杜 秋， 周 曉， 覃業(yè)優(yōu)， 胡嘉亮， 劉 洋， 蔣立文*

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410128；2.湖南壇壇香食品科技有限公司，湖南 瀏陽(yáng) 410300）

聯(lián) 合 國(guó) 糧 農(nóng) 組 織 （FAO）、 世 界 衛(wèi) 生 組 織（WHO）、國(guó)際益生菌和益生元科學(xué)協(xié)會(huì)（ISAPP）以及國(guó)際乳業(yè)聯(lián)盟（IDF）對(duì)益生菌給出了定義：益生菌是活的微生物，當(dāng)攝入足夠數(shù)量時(shí)，對(duì)宿主的健康產(chǎn)生益處[1]。 因此，益生菌應(yīng)具備足夠數(shù)量、活菌狀態(tài)和有益健康功能這三大特征[2]。 2003 年，F(xiàn)AO/WHO 提出了一套評(píng)價(jià)食品用益生菌的系統(tǒng)方法指南《食品中益生菌評(píng)價(jià)指南》，制定了益生菌的基本標(biāo)準(zhǔn)[3]；2022 年中國(guó)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)會(huì)（CIFST）發(fā)布的《食品用益生菌通則》（以下簡(jiǎn)稱(chēng)通則），明確規(guī)定食品用益生菌活菌數(shù)應(yīng)大于（或等于）1×108CFU/mL或1×108CFU/g，并定義了食品用益生菌為可用于食品中的一種或多種益生菌，經(jīng)發(fā)酵、富集、干燥或不干燥、混合或不混合、包裝等工序制成的食品原料[4]。 通則對(duì)食品用益生菌的評(píng)價(jià)要求進(jìn)行了系統(tǒng)的闡述，要求應(yīng)在菌株水平進(jìn)行鑒定、安全評(píng)價(jià)和健康作用評(píng)價(jià)[5]。

乳酸菌（lactic acid bacterium，簡(jiǎn)稱(chēng)LAB）來(lái)源廣泛，隨著對(duì)大健康的重視，植物源乳酸菌已引起業(yè)內(nèi)的關(guān)注[6]。 傳統(tǒng)發(fā)酵蔬菜是以蔬菜為原料，利用微生物自然發(fā)酵的冷加工食品[7]。 在我國(guó)不同地區(qū)有著豐富的傳統(tǒng)發(fā)酵蔬菜制品[8]。 已有研究發(fā)現(xiàn)，不同地區(qū)的發(fā)酵蔬菜的微生物組成群落存在顯著差異，但其優(yōu)勢(shì)細(xì)菌菌群主要為乳酸菌[9]。 因此，傳統(tǒng)發(fā)酵蔬菜為植物源益生乳酸菌篩選提供了強(qiáng)大的資源庫(kù)[10]。 由于植物源乳酸菌分離難度低、容易獲得[11]，且植物源乳酸菌與動(dòng)物源乳酸菌對(duì)胃腸液具有類(lèi)似的抗性[12]，所以對(duì)發(fā)酵蔬菜源益生乳酸菌的研究已成為該產(chǎn)業(yè)的一個(gè)熱點(diǎn)。 目前，國(guó)外對(duì)發(fā)酵蔬菜中益生菌研究較多的是韓國(guó)泡菜[13-14]，而我國(guó)研究較多的是四川泡菜、東北酸菜[15]，而其他地區(qū)的報(bào)道相對(duì)較少。 作者從不同地區(qū)自制的傳統(tǒng)發(fā)酵蔬菜中分離乳酸菌，對(duì)傳統(tǒng)發(fā)酵蔬菜源乳酸菌進(jìn)行了系統(tǒng)益生性評(píng)價(jià)及鑒定，并分析了益生特性降膽固醇能力，旨在開(kāi)發(fā)符合食品用益生菌要求的發(fā)酵蔬菜源益生乳酸菌。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 樣品湖南剁辣椒、湖南芥菜、云南剁辣椒、廣西發(fā)酵酸筍等共計(jì)17 個(gè)樣品。

