王虹力

（鳳城市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 丹東 118100）

自身免疫性肝病（autoimmune liver disease，ALD）是因體內(nèi)免疫功能紊亂引起的一組特殊類型的慢性肝病，包括自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis，AIH）、原發(fā)性膽汁性膽管炎（primary biliary cholangitis，PBC）、原發(fā)性硬化性膽管炎（primary sclerosing cholangitis，PSC）以及相互重疊的重疊綜合征（overlap syndrome）。不同類型的自身免疫性肝病，其人口學(xué)特征、臨床表現(xiàn)、肝臟的病理改變各有不同。該病具體的發(fā)病機(jī)制尚不明了，患者多伴有其他自身免疫性疾病，如糖尿病、橋本甲狀腺炎等。AILD是肝臟免疫耐受機(jī)制失衡所致的肝細(xì)胞/膽管上皮細(xì)胞的慢性損傷性炎癥，屬于慢性肝病，即肝臟組織免疫應(yīng)答、功能異常下自身免疫系統(tǒng)攻擊所致。具有起病隱匿特點(diǎn)，患者一般有腹脹、乏力、食欲下降等癥狀，是肝硬化、肝功能障礙常見原因。臨床工作中發(fā)現(xiàn)，此類疾病患者一般無特異性表現(xiàn)，所以單純憑借癥狀特征無法有效診斷疾病[1]。另外，不同類型、病理特征自身免疫性肝病特點(diǎn)有所不同，抗體譜檢測(cè)診斷具有較高價(jià)值。基于此，本文就我院2019年8月至2020年7月收治的自身免疫性肝病患者為例，研究抗體譜檢測(cè)情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對(duì)象選自2019年8月至2020年7月，均為自身免疫性肝病患者，符合《自身免疫性肝病基礎(chǔ)與臨床》判斷依據(jù)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①＞18歲患者。②病歷資料完整者。③患者經(jīng)抗體譜檢測(cè)。④參與者知情、具備配合能力。⑤倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①酒精肝等患者。②退出研究者。③精神疾病患者。④其他重大疾病患者。觀察1組（50例）：男性30例、女性20例；患者年齡20～65歲，平均（45.50±6.50）歲。觀察2組（50例）：男性32例、女性18例；患者年齡22～66歲，平均（46.50±6.20）歲。觀察3組（50例）：男性30例、女性20例；患者年齡21～66歲，平均（46.60±6.60）歲。對(duì)照組（50例）：男性27例、女性23例；患者年齡23～65歲，平均（46.30±7.50）歲。4組性別分布、平均年齡接近，P＞0.05均衡具有可比性。

1.2 方法 研究所用試劑盒由歐盟醫(yī)學(xué)診斷技術(shù)有限公司提供，整個(gè)檢測(cè)過程嚴(yán)格按照抗體譜試劑盒完成。晨起空腹采集受檢者靜脈血（3 mL），真空采血管保存，離心3 000 r/min、時(shí)間為10 min，血清置于冰箱（-20 ℃）備用。間接免疫熒光法檢測(cè)ANA、AMA、SMA抗體，抗原為HEp-2細(xì)胞基質(zhì)、大鼠胃基質(zhì)冰凍生物薄片，待檢血清配比1∶100，基質(zhì)置入溫浴，時(shí)間為30 min，洗滌后放入羊抗人IgG，30 min后洗片、封片，熒光顯微鏡觀察，組織/細(xì)胞內(nèi)特異性黃綠色熒光即ANA/AMA陽(yáng)性[2]。免疫印跡法檢測(cè)SLA/LP、LKM-Ⅰ，LKM-1、SLA/LP抗原做包被，對(duì)5種AMA-M2亞型抗原包被，以1∶50配比待檢血清，混合（30 μL）、稀釋液（1.5 mL）觀察膜反應(yīng)，常溫下持續(xù)振蕩孵育（1 h），洗膜后滴入抗人IgG，常溫下水平晃動(dòng)（1 h），而后洗膜，進(jìn)行顯色，蒸餾水結(jié)束反應(yīng)。比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照條帶圖，特定區(qū)域條帶著色、顏色清晰，即SLA/LP、LKM-Ⅰ陽(yáng)性[3]。

