劉春娟 張波

摘 要 目的：為中藥桔梗的真?zhèn)舞b別和質(zhì)量評(píng)價(jià)提供參考，保障其臨床用藥的安全性。方法：從性狀鑒別、顯微鑒別、理化鑒別和分子鑒別等方面對(duì)桔梗的真?zhèn)芜M(jìn)行鑒別;并從化學(xué)成分和安全性?xún)蓚€(gè)方面對(duì)其質(zhì)量評(píng)價(jià)方法進(jìn)行綜述。結(jié)果與結(jié)論：桔梗真?zhèn)舞b別和質(zhì)量評(píng)價(jià)方法研究較為廣泛，形成了多元化的鑒別和質(zhì)量評(píng)價(jià)體系。理化鑒別在桔梗的單味藥及復(fù)方中的鑒別應(yīng)用最為廣泛，而分子鑒別還可用于其產(chǎn)地鑒別和品種鑒別;紫外分光光度法和指紋圖譜技術(shù)在桔梗整體質(zhì)量評(píng)價(jià)上的應(yīng)用最廣，液相色譜法更適于其指標(biāo)性成分的檢測(cè);桔梗的安全性評(píng)價(jià)方法則以氣相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)、電感耦合等離子體質(zhì)譜法和原子吸收光譜法為主，分別用于其農(nóng)藥、重金屬殘留的檢測(cè)。目前，雖然桔梗的真?zhèn)舞b定及質(zhì)量評(píng)價(jià)方法較為豐富，但還應(yīng)進(jìn)一步圍繞“成分-功效”之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系，建立符合中藥“多成分、多靶點(diǎn)、多功效”特性的質(zhì)量評(píng)價(jià)體系或基于質(zhì)量標(biāo)志物研究（Q-Marker）理念深入研究其質(zhì)量評(píng)價(jià)方法。

關(guān)鍵詞 桔梗;鑒別;質(zhì)量評(píng)價(jià);化學(xué)成分;安全性

桔梗為桔?？浦参锝酃latycodon grandiflorum （Jacq.）A.DC.的干燥根，主產(chǎn)于我國(guó)東北、內(nèi)蒙古、安徽、山東等地;其具有宣肺、利咽、祛痰、排膿等功效，多用于咳嗽痰多、胸悶不暢、咽痛音啞、肺癰吐膿等的治療[1]。近年來(lái)，由于主觀摻入或無(wú)意混用，市場(chǎng)上出現(xiàn)多種桔梗偽品或誤用品[2][如石竹科植物絲石竹Gypsophila oldhamiana Mig.，又稱(chēng)霞草[3];又如石竹科植物瓦草Silene viscidula Franch.[4]和桔梗科植物輪葉沙參Adenophora tetraphylla （Thunb.）Fisch 或沙參A. stricta Miq.[5]等藥用植物的干燥根]，加之在桔梗的質(zhì)量評(píng)價(jià)歷史沿革中出現(xiàn)了“南桔梗”與“北桔?！钡臓?zhēng)論[6]，又有品種之差異[7]，加上產(chǎn)地、栽培與野生、生長(zhǎng)年限、采收期、炮制加工等諸多不同[8-12]，導(dǎo)致桔梗的質(zhì)量參差不齊，嚴(yán)重影響其臨床用藥的安全性與有效性。桔梗為臨床常用中藥，是我國(guó)出口量較多的中藥材之一，具有較高經(jīng)濟(jì)價(jià)值，加強(qiáng)其真?zhèn)舞b別和品質(zhì)評(píng)價(jià)方法的研究對(duì)保障該藥材的用藥安全性以及促進(jìn)其進(jìn)出口貿(mào)易具有重要意義。鑒于此，本研究對(duì)桔梗的真?zhèn)舞b別、質(zhì)量評(píng)價(jià)方法進(jìn)行綜述，旨在為其臨床安全使用提供保障。

