徐雯 馮賓施 何熙桐

摘要：（HPLC-MS/MS）是一種檢測獸藥殘留的重要技術(shù)，該技術(shù)在應(yīng)用中主要是通過高效液相色譜原理綜合相應(yīng)的定性、定量分析系統(tǒng)對具有高沸點(diǎn)、熱不穩(wěn)定化合物、非揮發(fā)新的化合物進(jìn)行分離鑒定，該技術(shù)在應(yīng)用中主要通過大氣壓化學(xué)電離技術(shù)和電噴霧電離技術(shù)對待檢測物體進(jìn)行定性分析。本文中首先探究了高效液相色譜使用在獸藥殘留檢測中存在的問題，然后再結(jié)合實(shí)際情況，提出完善高效液相色譜使用在獸藥殘留檢測中的處理措施，為完善我國現(xiàn)有高效液相色譜獸藥殘留檢測技術(shù)提供些許參考意見。

關(guān)鍵詞：獸藥殘留檢測;高效液相色譜;問題探究;處理對策

引言

高效液相色譜的工作原理是利用HPLC技術(shù)將待分析的成分分離出來，并將其送入質(zhì)譜檢測系統(tǒng)。高效液相色譜技術(shù)在離子源的高溫高壓下，便可以將待檢測物體由液態(tài)向氣態(tài)進(jìn)行轉(zhuǎn)變，使帶檢測物體成為氣態(tài)化的準(zhǔn)分子離子，該分析儀可以對待檢測物體進(jìn)行一級質(zhì)量分析，并根據(jù)質(zhì)核比率進(jìn)行質(zhì)荷比分離，這樣待檢測氣體在碰撞式中母離子變換誘導(dǎo)解離，而母離子的特征碎片會隨著二級質(zhì)量分析儀再次進(jìn)行分離。

一、高效液相色譜使用在獸藥殘留檢測中存在的問題

在采用高效液相色譜技術(shù)進(jìn)行獸藥殘留分析的過程，主要存在以下幾點(diǎn)缺陷：一是高效液相色譜技術(shù)在采用中主要以篩選法為主，測定動物飼料結(jié)構(gòu)相似藥物的過程中，其主要是進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，因此不能對動物飼料中同類型藥物進(jìn)行定性分析，導(dǎo)致動物飼料中的獸藥殘留分析結(jié)論精確度較差;二是液相色譜技術(shù)有時在測定畜牧產(chǎn)品中靈敏度低，選擇性差等特點(diǎn)，越來越難以滿足用戶的要求;三是現(xiàn)階段對獸藥殘留的限制越來越嚴(yán)格，我國政府已經(jīng)制定并實(shí)施了獸藥殘留標(biāo)準(zhǔn)，明確規(guī)定了在動物尿液中的進(jìn)行獸藥殘留分析中，對禁用獸藥（A類），如硝基呋喃等，在分析期間判定點(diǎn)（IPs）不在4以下，而對禁用獸藥（B類），如磺胺類，判定點(diǎn)（IPs）在不在3以下的較高要求。

二、完善高效液相色譜使用在獸藥殘留檢測中的處理措施

1.采用酸化乙腈進(jìn)行樣品提取，提高獸藥殘留量檢測精度

對動物性食品進(jìn)行獸藥殘留檢測，可以保障動物飼料的健康性，在采用高效液相色譜進(jìn)行飼料中獸藥殘留檢測的過程中，如果僅是采用單一藥品樣品檢測，那么可能無法提取飼料樣品中的獸藥殘留量，但是對樣品采用酸化乙腈進(jìn)行直接提取，在交提取后的樣品采用甲酸溶液進(jìn)行稀釋，這樣便可以形成以甲酸溶液和乙腈體系為主的梯度洗脫，在對獸藥殘留藥進(jìn)行檢測中，利用C18色譜柱便可以精準(zhǔn)的檢測出動物飼料中的獸藥殘留量，采用這一方法便可以對動物飼料中的苯比咪唑類藥物濃度進(jìn)行監(jiān)測，通常監(jiān)測范圍在0.02～10.0mg/L，此外在這一范圍內(nèi)可以形成良好的線性監(jiān)測數(shù)據(jù)。在對樣品進(jìn)行檢測完畢后，再通過采用三氯甲烷提取一定的溶液，采用SPE小柱進(jìn)行深度凈化，就可以再次形成外標(biāo)法定量，采用這一方法對飼料中的獸藥殘留量回收率較高，且定量限定額可達(dá)到0.05mg/L。