1.3 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)分析4組受檢者血清ANA、AMA以及SMA滴度≥1/320、SLA/LP與 LKM-Ⅰ抗體測(cè)定測(cè)定結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 基于SPSS 19.0版本軟件建模，錄入4組受試者觀察指標(biāo)數(shù)據(jù)。以[n（%）]描述血清ANA、AMA等檢驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性率，采用（χ2）值進(jìn)行檢驗(yàn)。P＜0.05情況下，數(shù)據(jù)比較存在顯著性差異、具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 組間血清ANA、AMA抗體測(cè)定分析 觀察1組、觀察2組、觀察3組血清ANA陽(yáng)性率高于對(duì)照組，有顯著性差異，P＜0.05。觀察1組血清ANA陽(yáng)性率高于觀察2組、觀察3組，有顯著性差異，P＜0.05。觀察2組血清AMA陽(yáng)性率高于觀察1組、觀察3組、對(duì)照組，有顯著性差異，P＜0.05。見表1。

表1 組間血清ANA、AMA 抗體測(cè)定情況分析[n（%）]

2.2 SMA滴度≥1/320、SLA/LP 與LKM-Ⅰ抗體測(cè)定分析 觀察1組受試者的SMA滴度≥1/320、SLA/LP與LKM-Ⅰ抗體陽(yáng)性測(cè)定結(jié)明顯高于觀察2組、觀察3組、對(duì)照組，有顯著性差異，P＜0.05。見表2。

表2 組間SMA滴度≥1/320、SLA/LP與LKM-I抗體測(cè)定情況分析[n（%）]