1 真?zhèn)舞b別方法

1.1 性狀鑒別方法

經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)，桔梗與其常見(jiàn)混偽品（如絲石竹、瓦草和南沙參）在形狀、大小和表面顏色等3個(gè)方面較為相似，但在表皮特征、斷面特征、質(zhì)地及氣味方面具有一定差異。其中，桔梗根莖有數(shù)個(gè)半月形莖痕，而絲石竹、瓦草和南沙參沒(méi)有此特征;桔梗斷面有裂隙且形成層環(huán)、呈棕色，而瓦草皮部無(wú)裂隙，絲石竹斷面具有同心環(huán)紋，南沙參斷面裂隙較多;桔梗體輕質(zhì)脆，而絲石竹體輕質(zhì)堅(jiān)實(shí)，瓦草體重質(zhì)脆，南沙參則體輕質(zhì)松泡;桔梗味甜后苦無(wú)麻味，但絲石竹和瓦草均有麻味，而南沙參則僅微甘而無(wú)后苦。桔梗與其常見(jiàn)混偽品的性狀鑒別特征詳見(jiàn)表1。

1.2 顯微鑒別方法

中藥顯微鑒別多從橫切面特征和粉末特征2個(gè)方面鑒別。桔梗橫切面主要特征為：①木栓層細(xì)胞含草酸鈣小棱晶;②韌皮部乳汁管群散在，乳汁管壁厚且內(nèi)含微細(xì)顆粒狀黃棕色物;③木質(zhì)部導(dǎo)管單個(gè)散在或數(shù)個(gè)相聚，呈放射狀排列;④薄壁細(xì)胞含菊糖[1]。絲石竹橫切面有同心環(huán)紋異常的維管束，薄壁組織中有裂隙且無(wú)乳汁管，因此易于鑒別[13];瓦草雖然含有草酸鈣簇晶且導(dǎo)管排列特征與桔梗相似，但不含乳汁管，因此也易于鑒別[14];南沙參橫切面特征與桔梗較為相似，兩者均含有乳汁管、草酸鈣結(jié)晶、菊糖和類(lèi)似的導(dǎo)管特征，其不同之處在于桔梗的形成層為環(huán)形，而南沙參的為弧形，且南沙參木栓層有厚化且呈長(zhǎng)方形的木栓細(xì)胞環(huán)帶1～3列，與桔梗有一定區(qū)別[15]。

桔梗粉末特征主要為：①扇形或類(lèi)圓形的菊糖結(jié)晶;②含乳汁管;③導(dǎo)管主要為梯紋和網(wǎng)紋導(dǎo)管;④去皮者無(wú)草酸鈣簇晶;⑤木薄壁細(xì)胞長(zhǎng)方形[1]。絲石竹和瓦草粉末中均含有大量草酸鈣簇晶，可據(jù)此與桔梗鑒別[4]。另外，南沙參粉末中含有石細(xì)胞[15]，而桔梗中不含，可作為兩者鑒別特征。

1.3 理化鑒別方法

薄層色譜法是較為常用的理化鑒別方法，2020版《中國(guó)藥典》（一部）[1]收載的桔梗薄層色譜方法為：以三氯甲烷-乙醚（2 ∶ 1）為展開(kāi)劑、硅膠G薄層板為固相載體，通過(guò)噴加10%硫酸乙醇溶液并置105 ℃烤板中進(jìn)行斑點(diǎn)顯色，再與標(biāo)準(zhǔn)藥材對(duì)照鑒別。除桔梗生品和飲片采用上述方法外，含桔梗的中成藥的鑒別也多采用此法，其主要差異在于展開(kāi)系統(tǒng)不同，如桑菊感冒沖劑使用的展開(kāi)系統(tǒng)為三氯甲烷-石油醚（4 ∶ 6）[16]，復(fù)方桔梗止咳片的展開(kāi)系統(tǒng)為環(huán)己烷-乙酸乙酯（4 ∶ 1）[17]，桔梗冬花片的展開(kāi)系統(tǒng)為氯仿-乙醚（1 ∶ 1）[18]，四季感冒片的展開(kāi)系統(tǒng)為三氯甲烷-乙醚（1 ∶ 1）[19]。薄層色譜鑒別在桔梗的真?zhèn)舞b別中應(yīng)用十分廣泛，但其供試品制備過(guò)程較為繁瑣，例如需要使用7%硫酸乙醇-水（1 ∶ 3）加熱回流3 h，并需三氯甲烷分步萃取后濃縮，方可應(yīng)用[1]。

