍藥、甘草均為佐藥，經(jīng)篩選合并重復(fù)成分后，共得到142種主要有效成分。通過檢索TCMSP平臺成功得到藥物靶標(biāo)，其中柴胡348個、陳皮95個、枳殼123個、川芎42個、香附465個、白芍389個、甘草1 764個，刪除靶點重復(fù)項后，最終得到269個藥物靶點。在柴胡疏肝散中部分化合物成分信息見表1。

2.2 肝血管瘤疾病相關(guān)靶點與柴胡疏肝散作用靶點的篩選

通過數(shù)據(jù)庫篩選共得到351個肝血管瘤相關(guān)靶點。與柴胡疏肝散作用物靶點進行交集，最終獲得61個柴胡疏肝散作用于肝血管瘤的靶點（圖1）。

2.3 柴胡疏肝散成分與靶點的網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及分析

通過Cytoscape 3.8.2軟件構(gòu)建“中藥-成分-靶點-疾病”網(wǎng)絡(luò)圖（圖2）。網(wǎng)絡(luò)圖中可以直觀地展示具體節(jié)點的拓撲學(xué)特征，也可以表現(xiàn)生物交互作用的一般特征。該圖共有142個藥物活性成分、61個交集靶點、7個藥物名稱和1個疾病名稱，表明柴胡疏肝散中有142個有效成分作用于肝血管瘤的靶點。

2.4 柴胡疏肝散治療肝血管瘤的關(guān)鍵靶蛋白

將數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape軟件中構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)圖，使用CytoHubba插件，選擇最大集團中心度（maximal clique centrality，MCC）方式進行核心靶點的提取，根據(jù)MCC score提取前10的靶點，它們分別是信號傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）、蛋白激酶1（serine/threonine kinase 1，AKT1）、血管內(nèi)皮生長因子A（vascular endothelial growth factor A，VEGFA）、雌激素受體1（estrogen receptor 1，ESR1）、絲裂原活化蛋白激酶3（mitogen activated protein kinases 3，MAPK3）、表皮生長因子受體（epithelial growth factor receptor，EGFR）、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）、白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、腫瘤抑制因子p53（cell tumor antigen p53，TP53）、過氧化物酶體增殖物激活受體γ（peroxisome proliferater activated receptor gama，PPARG）（圖3）。這10個靶蛋白可能就是柴胡疏肝散治療肝血管瘤的關(guān)鍵靶蛋白。

2.5 柴胡疏肝散治療肝血管瘤關(guān)鍵靶點的GO

與KEGG富集分析

GO分析共富集到184條生物學(xué)過程，其中BP為126條，CC為25條，MF為33條。KEGG通路富集分析共涉及138條信號通路。運用Omicshare在線工具，以P<0.05為閾值，對富集基因進行篩選，繪制富集氣泡圖。GO分析結(jié)果顯示，MF生物學(xué)過程主要包括轉(zhuǎn)錄因子活性、DNA結(jié)合、RNA聚合酶II核心啟動子近端區(qū)序列特異性DNA結(jié)合等條目；CC生物學(xué)過程主要包括核、細胞質(zhì)、質(zhì)膜的組成部分、核漿等條目；BP生物學(xué)過程主要包括轉(zhuǎn)錄的正向調(diào)控、RNA聚合酶II啟動子轉(zhuǎn)錄的負調(diào)控、蛋白激酶B信號的正向調(diào)控等條目（圖4a）。 KEGG通路富集結(jié)果顯示，Top 20信號通路中主要包括人類巨細胞病毒感染、癌癥蛋白聚糖、PI3K-Akt信號通路、脂質(zhì)和動脈粥樣硬化、乙型肝炎、MAPK信號通路、AGE-RAGE信號通路等（圖4b）。這說明，柴胡疏肝散可以通過多靶點多通路協(xié)調(diào)作用，從而發(fā)揮治療肝血管瘤的功效。