1.1.2 對(duì)照菌株 （RW）融合魏斯氏菌（Weissella confusa） CWY578262：革蘭氏陽(yáng)性，過(guò)氧化氫酶陰性，顯微鏡下呈短桿狀或球狀，具有益生菌的基本特性，還具有富產(chǎn)胞外多糖的特性[16]。

1.1.3 CaCO3-MRS 瓊脂培養(yǎng)基MRS 瓊脂培養(yǎng)基1 L、CaCO3（質(zhì)量濃度25 g/L）、pH 6.5，121 ℃高壓蒸汽滅菌20 min。

1.1.4 MRS-CHOL 肉湯培養(yǎng)基蔗糖酯0.1 g，膽固醇0.1 g，牛膽鹽0.2 g，吐溫80 1 mL，加冰乙酸5 mL，攪拌均勻，超聲溶解趁熱過(guò)0.45 μm 濾膜到1 L MRS 肉湯培養(yǎng)基中，pH 6.0～7.0，121 ℃高壓蒸汽滅菌20 min。

1.1.5 氨基酸脫羧酶培養(yǎng)基MRS 瓊脂培養(yǎng)基1 L，組氨酸、酪氨酸、賴(lài)氨酸、精氨酸、鳥(niǎo)氨酸等1 g/L，溴甲酚紫0.06 g/L，pH 5.5～6.5，121 ℃高壓蒸汽滅菌20 min[17]。

1.1.6 試劑膽固醇、蔗糖酯、抗生素：源葉生物科技有限公司；鄰苯二甲醛、組氨酸、酪氨酸、鳥(niǎo)氨酸、精氨酸、賴(lài)氨酸：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；MRS肉湯培養(yǎng)基、MRS 瓊脂培養(yǎng)基、PCA 瓊脂培養(yǎng)基：廣東環(huán)凱微生物科技有限公司； 胃蛋白酶（酶活250 U/mg）、胰酶（酶活250 U/mg）：南京都萊生物技術(shù)有限公司；牛膽鹽：上海麥克林生化科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

DHP120 恒溫培養(yǎng)箱： 上海實(shí)驗(yàn)儀器廠有限公司；HY45 恒溫?fù)u床： 深圳匯成科技有限公司；LDZX-50KBS 立式高壓滅菌鍋：上海申安醫(yī)療器械有限公司；CX23 光學(xué)顯微鏡： 日本Olympus 公司；ReadMax 1900 光吸收型全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀：上海閃譜生物科技有限公司；TG16-WS 臺(tái)式高速離心機(jī)： 湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開(kāi)發(fā)有限公司。

1.3 乳酸菌的分離鑒定

1.3.1 乳酸菌的分離及形態(tài)學(xué)鑒定取10 g 樣品加入90 mL 無(wú)菌生理鹽水中，搖勻后取適宜梯度稀釋液100 μL 均勻涂布于CaCO3-MRS 瓊脂培養(yǎng)基上，37 ℃倒置培養(yǎng)3 d。選取不同菌落形態(tài)且溶鈣圈較大的單菌落劃線至MRS 固體培養(yǎng)基上， 反復(fù)劃線純化，通過(guò)革蘭氏染色篩選出符合乳酸菌條件的菌株。 初篩得到的乳酸菌保存于含體積分?jǐn)?shù)40%甘油的MRS 肉湯培養(yǎng)基中，于-20 ℃冷凍保存。

1.3.2 乳酸菌耐酸耐膽鹽能力參考劉璐等的方法加以修改[18]，將傳代3 代的實(shí)驗(yàn)菌株以體積分?jǐn)?shù)3%分別接種于pH 值為2.0、質(zhì)量濃度為3 g/L 牛膽鹽的MRS 肉湯培養(yǎng)基中，立即取樣測(cè)600 nm 處的吸光度， 剩余混合液于37 ℃、120 r/min 振蕩培養(yǎng)，12 h 時(shí)取樣，測(cè)定600 nm 處的吸光度A1，存活率按式（1）計(jì)算。

式中：R1為菌株耐酸/耐膽鹽存活率，%；A1為12 h樣品的吸光度；A0為0 h 樣品的吸光度。

1.4 乳酸菌的生物特性評(píng)價(jià)