除薄層色譜法外，韓靈國(guó)等[5]還通過(guò)不同溶劑（水、氯仿、乙醇、10% NaOH、10% HCl）提取桔梗后，根據(jù)提取物紫外燈下熒光顏色的差異進(jìn)行桔梗的真?zhèn)舞b別。該方法通過(guò)多種提取液結(jié)果進(jìn)行綜合判定，其準(zhǔn)確性較高，但樣品制備過(guò)程同樣較為復(fù)雜。

1.4 分子鑒別方法

近年來(lái)，分子鑒別技術(shù)在中藥鑒別領(lǐng)域的應(yīng)用發(fā)展十分迅速，形成了多個(gè)具有代表性的理論或技術(shù)方法，如分子生藥學(xué)和DNA條形碼技術(shù)。ITS基因片段是植物DNA條形碼的有效候選基因之一，已廣泛應(yīng)用于中草藥的真?zhèn)舞b別。趙月梅等[20]基于桔梗及其混偽品絲石竹和沙參的ITS序列，通過(guò)雙參數(shù)遺傳距離法計(jì)算發(fā)現(xiàn)，桔梗的種內(nèi)遺傳距離為0.006，而其與南沙參的遺傳距離為0.198、與絲石竹的遺傳距離為0.328，具有顯著差異;另外，通過(guò)NJ聚類(lèi)分析發(fā)現(xiàn)，桔梗、絲石竹和南沙參均能獨(dú)自聚為單系分支。這說(shuō)明ITS序列分析可實(shí)現(xiàn)桔梗及其混偽品的真?zhèn)舞b別。

2 質(zhì)量評(píng)價(jià)方法

目前，中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)多從化學(xué)成分的角度進(jìn)行，且大致可分為整體評(píng)價(jià)和代表性成分評(píng)價(jià)兩方面。

對(duì)于桔梗的整體質(zhì)量評(píng)價(jià)包括水分、總灰分、醇溶性浸出物、揮發(fā)油、總皂苷、總黃酮和總多糖等多個(gè)指標(biāo)。羅益遠(yuǎn)等[21]即是基于以上多個(gè)指標(biāo)的含量測(cè)定并構(gòu)建TOPSIS模型用于不同產(chǎn)地桔梗的質(zhì)量?jī)?yōu)劣評(píng)價(jià)。桔梗中水分、總灰分和醇溶性浸出物的測(cè)定均有《中國(guó)藥典》通則可尋，且技術(shù)均較成熟，并無(wú)異議;揮發(fā)油的含量測(cè)定以氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）為主;總皂苷、總黃酮和總多糖的測(cè)定方法均采用紫外分光光度法（UV）。此外，從宏觀角度對(duì)桔梗進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)的還有指紋圖譜技術(shù)和紅外光譜法（IR）。

對(duì)于桔梗的指標(biāo)性成分的評(píng)價(jià)則是以其皂苷類(lèi)成分含量評(píng)價(jià)為主。目前桔梗中已發(fā)現(xiàn)的皂苷類(lèi)成分多達(dá)70余種，其中桔梗皂苷D具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤、抗肥胖、神經(jīng)保護(hù)作用等多種生物活性[22]，是桔梗的主要活性物質(zhì)，亦是歷版《中國(guó)藥典》中規(guī)定的指標(biāo)性成分。桔梗皂苷類(lèi)成分的含量測(cè)定方法主要有高效液相色譜法（HPLC）、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELISA）和一測(cè)多評(píng)法等。