2.6 柴胡疏肝散部分活性成分與關(guān)鍵靶點的分子對接結(jié)果

網(wǎng)絡(luò)圖中度值排名前5的化合物分別是槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇、柚皮素和異鼠李素。將這些化合物與拓撲分析中排名前5的核心蛋白的晶體結(jié)構(gòu)進行分子對接，若結(jié)合能＜-5 kJ/mol，表明兩者具有較好的結(jié)合能力，結(jié)合結(jié)果如表2所示。分別將5個靶點所對應(yīng)結(jié)合能最高的化合物的分子對接結(jié)果進行2D圖展示，其中，β-谷甾醇能夠與AKT1的191號谷氨酸殘基結(jié)合，且結(jié)合能為-7.81 kJ/mol。此外，β-谷甾醇還能與ESR1具有較好的結(jié)合，其主要作用力為氫鍵和疏水作用。槲皮素與VEGFA的32位亮氨酸殘基具有良好的結(jié)合，且結(jié)合能為-6.21 kJ/mol，其主要作用力為離子鍵和疏水作用。異鼠李素與VEGFA的第50位蘇氨酸殘基具有良好的結(jié)合，且結(jié)合能為-6.74 kJ/mol，其主要作用力為離子鍵和氫鍵作用。柚皮素與STAT3的第438位亮氨酸殘基和第370位的賴氨酸殘基均具有良好的結(jié)合，且結(jié)合能為-5.83 kJ/mol，其主要作用力為離子鍵和疏水作用。山奈酚與MAPK3的第125位的甲硫氨酸殘基和第131位的賴氨酸殘基均具有良好的結(jié)合，且結(jié)合能為-6.42 kJ/mol，其主要作用力為離子鍵和疏水作用（圖5）。

3 討論

柴胡疏肝散具有疏肝理氣、活血化瘀的功效，臨床上常用于治療心血管疾病、阿爾茨海默癥、功能性消化不良以及婦科類疾?。?2-14］。臨床研究發(fā)現(xiàn)，柴胡疏肝散可通過調(diào)節(jié)IRE-1α/NF-κB通路抑制過度的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激來調(diào)節(jié)肝臟脂質(zhì)代謝紊亂，減輕肝臟炎性反應(yīng)，防止非酒精性脂肪性肝炎（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）的進展［15］。柴胡疏肝散已廣泛應(yīng)用于肝臟疾病的治療。為了深入研究柴胡疏肝散治療肝血管瘤的作用機制，本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接方法，借助多個數(shù)據(jù)庫收集，得到柴胡疏肝散中142個成分和其對應(yīng)的269個靶點，根據(jù)OB和DL參數(shù)篩選出61個靶點與肝血管瘤相關(guān)。

本研究通過“中藥-成分-靶點-疾病”相互作用網(wǎng)絡(luò)分析發(fā)現(xiàn)，槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇、柚皮素和異鼠李素有較高的度值，其中槲皮素的度值最高，其主要來自柴胡、香附和甘草3味藥材。在肝臟疾病領(lǐng)域，槲皮素對肝臟具有清除自由基、抗氧化、抗乙肝病毒、抗肝癌、抗肝纖維化、保護肝損傷等藥理作用，是許多治療肝臟疾病中藥材的有效活性成分［16］。研究發(fā)現(xiàn)，槲皮素可通過上調(diào)IL-10和HO-1的表達抑制NLRP3炎癥小體激活和炎癥因子的分泌，進而發(fā)揮對急性酒精性肝損傷的保護作用［17］。柴胡、白芍、香附、甘草4味藥材中均含有山奈酚。山奈酚對四氯化碳引起的小鼠急性肝損傷具有保護作用，可顯著縮小肝細胞壞死和炎癥細胞浸潤的范圍并降低其對細胞的損害程度［18］。β-谷甾醇是柴胡疏肝散中白芍和枳殼2味藥材均含有的成分，研究表明，β-谷甾醇能抑制血清中酒精引起的生化指標(biāo)的變化，減輕酒精引起的氧化應(yīng)激，減少谷胱甘肽消耗，恢復(fù)紅細胞膜的流動性和抗氧化酶活性，減少丙二醛的過度產(chǎn)生，還可以通過PI3K/Akt通路下調(diào)凋亡相關(guān)基因的表達［19］。柚皮素能夠改善氧化應(yīng)激和胰島素抵抗，減少炎癥反應(yīng)，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、脂肪酸氧化，減少細胞凋亡，在肥胖癥和NAFLD的治療方面具有顯著的藥理作用［20］。異鼠李素是從天然植物中提取的一種黃酮物質(zhì)，現(xiàn)有研究表明，其具有良好的抗氧化、抗炎、保肝等作用［21］。