1.4.1 對(duì)條件致病菌的拮抗活性用瓊脂孔擴(kuò)散法測(cè)定待測(cè)菌株的抗菌活性， 以大腸桿菌（E.coli）、金黃色葡萄球菌（S.aureus）、枯草芽孢桿菌（B.subtilis）為指示菌。指示菌（107CFU/mL）與無(wú)菌PCA 瓊脂培養(yǎng)基以1∶10 充分混勻后倒入放有多個(gè)無(wú)菌牛津杯的平板中，待加有病原菌的PCA 瓊脂培養(yǎng)基冷卻凝固后，用無(wú)菌鑷子取出牛津杯，即形成若干瓊脂孔。 分別向瓊脂孔里加入100 μL 待檢菌（107CFU/mL）的離心上清液于9 000 r/min 離心5 min，37 ℃培養(yǎng)12 h，游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈直徑[19]。

1.4.2 乳酸菌對(duì)胃/腸模擬液耐受性實(shí)驗(yàn)參考費(fèi)永濤等的方法制備人工胃/腸液[20]。 將活化至3 代的菌液，用無(wú)菌PBS（pH 7.0）清洗3 次（8 000 r/min 離心10 min），用PBS（pH 7.0）反復(fù)吹打菌泥，混勻，制成供試菌懸液（1×108CFU/mL）。 移取1 mL 菌懸液接種于9 mL 人工胃液中，混勻，立即取樣通過(guò)平板計(jì)數(shù)法測(cè)定其活菌數(shù)N0， 剩余混合液置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，3 h 時(shí)取樣測(cè)定其活菌數(shù)N1。將在模擬胃液中孵育3 h 后的菌液， 取1 mL 接種于9 mL 人工腸液中，混勻，立即取樣平板計(jì)數(shù)測(cè)定其活菌數(shù)N0， 剩余混合液于37 ℃培養(yǎng)3 h 后取樣測(cè)定其活菌數(shù)N1，存活率按式（2）計(jì)算。

式中：R2為人工胃/腸液存活率，%；N1為人工胃液/腸液處理3 h 后LAB 的活菌數(shù)，CFU/mL；N0為人工胃液/腸液處理0 h 后LAB 的活菌數(shù)，CFU/mL。

1.5 乳酸菌的安全性評(píng)價(jià)

1.5.1 抗生素耐藥性安全性評(píng)價(jià)將純化培養(yǎng)后的乳酸菌菌液濃度調(diào)整為1×108CFU/mL，取100 μL菌液涂布于MRS 固體培養(yǎng)基， 待菌液吸收后放置藥敏紙片，37 ℃培養(yǎng)24 h。每組重復(fù)3 次，記錄抑菌圈直徑，根據(jù)表1 進(jìn)行藥物敏感性判定。

表1 微生物藥物敏感實(shí)驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Criteria for microbial drug susceptibility test

耐存率按式（3）計(jì)算：

式中：R3為乳酸菌耐藥率，%；N1為耐藥和中介菌株總數(shù)，CFU；N0為實(shí)驗(yàn)菌株總數(shù)，CFU。

1.5.2 乳酸菌γ-溶血實(shí)驗(yàn)將供試菌株點(diǎn)接于脫纖維綿羊血瓊脂平板上， 以金黃色葡萄球菌為對(duì)照，37 ℃培養(yǎng)24 h 后觀察菌落是否具有溶血現(xiàn)象。

1.5.3 乳酸菌氨基酸脫羧酶活性實(shí)驗(yàn)將乳酸菌點(diǎn)接在氨基酸脫羧酶培養(yǎng)基上，37 ℃培養(yǎng)24 h 后觀察菌落周?chē)伾兓?，若培養(yǎng)基變成紫色，即氨基酸脫羧酶活性陽(yáng)性，則具有潛在產(chǎn)胺威脅；若為黃色，即氨基酸脫羧酶活性陰性，該乳酸菌無(wú)潛在產(chǎn)胺威脅。

1.6 乳酸菌的降膽固醇能力評(píng)價(jià)