2.1 GC-MS法

揮發(fā)油是植物化學(xué)成分的重要組成部分，其含量的差異與植物種質(zhì)及其生長(zhǎng)環(huán)境密切相關(guān)，因此通過(guò)比較桔梗揮發(fā)油的成分組成及含量差異可以從一定程度上反映藥材的質(zhì)量差異。He等[23]采用GC-MS法檢測(cè)了我國(guó)9個(gè)不同產(chǎn)地桔梗揮發(fā)油的成分組成，共從中鑒別出了121個(gè)化學(xué)成分，同時(shí)發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)區(qū)桔梗藥材揮發(fā)油含量及組成具有一定差異。龔敏等[24]采用GC-MS法分析了桔梗生品、清炒品和蜜炙品中揮發(fā)油的成分組成，發(fā)現(xiàn)桔梗不同炮制品之間揮發(fā)性成分的差異顯著，可為桔梗及其炮制品的質(zhì)量評(píng)價(jià)和臨床合理用藥提供參考。

2.2 UV法

桔梗中總皂苷的含量分析方法多以桔梗皂苷D作為對(duì)照品，并通過(guò)UV法進(jìn)行檢測(cè)。楊壯等[25]以桔梗皂苷D為對(duì)照品，以香草醛-高氯酸為顯色劑，通過(guò)UV法比較分析了山東和安徽兩大主產(chǎn)區(qū)桔梗的質(zhì)量，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)區(qū)間和產(chǎn)區(qū)內(nèi)不同桔梗藥材的總皂苷含量均存在顯著差異。

姜登軍等[26]以蘆丁為對(duì)照品，通過(guò)UV法比較分析了重慶不同海拔梯度產(chǎn)桔梗的質(zhì)量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同海拔梯度間桔?？傸S酮的含量差異顯著。

桔梗多糖具有抗氧化和抗癌活性，是桔梗的活性組分之一[27]。黃嬌等[28]采用苯酚-硫酸染色-UV檢測(cè)法測(cè)定了重慶不同產(chǎn)區(qū)桔梗藥材中的多糖含量，發(fā)現(xiàn)桔梗多糖含量在13.06%～58.70%之間;通過(guò)主成分分析法判定質(zhì)量最優(yōu)的桔梗含糖量也最高;且桔?？偠嗵桥c總黃酮和總皂苷的含量之間呈顯著相關(guān)性。以上結(jié)果說(shuō)明，桔梗多糖是桔梗質(zhì)量評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)成分。

2.3 指紋圖譜技術(shù)

指紋圖譜技術(shù)可從整體上反映藥材質(zhì)量，避免了以單個(gè)或少數(shù)幾個(gè)指標(biāo)性成分為依據(jù)的中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)略顯片面的問(wèn)題，在中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)領(lǐng)域應(yīng)用十分廣泛。目前所建立的桔梗的指紋圖譜主要分為HPLC指紋圖譜和聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）兩類(lèi)。

產(chǎn)地、品種或生長(zhǎng)年限的差異均會(huì)導(dǎo)致藥用植物基因表達(dá)的差異，進(jìn)而導(dǎo)致其化學(xué)成分的差異，最終形成不同質(zhì)量的藥材。指紋圖譜技術(shù)是以多批次藥材的成分分析結(jié)果來(lái)評(píng)價(jià)藥材質(zhì)量的一致性或穩(wěn)定性，而HPLC指紋圖譜[可串聯(lián)蒸發(fā)光散射檢測(cè)區(qū)（ELSD）或二極管矩陣檢測(cè)器（PDA）]與PAGE指紋圖譜的區(qū)別主要在于，前者是以小分子化合物為研究對(duì)象，后者則是以蛋白質(zhì)等大分子為研究對(duì)象。桔梗指紋圖譜研究情況詳見(jiàn)表2。

