陳玉武 張海星 高曉昱 孫渭平 董亞娟 陶蘭萍 馬江紅 張耀邦 李俊明

（定西市藥品檢驗檢測中心，甘肅定西 743000）

黨參，性平、味甘，具有補(bǔ)中益氣、健胃生津之功效，臨床用于脾肺虛弱、氣短心悸、食少便溏、虛喘咳嗽、內(nèi)熱消渴等癥狀[1]，歷版《中華人民共和國藥典》均有收載。 隴藥黨參主產(chǎn)品種為分布于甘肅隴南文縣的紋黨參及隴西縣、渭源縣的白條黨參，兩者均屬《中華人民共和國藥典》收載品種，各具中國國家地理標(biāo)志產(chǎn)品之譽(yù)稱，品牌聞名于國內(nèi)外，產(chǎn)銷量居全國黨參藥材行列之首，是隴藥支柱產(chǎn)業(yè)之一。

紋黨參原藥材主根相對粗，易于鮮切初加工，能提升切片、切段等產(chǎn)品等級規(guī)格，具有產(chǎn)出率高、市場占領(lǐng)優(yōu)勢強(qiáng)、經(jīng)濟(jì)回報率高等諸多優(yōu)勢。 近年來，為了進(jìn)一步全面打贏脫貧攻堅戰(zhàn)， 助推中醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)與經(jīng)濟(jì)發(fā)展， 滿足市場對紋黨參藥食同源產(chǎn)品的需求，在保障紋黨參異地栽培品質(zhì)量的前提下，以紋黨參種子異地自繁育苗與原產(chǎn)地種苗移栽為途徑進(jìn)行異地栽培試驗，考察紋黨參種子異地育苗的成活率，以及自繁種苗與原產(chǎn)地紋黨參種苗異地栽培藥材的生長狀況及單位種植面積鮮藥材產(chǎn)量，重點以黨參質(zhì)控項（性狀、顯微特征、薄層色譜、浸出物及黨參炔苷含量）為主要質(zhì)量指標(biāo)，分析評價紋黨參栽培的適宜性與可行性， 以此促成紋黨參與白條黨參的資源優(yōu)勢互補(bǔ)，滿足市場多元化需求，實現(xiàn)紋黨參種植業(yè)由隴南向隴西拓展的新局面， 為進(jìn)一步提升隴藥黨參資源的開發(fā)利用與中藥農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化發(fā)展提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗儀器有LC-20AC 型高效液相色譜儀（日本島津公司）、XSE205 型電子分析天平（瑞士梅特勒公司）、GZX-GF-MBS-2 電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司）、BX43 正置顯微鏡（奧林巴斯）、硅膠板G（青島海洋化工有限公司）。 試驗用種子、種苗、原產(chǎn)地紋黨參、自繁紋黨參、移栽紋黨參、白條黨參， 經(jīng)陳玉武主任藥師鑒定均為Codonopsis pilosula的種子與根。試驗試劑有黨參炔苷對照品（批號RFSD02611804018，純度99.10%，成都瑞芬思生物技術(shù)有限公司），乙腈、甲醇為色譜純。

1.2 試驗方法

1.2.1自繁紋黨參種苗。 于2019 年5 月初，將休眠期為0.5 年的紋黨參種子經(jīng)-30 ℃冷凍48 h，用0.05%高錳酸鉀溶液浸泡6 h 處理，將實驗室發(fā)芽率測試達(dá)95%的同批種子用于自繁育苗。 選擇隴西縣通安驛鎮(zhèn)肖家岔社山區(qū)海拔約2 000 m、前茬為豆科作物（扁豆）輪休1 年的二陰地作試驗地塊，面積約20 m2[2]，以農(nóng)家肥（熟）和草木灰作底肥翻耕處理試驗用地，將事先處理的紋黨參種子以1.5 g/m2的量進(jìn)行播種， 按傳統(tǒng)露天方法育苗， 并如期實施田間管理，翌年春解凍后起苗。 相關(guān)指標(biāo)計算公式如下：

