◎ 王思媛，段鵬雪，王婷婷，齊 剛

（慶陽(yáng)市疾病預(yù)防控制中心，甘肅 慶陽(yáng) 745000）

甘草杏是慶陽(yáng)市的地方特色產(chǎn)品，酸甜爽口，清香味長(zhǎng)，是天然健康食品，其既具有清熱解毒、潤(rùn)肺止咳的功效，又可補(bǔ)脾益氣[1]，適合各年齡段的人食用。為了延長(zhǎng)甘草杏的保質(zhì)期，提升口感，常常加入食品添加劑，以保持食品的新鮮度，但使用過量添加劑會(huì)影響人體新陳代謝，甚至危害人體健康[2-3]。

本文以甘草杏為研究對(duì)象，建立了用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定甘草杏中苯甲酸、山梨酸、安賽蜜和糖精鈉的方法，對(duì)慶陽(yáng)市售的30 份甘草杏中4 種添加劑的含量進(jìn)行了測(cè)定，以評(píng)價(jià)其添加劑使用量是否在食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)允許范圍內(nèi)，旨在促使相關(guān)市場(chǎng)監(jiān)督管理部門知悉甘草杏中防腐劑和甜味劑的使用情況[4]。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 樣品

慶陽(yáng)市地方產(chǎn)品甘草杏30 份，購(gòu)于當(dāng)?shù)爻小?/p>

1.1.2 儀器與設(shè)備

安捷倫1200 高效液相色譜儀，配二極管陣列檢測(cè)器；eppendorf 5910r 高速冷凍離心機(jī)；Milli-Q 超純水系統(tǒng)；SB5200DTDN 超聲波儀；QILINBEIER 渦旋混合儀。

1.1.3 試劑

食品防腐劑苯甲酸溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）100006；食品防腐劑山梨酸溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）100007；食品甜味劑糖精鈉溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）100008；食品甜味劑乙?；前匪徕洠ò操惷郏┤芤簶?biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）100171；分析檢測(cè)用質(zhì)控樣品蜜餞中山梨酸、苯甲酸、糖精鈉P28487B；甲醇（色譜純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；乙酸銨（分析純，煙臺(tái)市雙雙化工有限公司）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品處理

取甘草杏可食部分經(jīng)料理機(jī)混勻后，稱取2.5 g 均勻試樣置于50 mL 尖底離心管中，加入30 mL 超純水。渦旋混勻120 s，超聲提取60 min，在4 ℃條件下，以4 500 r·min-1離心5 min，上清液過0.45 μm 水系濾膜，待測(cè)。

1.2.2 色譜條件

色譜柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18（250×4.6 mm，5 μm）；柱溫25 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm；進(jìn)樣量10 μL；流速1.0 mL·min-1。流動(dòng)相為甲醇-乙酸銨溶液（5∶95）。

1.2.3 樣品測(cè)定

根據(jù)1.2.1 中的前處理方法，樣品待測(cè)液按照1.2.2中的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的濃度及相應(yīng)的峰面積得出回歸方程，根據(jù)回歸方程計(jì)算待測(cè)物的濃度。試樣中安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉含量的計(jì)算公式如下：

式中：X為樣品中安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉含量，g·kg-1；C為從曲線上查出樣品中安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的濃度，mg·L-1；V為樣品稀釋體積，mL；m為樣品質(zhì)量，g。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜行為

將安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行上機(jī)測(cè)定。結(jié)果顯示，在吸收波長(zhǎng) 230 nm 處，4 種添加劑響應(yīng)、峰型、分離度均較好，色譜圖見圖1。

圖1 安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)液相色譜圖

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限

4 種添加劑的線性回歸方程結(jié)果見表 1，標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)r均大于0.999 9。以3 倍信噪比計(jì)算方法的檢出限（3S/N），檢出限滿足實(shí)驗(yàn)要求。

表1 線性參數(shù)和檢出限表

2.3 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

向樣品中加入一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.2.1中的前處理方法制備樣品，做加標(biāo)回收試驗(yàn)，結(jié)果見表2。4 種化合物的平均回收率在88%～110%，表明所建立分析方法的準(zhǔn)確度滿足檢測(cè)要求。

表2 回收率測(cè)定值表

2.4 精密度實(shí)驗(yàn)

取甘草杏樣品（經(jīng)測(cè)定，含有安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉），以1.2.1 的操作條件重復(fù)進(jìn)樣測(cè)定7 次，計(jì)算出各添加劑的含量，然后計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），結(jié)果見表3。

表3 精密度結(jié)果表（n=7）

由表3 可知，RSD 為0.72%～3.94%，說明該方法的精密度良好，滿足食品中安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉的測(cè)定要求。

3 結(jié)語(yǔ)

本研究建立了同時(shí)測(cè)定甘草杏中安賽蜜、苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的方法，對(duì)慶陽(yáng)市售甘草杏中4 種添加劑含量進(jìn)行檢測(cè)，并進(jìn)行了線性、精密度、準(zhǔn)確度的方法學(xué)驗(yàn)證，驗(yàn)證結(jié)果均符合要求，證明該方法準(zhǔn)確有效。經(jīng)過對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)分析，結(jié)果顯示，30 份甘草杏樣品中均檢出添加劑，檢出率為100%。其中，安賽蜜檢出30 份，檢出含量為0.008～0.294 g·kg-1；苯甲酸檢出25 份，檢出含量為0.005～0.319 g·kg-1；山梨酸檢出30 份，檢出含量為0.053～0.315 g·kg-1；糖精鈉檢出29 份，檢出含量為0.010～0.386 g·kg-1。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 2760—2014《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》[5]規(guī)定，蜜餞中苯甲酸、山梨酸的使用限量值為0.5 g·kg-1，糖精鈉為1.0 g·kg-1，安賽蜜為0.3 g·kg-1。因此，本實(shí)驗(yàn)中30 份樣本的合格率為100%，符合食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。