2.4 IR法

IR法具有快速、無(wú)損、無(wú)污染以及可視化等優(yōu)點(diǎn)，可有效反映藥材組織上的官能團(tuán)信息。司雨柔等[38]結(jié)合傅里葉變換IR法和顯微IR法對(duì)內(nèi)蒙古、湖南、陜西、安徽等不同產(chǎn)地的9批次桔梗的化學(xué)成分整體變化規(guī)律進(jìn)行研究。結(jié)果顯示，不同產(chǎn)地桔梗的一階IR光譜圖差異不明顯，二階導(dǎo)數(shù)IR光譜圖中產(chǎn)地特征峰差異明顯，且同省內(nèi)桔梗的成分差異不大，而省間樣品的差異明顯，說(shuō)明IR法可用于初步鑒別桔梗產(chǎn)地，可作為桔梗質(zhì)量評(píng)價(jià)方法之一。

2.5 HPLC法

HPLC法靈敏度高、重復(fù)性好、易于標(biāo)準(zhǔn)化，2010版《中國(guó)藥典》（一部）首次收載了桔梗皂苷D的HPLC檢測(cè)方法，并規(guī)定其“含量不得少于0.1%”，從而取代了2005版《中國(guó)藥典》（一部）中重量法的“總皂苷不得少于6.0%”的含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)[39]。除《中國(guó)藥典》規(guī)定方法以外，多位學(xué)者嘗試了更多的HPLC條件[39-48]，以期更好地對(duì)桔梗進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，其目的大致分為兩類(lèi)：①同一色譜條件下檢測(cè)包含桔梗皂苷D在內(nèi)的更多的皂苷類(lèi)成分;②檢測(cè)桔梗中的其他化學(xué)成分，可作為其質(zhì)量評(píng)價(jià)的有效補(bǔ)充。桔梗中化學(xué)成分的HPLC法研究情況見(jiàn)表3。

2.6 ELISA法

ELISA法是基于抗原抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)與酶催化顯色反應(yīng)相結(jié)合的檢測(cè)技術(shù)，具有簡(jiǎn)便快速、高通量等優(yōu)勢(shì)，近年來(lái)在中藥質(zhì)量快速評(píng)價(jià)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛[49]。Luo等[50]以桔梗皂苷D為半抗原，通過(guò)高碘酸鈉法將其與載體蛋白偶聯(lián)制備了完全抗原，進(jìn)一步通過(guò)免疫新西蘭大耳兔后分離制備了可識(shí)別桔梗皂苷D的抗血清，最終基于完全抗原與抗血清建立了桔梗皂苷D的ELISA檢測(cè)方法。該方法的靈敏度以半數(shù)抑制濃度（IC50）計(jì)為2.70 μg/mL，檢測(cè)范圍為0.032～2.70 μg/mL;且該方法對(duì)其他皂苷類(lèi)成分（包括桔梗皂苷D2、D3、E，去芹糖桔梗皂苷E，遠(yuǎn)志皂苷D2）無(wú)明顯交叉反應(yīng)，說(shuō)明其檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可用于桔梗的質(zhì)量評(píng)價(jià)。

2.7 一測(cè)多評(píng)法

一測(cè)多評(píng)法的評(píng)價(jià)模式是以藥材中一種典型成分為參照，通過(guò)建立參照物與其他成分之間的相對(duì)校正因子（RCF），并根據(jù)RCF計(jì)算其他成分的含量的方法。該方法可實(shí)現(xiàn)利用一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品達(dá)到多成分同步快速測(cè)定的目的，具有經(jīng)濟(jì)、穩(wěn)定、快捷等優(yōu)點(diǎn)，在中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，如今已被2015版《中國(guó)藥典》（一部）收錄[51]。蔣齡周等[52]以桔梗皂苷D為內(nèi)標(biāo)，通過(guò)HPLC-ELSD建立了桔梗皂苷D與桔梗皂苷D3和桔梗皂苷E的RCF，實(shí)現(xiàn)了三者含量的同步檢測(cè);進(jìn)一步通過(guò)10批次桔梗藥材的驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，一測(cè)多評(píng)法測(cè)定結(jié)果與外標(biāo)法一致。