本研究通過PPI網(wǎng)絡(luò)拓撲學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，排名前5位的核心靶點分別為STAT3、AKT1、VEGFA、ESR1、MAPK3。在肝細胞中，STAT3可促進肝細胞再生，有助于肝臟的修復(fù)，但是STAT3的過表達會導(dǎo)致肝血管的過度增生，誘導(dǎo)肝血管內(nèi)皮細胞活化異常，誘發(fā)肝臟癌變［22］。AKT1參與調(diào)節(jié)機體細胞增殖、凋亡以及血管生成等多個生理生化過程。AKT1的缺失可完全阻止小鼠誘導(dǎo)的肝細胞癌形成，調(diào)節(jié)AKT1誘導(dǎo)血管新生，保護血管，從而改善肝血管瘤［23-24］。而VEGFR作為血管生成的重要調(diào)控因子，在肝血管瘤中具有重要的作用。VEGFR通路可能是肝血管瘤的最佳治療靶點［25-26］。ESR1是一種蛋白質(zhì)編碼基因，與其相關(guān)的疾病包括雌激素抵抗和乳腺癌［27］。臨床發(fā)現(xiàn)，女性較男性發(fā)病率高的原因是女性雌激素分泌過過多會導(dǎo)致肝臟雌激素異常，從而導(dǎo)致肝血管瘤的發(fā)生［28］。從KEGG通路富集中可知，柴胡疏肝散治療肝血管瘤可能通過PI3K-Akt、乙型肝炎、MAPK等關(guān)鍵通路發(fā)揮作用。通過分子對接技術(shù)發(fā)現(xiàn)，β-谷甾醇、異鼠李素、山奈酚、柚皮素和槲皮素能夠與STAT3具有較好的結(jié)合能力，在肝細胞中，STAT3的過表達會導(dǎo)致肝血管過度增生，誘導(dǎo)肝血管內(nèi)皮細胞活化異常，誘發(fā)肝臟癌變［29］。因此我們推測，β-谷甾醇、異鼠李素、山奈酚、柚皮素和槲皮素能夠調(diào)控STAT3的表達，進而抑制肝血管的內(nèi)皮細胞活化異常。槲皮素、異鼠李素、β-谷甾醇、柚皮素和山奈酚均能夠與VEGFR蛋白具有較好的結(jié)合能力。VEGFR作為生長因子誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細胞的增殖和遷移，是生理和病理血管生成所必需的［30］。在肝血管瘤的研究中，有學(xué)者認(rèn)為，血管瘤的增生是由血管膨脹、擴張以及血管內(nèi)皮細胞增生異常導(dǎo)致的［4，31-32］。因此我們推測，柴胡疏肝散可能通過槲皮素、異鼠李素、β-谷甾醇和柚皮素調(diào)控VEGFR通路抑制肝血管瘤的增生，進而改善肝血管瘤。β-谷甾醇與ESR1具有良好的結(jié)合位點，因此我們推測，在治療肝血管瘤的過程中，柴胡疏肝散可能通過β-谷甾醇等小分子化合物調(diào)控ESR1相關(guān)通路，進而改善肝血管瘤。此外，β-谷甾醇、山奈酚、異鼠李素、柚皮素和槲皮素均與MAPK3具有良好的結(jié)合位點和能力，而β-谷甾醇、異鼠李素、槲皮素、柚皮素和山奈酚均能夠很好地結(jié)合AKT1。在肝血管瘤研究中，PI3K-Akt和MAPK信號通路在肝血管瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中具有重要的作用。MAPK信號通路可通過調(diào)控肝血管內(nèi)皮細胞的增殖和分化來調(diào)控肝細胞和肝血管內(nèi)皮細胞的生長發(fā)育；MAPK3在肝細胞的增殖、遷移和侵襲中具有重要的作用［33］。因此我們推測，柴胡疏肝散可能通過山奈酚、柚皮素、異鼠李素和β-谷甾醇等小分子化合物調(diào)控PI3K-Akt和MAPK信號通路，促進肝細胞以及肝血管內(nèi)皮細胞的增殖和分化，進而達到改善肝血管瘤的目的。