參考余萍等[21]的方法稍做修改，將活化3 代后的乳酸菌調(diào)節(jié)菌濃度為1×108CFU/mL，按體積分?jǐn)?shù)3%接種至MRS-CHOL 培養(yǎng)基中，37 ℃培養(yǎng)48 h后，9 000 r/min 離心5 min，取上清液，采用鄰苯二甲醛比色法測(cè)定550 nm 處的吸光度， 膽固醇去除率見(jiàn)式（4）。

式中：R4為膽固醇去除率，%；A0為未接種菌株培養(yǎng)48 h 后離心上清液的吸光度；A1為接種培養(yǎng)48 h后離心上清液的吸光度。

1.7 乳酸菌對(duì)Caco-2 細(xì)胞黏附能力評(píng)價(jià)

參考郭志華等的方法， 將Caco-2 細(xì)胞密度調(diào)整為1×105CFU/mL， 并分裝于24 孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)至單層細(xì)胞待用[22]。取2 mL 待測(cè)菌液（108CFU/mL）于9 000 r/min 離心5 min，用2 mL DMEM 培養(yǎng)基將菌體重懸并進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)（M0），剩余混合液取200 μL加入24 孔板中，于37 ℃、體積分?jǐn)?shù)5% CO2孵育1 h 后用PBS（pH 7.0）清洗細(xì)胞表面未黏附的乳酸菌，加入2 mL 胰酶消化5 min 后用2 mL DMEM 培養(yǎng)基重懸并進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)（M1）。 黏附率按照式（5）計(jì)算。 乳酸菌活菌計(jì)數(shù)參照申文熹等的方法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)[23]。

式中：R5為乳酸菌黏附率，%；M1為黏附的乳酸菌的菌落總數(shù)，CFU/mL；M0為待測(cè)重懸液菌落總數(shù)，CFU/mL。

1.8 乳酸菌的分子生物學(xué)鑒定

1.8.1 菌株鑒定將乳酸菌純化3 代后委托杭州聯(lián)川生物有限公司進(jìn)行16S rDNA 測(cè)序鑒定。

1.8.2 同源性分析利用BlAST 網(wǎng)站（https：//blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi）找到與鑒定菌株同源性最高的菌株并下載序列， 使用MEGA7 軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。

1.9 數(shù)據(jù)分析

分析、計(jì)算、圖表繪制分別采用DPS 數(shù)據(jù)處理軟件和OriginPro 2021（64-bit）軟件。 各實(shí)驗(yàn)組重復(fù)3 次，以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 乳酸菌的初步篩選結(jié)果

傳統(tǒng)發(fā)酵蔬菜樣品經(jīng)過(guò)菌種分離純化，篩選出革蘭氏陽(yáng)性的96 株溶鈣菌株，初篩判斷為乳酸菌。部分菌落形態(tài)與鏡檢結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 乳酸菌菌落形態(tài)及革蘭氏染色結(jié)果Fig.1 Colonial morphology and gram staining results of LAB

2.2 乳酸菌對(duì)酸和膽鹽耐受特性

益生菌需要到達(dá)腸道才能發(fā)揮其益生功能。 益生菌從口腔到人體腸道的過(guò)程中需要耐受胃中的低pH 環(huán)境[23]，以適應(yīng)小腸中膽鹽脅迫[24]等不良環(huán)境[25]。因此，具有耐受人體胃腸道環(huán)境的抗逆能力已經(jīng)成為評(píng)價(jià)益生菌的一項(xiàng)重要指標(biāo)[26]。 作者將初篩獲得的菌株依次在pH 2.0 和質(zhì)量濃度3 g/L 牛膽鹽的MRS 液體培養(yǎng)基中處理12 h 進(jìn)行篩選。 如圖2（a） 所示，96 株乳酸菌經(jīng)pH 2.0 培養(yǎng)12 h 后得到25株乳酸菌且存活率在65%以上， 其中有10 株菌活菌數(shù)較之前有所增加，表明耐酸能力強(qiáng)。 25 株耐酸乳酸菌經(jīng)質(zhì)量濃度3 g/L 牛膽鹽處理12 h 后，有24株乳酸菌能存活，存活率在35%以上，見(jiàn)圖2（b）。 表明這24 株菌對(duì)酸和膽鹽具有良好的耐受性。

圖2 乳酸菌的耐酸性及膽鹽耐受性實(shí)驗(yàn)結(jié)果Fig.2 Acid tolerance and bile salt tolerance tests results of LAB