2.8 其他

除上述方法外，其他先進(jìn)技術(shù)[如超高液相色譜（UPLC）]和先進(jìn)理念[如質(zhì)量標(biāo)志物（Q-Marker）理論]也逐漸應(yīng)用于桔梗藥材的質(zhì)量評(píng)價(jià)中。

陳寶等[53]利用UPLC法同時(shí)測(cè)定了不同產(chǎn)地桔梗藥材中的13種核苷類(lèi)成分，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，桔梗中含有豐富的核苷類(lèi)成分，但不同產(chǎn)地樣品間核苷類(lèi)成分含量的差異顯著;同時(shí)，該方法檢測(cè)準(zhǔn)確、快速、重復(fù)性好，為桔梗的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供了新思路。

Q-Marker理論是劉昌孝院士等在2016年基于中醫(yī)藥理論和植物學(xué)科相關(guān)理論，以化學(xué)生物學(xué)技術(shù)為手段，系統(tǒng)解析中藥有效性的內(nèi)在化學(xué)成分而建立的多元質(zhì)量評(píng)價(jià)理論[54]。韋金玉等[55]通過(guò)系統(tǒng)分析桔梗的質(zhì)量控制現(xiàn)狀及其化學(xué)成分組成，從Q-Marker的核心理論出發(fā)，推薦桔梗皂苷A、D、D3、E，桔梗炔苷A、B，黨參炔苷，木犀草素，芹菜素，桔梗多糖和苦味氨基酸等為桔梗Q-Marker的首選成分，為進(jìn)一步評(píng)價(jià)桔梗的質(zhì)量提供了參考。

3 安全性評(píng)價(jià)方法

桔梗作為一種集藥、食、賞為一體，具有較高綜合經(jīng)濟(jì)價(jià)值的藥用植物，在我國(guó)的栽培歷史可追溯至20世紀(jì)70年代，距今約50年。另一方面，桔梗在朝鮮、韓國(guó)、日本等國(guó)有較高需求量，是我國(guó)主要的出口中藥材之一。因此，為追求高產(chǎn)量或便于田間管理，在桔梗的栽培過(guò)程中經(jīng)常會(huì)使用農(nóng)藥，常用的以有機(jī)氯、有機(jī)磷等殺蟲(chóng)劑和撲草凈、萘氧丙草胺等除草劑為主，容易導(dǎo)致農(nóng)藥殘留，影響桔梗的質(zhì)量和安全性。再者，由于栽培地區(qū)土壤污染或桔梗生產(chǎn)加工過(guò)程污染，均會(huì)導(dǎo)致桔梗重金屬超標(biāo)，故有必要對(duì)重金屬含量進(jìn)行監(jiān)測(cè)，以保障桔梗藥材的安全性。

3.1 農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法

目前，桔梗中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的檢測(cè)主要以氣相色譜法（GC）為主，而有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑或其他廣譜殺蟲(chóng)劑以及除草劑的檢測(cè)以GC-MS法為主。焦陽(yáng)等[56]采用分散固相萃取結(jié)合GC法建立了檢測(cè)11種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的方法并用于3批待出口桔梗的檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)3批桔梗均無(wú)農(nóng)藥殘留。該方法檢出限低（1.5～9.8 μg/kg）、線性關(guān)系好、精密度高，可滿足桔梗中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的需要。湯軍華等[57]建立了包含有機(jī)磷和廣譜殺蟲(chóng)劑以及殺螨劑在內(nèi)的6種農(nóng)藥殘留的GC-MS檢測(cè)方法，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，栽培桔梗較野生品種含有更多農(nóng)藥殘留，需引起重視。吳明根等[58]建立了桔梗藥材中撲草凈和萘氧丙草胺的GC-MS檢測(cè)方法，其分別以40%撲草凈（0.2、0.4? g/m2）和50%萘氧丙草胺（0.2、0.4 g/m2）處理桔梗，半年后收獲藥材并檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)撲草凈殘留量分別為0.028? mg/kg和0.036 mg/kg，超出日本和德國(guó)等國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，而萘氧丙草胺則未檢出。