成活率（%）=單位面積成活苗數(shù)/單位面積施種子粒數(shù)×100；

平均單根苗重量=單位面積平均苗重/單位面積平均苗數(shù)。

分別以10 份平行數(shù)據(jù)求均值。

1.2.2試樣栽培與鮮藥材采集測試。 于1.2.1 項下種苗培育地理位置處， 選擇前茬為豆科作物耕地作試驗基地，將同一塊地分隔為A、B、C 3 個區(qū)，每區(qū)面積200 m2，分別為移栽紋黨參、白條黨參、自繁紋黨參種苗。 選擇單根苗重0.5～0.8 g 的健壯幼苗，按行溝坡度約40°，株距5～7 cm，與地表傾斜約30°平行植苗，行間距15～17 cm。5 月初統(tǒng)計出苗率，統(tǒng)一進(jìn)行田間管理（均未施黨參壯根靈）[3-4]，11 月中旬采挖藥材。分別從A、B、C 3 個區(qū)隨機(jī)分割20 m2采挖藥材，并對應(yīng)編號為A、B、C 樣，藥材鮮樣除去泥土稱重。 以各區(qū)20 m2的總產(chǎn)量除以20， 求得單位面積的鮮藥材產(chǎn)量[5]，并與白條黨參（B 樣）做比較。

1.2.3栽培品變異性考查。 依據(jù)《中華人民共和國藥典（2020 年版）》收載的黨參品種項下的性狀、顯微特征與薄層色譜鑒別方法操作[6]，以原產(chǎn)地紋黨參（D 樣）作對比。

1.2.4浸出物與黨參炔苷的測定。 將1.2.2 項下的A、C 樣與文縣采集的原產(chǎn)地紋黨參D 樣陰干， 粉碎（扣除水分），按《中華人民共和國藥典（2020 版 一部）》《中華人民共和國藥典（2020 版四部）》醇溶性浸出物測定法（熱浸法）測定浸出物[6-7]，采用HPLC 法測定黨參炔苷含量[3-9]，以D 樣做比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 自繁紋黨參種苗的成活率

將育苗生長期為1 年的種苗起苗觀察， 結(jié)果顯示，苗重（813.9±61.6）g/m2、苗重（0.59±0.88）g/根、根數(shù)（1 376.7±135.76）條/m2、成活率27.6%±2.6%。 與原產(chǎn)地紋黨參種苗相比，自繁紋黨參種苗根略長，支根少而須根多，根頭部環(huán)紋較少。

2.2 栽培樣品的出苗率及單位種植面積鮮藥材產(chǎn)量

A、B、C 區(qū)各試樣出苗率達(dá)95%～100%； 單位種植面積鮮藥材產(chǎn)量由高到低依次為C 區(qū)（0.78 kg/m2）>A 區(qū)（0.74 kg/m2>B 區(qū)（0.71 kg/m2），C 區(qū)（自繁紋黨參）、A 區(qū)（原產(chǎn)地移栽紋黨參）較B 區(qū)（白條黨參）分別增產(chǎn)9.8%、4.2%。

2.3 變異性考查

2.3.1性狀特征。 移栽紋黨參、自繁紋黨參、原產(chǎn)地紋黨參性狀特征如圖1、表1 所示。

表1 不同種類黨參性狀特征

2.3.2顯微特征。 移栽紋黨參、自繁紋黨參、原產(chǎn)地紋黨參顯微特征如圖2、表2 所示。

表2 不同種類黨參顯微特征

2.3.3薄層色譜鑒別。 不同種類黨參薄層色譜鑒別結(jié)果如圖3 所示。

2.3.4浸出物與黨參炔苷含量。 不同種類黨參浸出物與黨參炔苷含量如表3 所示?？梢钥闯?，A、C 的浸出物含量明顯高于D，D 的黨參炔苷含量占顯著優(yōu)勢。方差分析表明，組間存在顯著差異（P＜0.05）；A、C間浸出物、黨參炔苷含量無顯著差異；A、C 與D 間存在顯著差異。

表3 浸出物、黨參炔苷及組間比較

3 結(jié)論與討論

該試驗結(jié)果表明， 紋黨參種子異地自繁育苗與原產(chǎn)地種苗移栽均可實現(xiàn)異地栽培， 生產(chǎn)的黨參符合《中華人民共和國藥典（2020 年版）》黨參質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。栽培方法與技術(shù)切實可行，在保障其質(zhì)量的前提下，可助推隴藥黨參資源的開發(fā)利用。