綜上所述，本研究利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接技術(shù)，初步探討了柴胡疏肝散多成分、多靶點、多通路協(xié)同增效治療肝血管瘤的作用機制。柴胡疏肝散可能是通過槲皮素、異鼠李素、β-谷甾醇、山柰酚和柚皮素等活性成分作用于STAT3、AKT1、VEGFA、ESR1、MAPK3等靶點來參與多通路的調(diào)控，通過誘導(dǎo)血管新生、保護血管和肝細胞的活化等發(fā)揮治療肝血管瘤的作用。該研究為柴胡疏肝散治療肝血管瘤的相關(guān)靶點及通路的進一步驗證、柴胡疏肝散新功能的發(fā)現(xiàn)以及治療肝血管瘤新藥的開發(fā)提供了一定的參考依據(jù)，同時為深入開發(fā)柴胡疏肝散提供了方法學(xué)支撐，也為后續(xù)的基礎(chǔ)機制研究奠定了基礎(chǔ)。但本研究僅從網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接層面來探究柴胡疏肝散抗肝血管瘤作用的有效活性成分及作用靶點，存在一定的局限，因此，在后續(xù)的研究中將進行分子生物學(xué)驗證，并結(jié)合體內(nèi)外試驗進行進一步的驗證。

參考文獻（References）：

［1］ 王學(xué)軍， 胡 晟， 陳軼暉， 等. 肝血管瘤治療研究進展［J］. 現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生， 2022， 38（16）： 2808-2813.

WANG Xuejun， HU Sheng， CHEN Yihui， et al. Advances in the treatment of hepatic hemangioma ［J］. Modern Medicine & Hygiene， 2022， 38（16）： 2808-2813.

［2］ 關(guān)利君， 馬和平， 張學(xué)軍. 肝血管瘤的臨床治療進展［J］. 內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志， 2008， 4（4）： 454-456.

GUAN Lijun， MA Heping， ZHANG Xuejun. Clinical progress in the treatment of hepatic hemangioma ［J］. Inner Mongolia Medical Journal， 2008， 4（4）： 454-456.

［3］ 黃紀(jì)偉， 朱則昕， 廖明恒， 等. 肝血管瘤的診療現(xiàn)狀［J］. 中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志， 2016， 23（2）： 143-146.

HUANG Jiwei， ZHU Zexin， LIAO Mingheng， et al. Diagnosis and treatment of hepatic hemangioma ［J］. Chinese Journal of General Surgery Basic and Clinical， 2016， 23（2）： 143-146.

［4］ 陳孝平， 夏 鋒， 李雪松. 肝血管瘤診斷和治療多學(xué)科專家共識 （2019版）［J］. 臨床肝膽病雜志， 2019， 35（9）： 1928-1932.

CHEN Xiaoping， XIA Feng， LI Xuesong. Multidisciplinary expert consensus on diagnosis and treatment of hepatic hemangioma （2019 edition）［J］. Journal of Clinical Hepatobiliary Diseases， 2019， 35（9）： 1928-1932.

［5］ 倪新強， 曹美群， 吳正治， 等. 柴胡疏肝散的化學(xué)成分和藥理作用研究進展［J］. 上海中醫(yī)藥雜志， 2017， 51（9）： 109-113.

NI Xinqiang， CAO Meiqun， WU Zhengzhi， et al. Research progress on chemical constituents and pharmacological effects of Chaihu Shugan Powder ［J］. Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine， 2017， 51（9）： 109-113.

［6］ 張宏武， 鄒忠梅. 柴胡疏肝散的臨床應(yīng)用及現(xiàn)代研究進展［J］. 時珍國醫(yī)國藥， 2007， 140（5）： 1234-1236.

ZHANG Hongwu， ZOU Zhongmei. Clinical application and modern research progress of Chaihu Shugan Powder ［J］. Lishzhen Medicine and Materia Medica Research， 2007， 140（5）： 1234-1236.

［7］ 胡子生. 疏肝化瘀散結(jié)湯治療肝血管瘤7例［J］. 湖北中醫(yī)雜志， 1995， 3（3）： 38.

HU Zisheng. Treatment of 7 cases of hepatic hemangioma with Shuggan Huayu Sanjie Decoction ［J］. Hubei Journal of Traditional Chinese Medicine， 1995， 3（3）： 38.

［8］ LUO T， LU Y， YAN S， et al. Network pharmacology in research of Chinese medicine formula： methodology， application and prospective ［J］. Chinese Journal of Integrative Medicine， 2019， 26（1）： 72-80.