2.3 生物特性評(píng)價(jià)

2.3.1 抑菌實(shí)驗(yàn)乳酸菌可以抑制病原菌的生長(zhǎng)繁殖，有助于胃腸道環(huán)境健康[27]。 24 株乳酸菌對(duì)病原菌抑菌能力的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。 37 ℃培養(yǎng)12 h后， 有22 株菌株對(duì)金黃色葡萄球菌有顯著抑菌效果，平均抑菌直徑為（30.60±0.46） mm；所有菌株對(duì)枯草芽孢桿菌都有抑菌效果， 平均抑菌直徑為（19.87±0.30） mm。表明大多數(shù)乳酸菌對(duì)所選擇的革蘭氏陽(yáng)性病原菌具有顯著抑菌效果。 多數(shù)菌株對(duì)大腸桿菌也具有抑菌效果， 平均抑菌直徑為（12.20±0.35） mm， 表明實(shí)驗(yàn)菌株對(duì)大腸桿菌抑菌能力一般。 值得注意的是，菌株SY4、SY32、JC3-1、JCMC、JC4-1 對(duì)大腸桿菌沒(méi)有抑菌效果， 菌株JCSMC-3、JCSMC16 對(duì)金黃色葡萄球菌沒(méi)有抑菌效果；而其余17 株菌株對(duì)3 株病原菌均有抑菌效果，表明其抑菌譜較廣且抑菌能力更強(qiáng)。

表2 乳酸菌對(duì)病原菌的抑菌直徑Table 2 Inhibition zone diameter of LAB against pathogenic bacteria 單位：mm

2.3.2 模擬胃腸液耐受特性評(píng)價(jià)乳酸菌在胃腸消化過(guò)程中，除了受低酸和膽鹽的影響，各種消化酶也會(huì)影響乳酸菌最終到達(dá)腸道的活菌數(shù)[28-29]。 作者以RW 為參考， 測(cè)定24 株乳酸菌在模擬胃/腸液中的存活情況。 由表3 可知，24 株菌株在模擬胃液中處理3 h 均能存活，但其存活能力存在差異。菌株SY4、JC33-1、XSMC1、JC-1 在模擬胃液中存活率較高，均大于100%。 菌株SY32、JC4-1、SY31、JCMC、SYA、JCSMC-2、XSMC2-2、SYD、JCSMC16 在模擬胃液中的存活率（55.83%～87.64%）高于RW 的存活率（48.80%）。 其余11 株的存活率低于融合魏斯菌，其中XSMC2-3 的存活率最低（3.08%），但活菌數(shù)仍高于106CFU/mL。

表3 乳酸菌在人工胃腸液中的活菌數(shù)及存活率Table 3 Viable count and survival rates of LAB in artificial gastrointestinal fluids

24 株實(shí)驗(yàn)菌株經(jīng)模擬腸液處理3 h 后，除菌株SY31 和JCSMC-2 對(duì)模擬腸液無(wú)耐受能力， 其余菌株對(duì)模擬腸液均表現(xiàn)出不同程度的耐受能力，見(jiàn)表3。 其中菌株XSMC2-3 耐受能力較弱，活菌數(shù)僅有7.55×105CFU/mL， 表明菌株XSMC2-3 受到模擬腸液的影響較大。

2.4 安全性評(píng)價(jià)

通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)菌株的生物特性評(píng)價(jià)，選擇抑菌譜較廣、抑菌能力較強(qiáng)且對(duì)胃腸道環(huán)境耐受能力強(qiáng)的18 株乳酸菌進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。 18 株菌株對(duì)9 種抗生素的耐藥性檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表4。 18 株乳酸菌對(duì)四環(huán)素、氯霉素、氨芐西林、紅霉素具有敏感性；對(duì)萬(wàn)古霉素、慶大霉素、卡那霉素、鏈霉素具有耐藥性。 據(jù)報(bào)道，多數(shù)乳酸菌對(duì)糖肽類(lèi)（萬(wàn)古霉素）和氨基糖苷類(lèi)（慶大霉素、卡那霉素和鏈霉素）的抗生素具有天然耐受能力[30-31]。 克林霉素主要是通過(guò)抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成從而達(dá)到抑菌效果[32]，因此35%的供試菌株的蛋白質(zhì)合成不受克林霉素抑制， 表現(xiàn)出耐藥性。18 株供試菌株均無(wú)溶血現(xiàn)象且在氨基酸脫羧酶培養(yǎng)基上呈陰性，表明這18 株試驗(yàn)菌株均為安全菌株。