紋黨參主產(chǎn)地隴南文縣距栽培地隴西縣400 km左右，兩地間原本存在自然環(huán)境差異，紋黨參主產(chǎn)地土壤為黑、沙土質(zhì)，栽培地隴西為黃、白土質(zhì)，文縣氣候環(huán)境潤濕，年平均氣溫與降雨量相對隴西較高，各種自然環(huán)境相互交融， 形成二者各自固有的特色標(biāo)志，為紋黨參異地栽培造成天然障礙。 近年來，隨著全球氣候變化，隴南與隴西的溫差相對變小，隴西年降雨量增多及農(nóng)業(yè)現(xiàn)代科技的發(fā)展應(yīng)用， 為紋黨參異地栽培營造了有利環(huán)境。

對紋黨參種子冷凍處理可激發(fā)種子的抗寒、抗旱、抗病等內(nèi)在基因，使其適宜異地生態(tài)環(huán)境，萌發(fā)生長動力[10-12]。實驗室種子的發(fā)芽率試驗明顯高于露天育苗的成活率，這主要與異地土壤、環(huán)境、日照、溫濕度等因素有關(guān)。 如何提高紋黨參異地自繁育苗成活率的問題，亟待進(jìn)一步研究。自繁紋黨參種苗在栽培地較移栽紋黨參種苗優(yōu)先1 年適應(yīng)了異栽地生長環(huán)境，更具有生長優(yōu)勢，產(chǎn)品較移栽紋黨參和原產(chǎn)地紋黨參的主根長，且支根減少，仍保持紋黨參主根粗的固有生長習(xí)性， 因而單位面積的鮮藥材產(chǎn)量較移栽紋黨參與白條黨參高。

從異地栽培紋黨參的性狀可見， 栽培品較原產(chǎn)地紋黨參的主根長、支根少、根頭下的環(huán)狀橫紋減少，但色澤、氣味等未見明顯變化；顯微特征與薄層色譜鑒別項均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。由此表明，紋黨參適宜隴西縣栽培，且未見質(zhì)的變異。 但是，為了進(jìn)一步研究紋黨參異地栽培品種與質(zhì)的變異狀況， 尚需進(jìn)行高通量測序技術(shù)、藥用植物基因轉(zhuǎn)錄組研究等多學(xué)科聯(lián)合研判。 量化質(zhì)控指標(biāo)測試表明，12 批試樣的浸出物含量為58.2%～68.8%，均高于《中華人民共和國藥典》黨參質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的55.0%，試樣組間未見明顯差異；黨參炔苷含量為2.21～7.34 mg/g，原產(chǎn)地紋黨參的黨參炔苷含量明顯高于異地栽培的紋黨參， 但檢測試樣原產(chǎn)地紋黨參與栽培品不出自同一試驗基地，且現(xiàn)行《中華人民共和國藥典》黨參質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)未將黨參炔苷含量作為質(zhì)控指標(biāo)項， 本試驗研究僅作為參考指標(biāo)。

紋黨參異地栽培品個體藥材的直徑增大， 可提升黨參藥材的產(chǎn)量與商品等級規(guī)格， 為后續(xù)發(fā)展黨參鮮制切片、黨參節(jié)子、黨參把子等新興產(chǎn)品從源頭上提供了貨源保障， 促進(jìn)了以黨參藥食同源產(chǎn)地初加工產(chǎn)品的線上線下銷售活動，推動農(nóng)產(chǎn)品、中藥材在電商業(yè)的發(fā)展，促進(jìn)了地方經(jīng)濟(jì)發(fā)展，貫通了以發(fā)展道地藥材為主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)的興隴富民發(fā)展思路， 對促進(jìn)鄉(xiāng)村產(chǎn)業(yè)振興具有積極作用。

紋黨參異地栽培技術(shù)的推廣應(yīng)用已在逐步擴(kuò)大。 據(jù)初步調(diào)查，2021 年隴西縣白條黨參主產(chǎn)地高楞、福星、云田、渭陽、通安、種和等地部分藥農(nóng)已從隴南購進(jìn)紋黨參種苗進(jìn)行移栽， 栽培面積約占當(dāng)?shù)攸h參藥材種植總面積的1/3。 2021 年春季，由于隴西藥農(nóng)對紋黨參栽培的熱衷， 大量紋黨參種苗被販運(yùn)到隴西的部分農(nóng)貿(mào)市場進(jìn)行交易。由此表明，紋黨參異地栽培技術(shù)與可行性評價研究對發(fā)展隴藥黨參藥材種植產(chǎn)業(yè)具有實踐指導(dǎo)性意義， 紋黨參的異地栽培技術(shù)應(yīng)用范圍廣，推廣前景好。