［9］ SAIKIA S， BORDOLOI M. Molecular docking： challenges， advances and its use in drug discovery perspective ［J］. Current Drug Targets， 2019， 20（5）： 501-521.

［10］ RU J， LI P， WANG J， et al. TCMSP： a database of systems pharmacology for drug discovery from herbal medicines ［J］. Journal of Cheminformatics， 2014， 16（6）： 13.

［11］ LIU W， FAN Y， TIAN C， et al. Deciphering the molecular targets and mechanisms of HGWD in the treatment of rheumatoid arthritis via network pharmacology and molecular docking［J］. Evidence-based Complementary and Alternative Medicine， 2020， 26： 7151634.

［12］ 張 喆， 趙靜潔， 王永志， 等. 柴胡疏肝散藥理作用及機制研究進展［J］. 中國中醫(yī)藥信息雜志， 2017， 24（9）： 128-131.

ZHANG Zhe， ZHAO Jingjie， WANG Yongzhi， et al. Advances in pharmacological action and mechanism of Chaihu Shugan Powder［J］. China Information Journal of Traditional Chinese Medicine， 2017， 24（9）： 128-131.

［13］ 梁瀞云， 唐 燕， 司馬玲， 等.柴胡疏肝散在肝臟疾病中的應(yīng)用研究進展［J］. 陜西中醫(yī)， 2022， 43（11）： 1651-1653.

LIANG Jingyun， TANG Yan， SIMA Ling， et al. Application of Chaihu Shugan Powder in liver diseases ［J］. Shaanxi Journal of Traditional Chinese Medicine， 2022， 43（11）： 1651-1653.

［14］ 譚奚揚， 陳曉云， 談欣怡， 等. 柴胡疏肝散治療代謝相關(guān)脂肪性肝病的網(wǎng)絡(luò)機制研究［J］. 世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化， 2021， 23（11）： 4058-4071.

TAN Xiyang， CHEN Xiaoyun， TAN Xinyi， et al. Study on network mechanism of Chaihu Shugan Powder in the treatment of metabolism-related fatty liver disease ［J］. World Science and Technology-Modernization of Traditional Chinese Medicine， 2021， 23（11）： 4058-4071.

［15］ 白 鈺， 陳永燦， 趙 樂， 等. 柴胡疏肝散對非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝臟IRE-1α/NF-κB通路的影響［J］. 中華中醫(yī)藥雜志， 2018， 33（6）： 2592-2596.

BAI Yu， CHEN Yongcan， ZHAO Le， et al. Effect of Chaihu Shugan Powder on IRE-1α/NF-κB pathway in liver of rats with nonalcoholic steatohepatitis ［J］. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine， 2018， 33（6）： 2592-2596.

［16］ 張 娟， 毛文靜， 白慶云. 槲皮素及其衍生物防治肝損傷作用及機制的研究進展［J］. 中草藥， 2021， 52（23）： 7348-7357.

ZHANG Juan， MAO Wenjin， BAI Qinyun. Research progress on the effect and mechanism of quercetin and its derivatives in preventing and treating liver injury ［J］. Chinese Herbal Medicine， 2021， 52（23）： 7348-7357.

［17］ LIU S， TIAN L， CHAI G， et al. Targeting heme oxygenase-1 by quercetin ameliorates alcohol-induced acute liver injury via inhibiting NLRP3 inflammasome activation ［J］. Food & Function， 2018， 9（8）： 4184-4193.

［18］ 童方念， 羅 超， 羅 丹， 等. 山奈酚對四氯化碳致小鼠急性肝損傷的保護作用［J］. 西安交通大學(xué)學(xué)報 （醫(yī)學(xué)版）， 2014， 35（6）： 816-819.

TONG Fannian， LUO Chao， LUO Dan， et al. Protective effect of kaferol on acute liver injury induced by carbon tetrachloride in mice ［J］. Journal of Xian Jiaotong University （Medical Edition）， 2014， 35（6）： 816-819.

［19］ CHEN Z， WU A， JIN H， et al. β-Sitosterol attenuates liver injury in a rat model of chronic alcohol intake ［J］. Archives of Pharmacal Research， 2020， 43（11）： 1197-1206.

［20］ 季 鵬， 趙文明， 于 桐. 柚皮素的最新研究進展［J］. 中國新藥雜志， 2015， 24（12）： 1382-1386， 1392.