2.利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，提高畜產(chǎn)品獸藥殘留量測定精度

在對畜產(chǎn)品中的獸藥殘留量進(jìn)行檢測的過程中，可采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行檢測，該方法可以對畜產(chǎn)品中的喹諾酮類藥物進(jìn)行精準(zhǔn)檢測，通常采用串聯(lián)質(zhì)譜法可以對動物源性食品中弗羅沙星、依諾沙星、諾氟沙星、斯帕沙星等7種喹諾酮類藥物進(jìn)行檢測。在檢測過程中依然可以采用乙腈溶液進(jìn)行提取，將提取后的溶液通過正乙烷溶液進(jìn)行離析脫脂，在采用小柱凈化對強(qiáng)陽離子進(jìn)行固相萃取，這樣便可以對1.0～100ug/L的喹諾酮類藥物進(jìn)行檢測，在對動物源性食品中的獸藥殘留量進(jìn)行回收率檢查的過程中，發(fā)現(xiàn)動物源性食品中的獸藥殘留量回收率可達(dá)到93%，在對獸藥殘留進(jìn)行精準(zhǔn)檢測的過程中，還可以通過串聯(lián)質(zhì)譜法與正離子檢測法相配合的形式，對不同類型的氨基酸縮合而成的小分子肽類獸藥成分進(jìn)行監(jiān)測，但是在這一過程中需要采用濃度在4%的三氯乙酸乙腈溶液對蛋白進(jìn)行除去，再采用濃度在1%的甲酸和1%的甲酸乙腈進(jìn)行混合，這樣便可以的畜產(chǎn)品中的多肽類抗生素進(jìn)行提取，且提取回收率在75%左右。

3.利用甲醇-乙酸乙酯，提高畜禽尿液獸藥檢測精度

在對畜禽尿液中的獸藥進(jìn)行檢測的過程中，可以采用乙醇-乙酸乙酯進(jìn)行檢測，通過這一方法便可以對畜禽尿液中十余種鎮(zhèn)靜劑內(nèi)藥物進(jìn)行檢測，其主要步驟是采用濃度在1%的甲酸溶液與乙腈溶液進(jìn)行混合，然后通過色譜柱對樣品進(jìn)行分離，進(jìn)而采用電噴霧正電子模式對樣品進(jìn)行電離，再通過基質(zhì)校準(zhǔn)對畜禽尿液中的獸藥殘留量進(jìn)行定量分析。同時在檢測過程中可以采用LC-MS/MS的數(shù)據(jù)譜圖受儀器在全掃描模式下進(jìn)行獸藥殘留量檢測，但是在檢測中不同儀器條件（如碰撞能、碰撞氣體流量等）給出的化合物高效液相色譜圖會有很大差異，這就需要檢測人員對檢測儀器進(jìn)行精準(zhǔn)調(diào)節(jié)。

三、結(jié)束語

高效液相色譜技術(shù)在科學(xué)研究中可以作為一種高效分離、定性、定量的離子檢測技術(shù)，對飼料、食品、尿液中的獸藥殘留量具有著顯著的檢測優(yōu)勢。同時在采用該技術(shù)的過程中，對樣品的處理工藝較為簡單，可以在同一步驟中對樣品中的多種藥物成分進(jìn)行殘留檢測，并不需要對藥品進(jìn)行衍生化反應(yīng)，這樣便可以顯著提高樣品的檢測精度。

在科研院所和大型質(zhì)檢機(jī)構(gòu)可以應(yīng)用所以高效液相色譜技術(shù)，是因?yàn)楦咝б合嗌V技術(shù)在對殘留獸藥進(jìn)行前掃描測定的過程中，可以采用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)方法對殘留獸藥中的化合物結(jié)構(gòu)進(jìn)行離子分析，進(jìn)一步提高我國現(xiàn)有高效液相色譜技術(shù)的檢測精度。

參考文獻(xiàn)

[1]徐偉，耿士偉，劉路，etal.高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法同時檢測豬肉中125種獸藥殘留[J].天津農(nóng)業(yè)科學(xué)，2020（2）.

[2]陳興連，林濤，劉興勇，etal.超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測定魚和蝦中多類禁，限用獸藥殘留[J].色譜，2020（5）：538-546.

[3]黃梅花.QuEChERS結(jié)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定雞蛋中氟蟲腈與氯霉素等7種農(nóng)獸藥殘留[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2020，011（006）：1821-1826.

[4]付體鵬，張峰，劉力，etal.高效液相色譜-電噴霧-iFunnel-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定豬尿液中20種禁用獸藥殘留[J].分析測試學(xué)報，2019，032（010）：1153-1159.

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