表4 乳酸菌對(duì)不同抗生素的耐藥性Table 4 Resistance of LAB to different antibiotics

2.5 益生乳酸菌降解膽固醇能力評(píng)價(jià)

由圖3 可知，18 株乳酸菌培養(yǎng)48 h 后膽固醇的去除率均大于40%。 對(duì)照菌株RW 培養(yǎng)48 h 后膽固醇去除率達(dá)到54.56%。 除JC4-1、JCSMC16、JC33-1、JCSMC-3、XSMC2-2 外其余13 株菌株的膽固醇去除率則高于RW 的膽固醇去除率，其中菌株SYD 的膽固醇去除率高達(dá)62.54%。

圖3 乳酸菌的膽固醇降解率Fig.3 Rate of cholesterol removal by LAB

2.6 益生乳酸菌對(duì)Caco-2 黏附能力的評(píng)價(jià)

13 株降膽固醇益生乳酸菌對(duì)Caco-2 細(xì)胞的黏附率見(jiàn)圖4。有9 株乳酸菌對(duì)Caco-2 細(xì)胞的黏附率高于對(duì)照菌株RW 的黏附率 （62.10%）， 其中菌株SYB 的黏附率高達(dá)81.74%；余下菌株的黏附率均低于RW 的黏附率（62.10%），但均在45%以上。 黏附性強(qiáng)的乳酸菌更容易在腸道中定植[33-35]，從而發(fā)揮益生作用。 故選擇黏附率前5 名的菌株進(jìn)行鑒定。

圖4 乳酸菌對(duì)Caco-2 細(xì)胞的黏附作用Fig.4 Adhesion of LAB to Caco-2 cells

2.7 乳酸菌16SrDNA 分子鑒定結(jié)果

通過(guò)構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)獲得同源菌株信息見(jiàn)表5。 可知菌株JCSMC-1 與植物乳植桿菌（Lactiplantibacillus plantarum），菌株SYB、JCSMC6-2 與植物乳桿菌 （Lactobacillus plantarum）， 菌株SYD、XSMC-1 與 副 干 酪 乳 酸 菌（Lacticaseibacillus paracasei）的親緣關(guān)系分別最近，且序列相似性均高達(dá)100%。

表5 乳酸菌鑒定結(jié)果Table 5 Identification of LAB

3 結(jié) 語(yǔ)

本研究篩選得到的5 株發(fā)酵蔬菜源益生乳酸菌JCSMC-1、SYB、JCSMC6-2、SYD、XSMC-1 具 有較好的膽固醇去除能力（45.55%～62.54%）。同時(shí)，對(duì)酸、膽鹽和模擬胃/腸液耐受性強(qiáng)，對(duì)Caco-2 細(xì)胞黏附性也強(qiáng)；另外，對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌具有一定的抑菌效果，且在綿羊血培養(yǎng)基均沒(méi)有溶血現(xiàn)象，經(jīng)氨基酸脫羧酶培養(yǎng)基檢測(cè)表明沒(méi)有產(chǎn)生物胺的潛在威脅；5 株菌株對(duì)所選用的6 種抗生素表現(xiàn)出敏感性，3 種（1 種糖肽類(lèi)、2 種氨基糖苷類(lèi)）抗生素表現(xiàn)出耐藥性，這可能是乳酸菌對(duì)糖肽類(lèi)和氨基糖苷類(lèi)抗生素具有天然耐受能力；經(jīng)16S rDNA 鑒定， 菌株JCSMC-1 為植物乳植桿菌，SYB、JCSMC6-2 為植物乳桿菌，SYD、XSMC-1為副干酪乳酸菌。綜上所述，5 株菌株可作為潛在的食品用益生菌，進(jìn)一步用于功能性乳制品的開(kāi)發(fā)。