3 討論

近幾年，自身免疫性肝病發(fā)生率一直呈上升趨勢(shì)，對(duì)人們生命健康造成威脅。自身免疫性肝病根據(jù)組織病理學(xué)、免疫學(xué)劃分包括多種病型，如AIH、PBC、PSC，需積極鑒別診斷、治療，以促進(jìn)患者預(yù)后[4]。本組疾病病因尚不完全明了，可能與各種因素，如感染、物理或化學(xué)因素，引起的免疫功能紊亂有關(guān)，明確的誘發(fā)因素是各種嗜肝病毒感染。病毒感染（如乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、EB病毒、麻疹病毒等）在激發(fā)免疫反應(yīng)方面的作用比較肯定。病毒抗原表位和某些肝臟抗原具有相同的決定簇，通過“分子模擬”而誘發(fā)交叉反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致自身免疫性肝病。如丙型肝炎病毒感染的部分患者血清中可檢測(cè)到多種非特異性自身抗體，推測(cè)可能是丙型肝炎病毒的感染改變了肝細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)成分所致[5]。自身免疫性肝病除了乏力、食欲下降、腹脹、肝區(qū)不適、皮膚鞏膜黃染等共有的臨床表現(xiàn)外，不同類型的疾病有其本身的特點(diǎn)。自身免疫性肝炎（AIH）的病變部位以肝細(xì)胞為主，以50歲左右的中年女性多見，其特征是血清轉(zhuǎn)氨酶有不同程度升高，血清免疫球蛋白IgG（或γ-球蛋白）水平顯著升高（＞20 g/L），血清抗核抗體、抗平滑肌抗體、抗肝腎微粒體I型抗體或抗肝細(xì)胞胞質(zhì)I型抗體等自身抗體陽(yáng)性。原發(fā)性膽汁性膽管炎（PBC）的病變部位以小葉間膽管和小膽管為主，以50歲以上的女性多見。臨床上可有皮膚瘙癢、上眼內(nèi)眥部出現(xiàn)黃色瘤，肝功能檢查以肝內(nèi)淤膽為特征，患者表現(xiàn)為總膽紅素升高，直接膽紅素升高超過間接膽紅素，同時(shí)有堿性磷酸酶和谷氨酰轉(zhuǎn)移酶顯著升高。血清免疫球蛋白IgM顯著升高，血清抗核抗體和抗平滑肌抗體陽(yáng)性。原發(fā)性硬化性膽管炎（PSC）的病變部位以肝內(nèi)大膽管為主，少數(shù)可波及到肝外膽管，以40歲左右中年男性居多，多數(shù)患者同時(shí)合并有潰瘍性結(jié)腸炎。與原發(fā)性膽汁性膽管炎相比，原發(fā)性硬化性膽管炎的發(fā)病率更低，但臨床表現(xiàn)和實(shí)驗(yàn)室檢查二者相似，內(nèi)鏡下逆行性膽管造影或經(jīng)皮經(jīng)肝膽管造影有助于區(qū)別。肝組織遭受麻疹、乙肝等感染后，損害人體肝臟組織功能，發(fā)展后可致肝硬化、肝衰，增加患者知識(shí)風(fēng)險(xiǎn)[6]。結(jié)合臨床經(jīng)驗(yàn)，肝病患者普遍有特異性自身抗體，滴度水平較高，所以自身抗體譜檢測(cè)可以有效鑒別診斷疾病類型[7]。血清AMA檢測(cè)PBC的特異性高，SLA/LP對(duì)AIH診斷敏感度高，所以自身抗體譜檢測(cè)尤為關(guān)鍵[8]。不同肝病患者的血清ANA水平各有差異，AIH影響最為明顯。結(jié)合本文研究，觀察1組血清ANA陽(yáng)性率高，觀察2組、觀察3組血清ANA陽(yáng)性率接近，對(duì)照組無ANA陽(yáng)性，抗體高敏感性助于疾病篩查。血清AMA屬特異性自身抗體，觀察2組檢測(cè)高表達(dá)，是PBC血清特征性自身抗體，是診斷PBC的敏感指標(biāo)。PSC血清ANA陽(yáng)性率方面不高，無血清AMA陽(yáng)性[9]。SMA滴度≥1/320、SLA/LP、LKM-Ⅰ檢測(cè)，無陽(yáng)性病例[10]。為提升疾病檢測(cè)準(zhǔn)確率，需根據(jù)臨床經(jīng)驗(yàn)，需結(jié)合患者肝病史、臨床影像報(bào)告綜合判斷[11-13]。相關(guān)研究指出，自身免疫性肝病抗體譜助于自身免疫性肝病早期診斷，在有效鑒別分型的基礎(chǔ)上促進(jìn)患者早期治療和預(yù)后[14-17]。

本文結(jié)果：自身抗體譜檢測(cè)篩查后，血清ANA陽(yáng)性率方面，觀察1組、觀察2組、觀察3組高于對(duì)照組，1組高于觀察2組、觀察3組，P＜0.05；血清AMA陽(yáng)性率方面，觀察2組高于1組、觀察3組、對(duì)照組，P＜0.05；SMA滴度≥1/320、SLA/LP、LKM-Ⅰ抗體測(cè)定方面，觀察1組明顯高于觀察2組、觀察3組、對(duì)照組，P＜0.05。由此說明，自身抗體譜檢測(cè)篩查肝臟疾病分型方面價(jià)值顯著，可以先排除患病毒性肝病的可能，再選擇合適的治療用藥，利于患者早期臨床治療和預(yù)后。

綜上所述，患者基于飲食、遺傳、工作與生活環(huán)境等因素影響，導(dǎo)致肝病發(fā)病率一直較高，臨床需盡早診斷、治療，以保障患者的健康、提升生活質(zhì)量。自身免疫性肝病是自身免疫反應(yīng)所致的肝膽系統(tǒng)損傷，是慢性、進(jìn)展性疾病。由于疾病發(fā)病比較隱匿，無特異性表現(xiàn)，增加了早期診斷、鑒別診斷的難度，提高了疾病的誤診風(fēng)險(xiǎn)。自身抗體譜檢測(cè)篩查肝臟疾病助于分型鑒別，利于早期治療，提升患者預(yù)后。