3.2 重金屬檢測(cè)方法

桔梗中重金屬的檢測(cè)方法主要以電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS）和原子吸收光譜法（AAS）為主。趙宏蘇等[59]采用ICP-MS法測(cè)定了山東、安徽、內(nèi)蒙古等主產(chǎn)地桔梗中銅、砷、鉛、鎘、汞等5種重金屬的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，其重金屬含量均符合《藥用植物及其制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》的限量規(guī)定。同時(shí)，在檢測(cè)過(guò)程中ICP-MS法呈現(xiàn)出檢測(cè)限低、精密度好、干擾少、多種重金屬可同時(shí)測(cè)定等優(yōu)勢(shì)，利用此技術(shù)檢測(cè)桔梗中重金屬含量簡(jiǎn)便可行。魏慶紅等[60]利用AAS法測(cè)定了出口桔梗飲片中鉛和鎘的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，桔梗中鉛含量為0.96 mg/kg，鎘含量為0.083 mg/kg;且該方法操作較為簡(jiǎn)單、檢測(cè)快速、靈敏度較高，同樣適用于桔梗中藥材的重金屬含量測(cè)定。

4 結(jié)語(yǔ)

桔梗的主要偽品為絲石竹、瓦草和南沙參，其真?zhèn)舞b別方法主要包括性狀鑒別、顯微鑒別、理化鑒別和分子鑒別。在這些鑒別方法中，以理化鑒別方法準(zhǔn)確性較高、結(jié)果客觀且在單味藥及復(fù)方中應(yīng)用最為廣泛;分子鑒別方法結(jié)果最為準(zhǔn)確，且不但可以用于真?zhèn)舞b別，還可用于產(chǎn)地和品種鑒別，是現(xiàn)代生藥學(xué)研究的熱點(diǎn)。桔梗的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法主要包括總體評(píng)價(jià)和指標(biāo)性成分評(píng)價(jià)，其中GC-MS、UV、指紋圖譜和IR等技術(shù)方法主要用于整體評(píng)價(jià)，而HPLC、ELISA、UPLC、一測(cè)多評(píng)法和Q-Marker等技術(shù)、方法和理念多是以桔梗中的單個(gè)或多個(gè)指標(biāo)性成分為依據(jù)進(jìn)行的質(zhì)量評(píng)價(jià)。其中，指紋圖譜和HPLC是目前應(yīng)用最多的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法，且以桔梗皂苷D為代表的皂苷類(lèi)成分是桔梗質(zhì)量評(píng)價(jià)的主要指標(biāo)性成分。GC、GC-MS、ICP-MS和AAS等方法多用于桔梗的安全性評(píng)價(jià);且通過(guò)對(duì)目前桔梗的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，其農(nóng)藥殘留和重金屬殘留均符合相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)，安全性較好。

為進(jìn)一步完善桔梗的真?zhèn)舞b別和質(zhì)量評(píng)價(jià)體系，筆者認(rèn)為應(yīng)圍繞真?zhèn)巍?yōu)劣、安全、有效等核心問(wèn)題開(kāi)發(fā)高效、實(shí)用且符合中藥特征的方法。具體可從以下兩個(gè)方面加強(qiáng)：（1）開(kāi)發(fā)適用于現(xiàn)場(chǎng)化鑒別與評(píng)價(jià)的技術(shù)方法，因?yàn)橹兴幍蔫b別任務(wù)處在中藥產(chǎn)業(yè)的最前端，往往在中藥采購(gòu)和生產(chǎn)環(huán)節(jié)應(yīng)用最多，故簡(jiǎn)便、高效、現(xiàn)場(chǎng)化的鑒別方法將極大地便利產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用;（2）圍繞“成分-功效”之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系，建立符合中藥“多成分、多靶點(diǎn)、多功效”特性的質(zhì)量評(píng)價(jià)體系，以及基于Q-Marker理念的桔梗質(zhì)量評(píng)價(jià)方法。

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（收稿日期：2021-01-16 修回日期：2021-04-26）

（編輯：羅 瑞）