JI Peng， ZHAO Wenming， YU Tong. Recent research progress of naringin ［J］. Chinese Journal of New Medicine， 2015， 24（12）： 1382-1386， 1392.

［21］ 滕 丹， 欒新堯. 異鼠李素的藥效學(xué)研究進展［J］. 中醫(yī)藥臨床雜志， 2016， 28（4）： 593-596.

TENG Dan， LUAN Xinyao. Research progress on pharmacodynamics of isorhamnetin ［J］. Clinical Journal of Traditional Chinese Medicine， 2016， 28（4）： 593-596.

［22］ XIONG J， WANG C， CHEN H， et al. Aβ-induced microglial cell activation is inhibited by baicalin through the JAK2/STAT3 signaling pathway ［J］. International Journal of Neuroscience， 2014， 124（8）： 609-620.

［23］ XU Z， XU M， LIU P， et al. The mTORC2-Akt1 cascade is crucial for c-Myc to promote hepatocarcinogenesis in mice and humans［J］. Hepatology， 2019， 70（5）： 1600-1613.

［24］ KOU K， CHEN Y， ZHOU J， et al. Hepatic epithelioid hemangioendothelioma： update on diagnosis and therapy ［J］. World Journal of Clinical Cases， 2020， 8（18）： 3978-3987.

［25］ MELINCOVICI C S， BOSCA A B， ?U?MAN S， et al. Vascular endothelial growth factor （VEGF） - key factor in normal and pathological angiogenesis ［J］. Romanian Journal of Morphology and Embryology， 2018， 59（2）： 455-467.

［26］ TELLI T A， OKTEN I N， TUYLU T B， et al. VEGF-VEGFR pathway seems to be the best target in hepatic epithelioid hemangioendothelioma： a case series with review of the literature ［J］. Current Problems in Cancer， 2020， 44（5）：100568.

［27］ ZHENG L，WEN X， DAI Y. Mechanism of Jianpi Qingchang Huashi Recipe in treating ulcerative colitis： a study based on network pharmacology and molecular docking ［J］. World Journal of Clinical Cases， 2021， 9（26）： 7653-7670.

［28］ LEON M， CHAVEZ L， SURANI S. Hepatic hemangioma： what internists need to know ［J］. World Journal of Gastroenterology， 2020， 26（1）： 11-20.

［29］ ZHAO J， QI Y， YU Y. STAT3： a key regulator in liver fibrosis ［J］. Annals of Hepatology， 2021， 21： 100224.

［30］ WALLACE S J， TACKE F， SCHWABE R F， et al. Understanding the cellular interactome of non-alcoholic fatty liver disease ［J］. JHEP Reports ： Innovation in Hepatology， 2022， 4（8）： 100524.

［31］ 張宗利， 黃建成， 王慶良， 等. 152例肝血管瘤的臨床治療分析［J］. 中國現(xiàn)代普通外科進展， 2011， 14（4）： 281-285.

ZHANG Zongli， HUANG Jiangcheng， WANG Qinglian， et al. Clinical analysis of 152 cases of hepatic hemangioma ［J］. Advances in Chinese Modern General Surgery， 2011， 14（4）： 281-285.

［32］ FANG Y， YAN D， WANG L， et al. Circulating microRNAs （miR-16， miR-22， miR-122） expression and early diagnosis of hepatocellular carcinoma ［J］. Journal of Clinical Laboratory Analysis， 2022， 36（7）： e24541.

［33］ KASSOUF T， SUMARA G. Impact of conventional and atypical MAPKs on the development of metabolic diseases［J］. Biomolecules， 2020， 10（9）： 1256.

收稿日期：2022-12-12；修回日期：2022-12-30。

基金項目：國家自然科學(xué)基金項目（82160167）；貴州省科技計劃項目（黔科合基礎(chǔ)-ZK［2022］一般509）；貴州省衛(wèi)健委項目（gzwkj2022258）；貴中醫(yī)博士啟動基金項目（3043-043200006，3043-043190090）。

作者簡介：馮玲，講師，主要從事中藥資源方面的研究。

* 通信作者：張永勤，講師，主要從事中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)及自身免疫性疾病防治方面的研究。E-mail： zhangyongqin044@gzy.edu.cn。