周 潔，張 波，李小林，葉 雷，譚 偉

（四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所，四川 成都 610066）

靈芝Ganoderma lucidum隸屬于擔(dān)子菌綱（Basidiomycete） 多孔菌目 （Polyporales） 多孔菌科（Polyporaceae） 靈芝屬 （Ganoderma），是2020版藥典一部中收錄的中藥，具有“補(bǔ)氣安神，止咳平喘”的功效，可用于治療心神不寧，失眠心悸，肺虛咳喘，虛勞短氣，不思飲食[1]。

20世紀(jì)50年代末我國人工靈芝栽培獲得成功，90年代隨著栽培技術(shù)發(fā)展與普及，靈芝人工栽培逐漸形成規(guī)模并不斷擴(kuò)大[2]。到2018年據(jù)中國食用菌協(xié)會(huì)統(tǒng)計(jì)，全國靈芝產(chǎn)量為16.77萬噸[3]。

段木栽培靈芝是我國靈芝栽培模式之一[2]，其中一個(gè)重要的技術(shù)環(huán)節(jié)是對(duì)菌棒進(jìn)行“覆土”或“埋土”[2，4-5]，而關(guān)于靈芝菌棒的覆土種類試驗(yàn)研究較少?；诖?，以四川省的水稻土、紫色土、黃壤和石灰?guī)r土四大土壤類型為覆土材料，探討不同覆土材料對(duì)段木栽培靈芝產(chǎn)量及品質(zhì)的影響，為靈芝段木栽培選擇適宜覆土材料提供科學(xué)依據(jù)，豐富靈芝段木栽培學(xué)技術(shù)的內(nèi)容。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試菌株

靈芝品種“川圓芝1號(hào)”（審定編號(hào)：川審菌2016 004），由四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所微生物研究室提供。

1.1.2 栽培種準(zhǔn)備

栽培種基質(zhì)配方為棉籽殼90%、麥麩5%、玉米粉4%、石膏1%，基質(zhì)含水量65%。以此基質(zhì)按參考文獻(xiàn)[4]“靈芝的菌種生產(chǎn)”制作“川圓芝1號(hào)”的玻璃瓶（容量750 mL） 栽培種裝料量0.4 kg/瓶，作為靈芝栽培種備用。

1.1.3 栽培基質(zhì)

以麻櫟（Quercus acutissima，又名青剛、櫟）[6]樹段作為靈芝的栽培基質(zhì)。

1.1.4 靈芝菌棒

按參考文獻(xiàn)[3]“靈芝的段木栽培”準(zhǔn)備短段木，按照其栽培技術(shù)進(jìn)行裝袋、滅菌，接種“川圓芝1號(hào)”栽培種，培養(yǎng)發(fā)菌，室溫控制在20℃～25℃下遮光培養(yǎng)，5 d～10 d后，發(fā)菌室每天中午通風(fēng)1次，每次1 h，隨發(fā)菌時(shí)間延長而逐漸加大通風(fēng)量。當(dāng)菌絲在斷面長滿并形成菌膜時(shí)，可微開袋口適當(dāng)增加通氣量，至菌絲布滿木段表面，即作為試驗(yàn)用菌棒備用。

1.1.5 覆土材料

以四川省的4種類型土壤（紫色土、水稻土、黃壤和石灰?guī)r土）及建筑河沙作為靈芝菌棒的覆土材料。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

設(shè)置以紫色土、水稻土、黃壤和石灰?guī)r土4種土壤分別覆蓋靈芝脫袋菌棒，并設(shè)置建筑河沙覆蓋（CK1） 和不覆土（CK2） 2個(gè)對(duì)照，共6個(gè)覆土材料處理，具體處理設(shè)計(jì)見表1。

表1 不同覆土材料栽培靈芝的處理設(shè)計(jì)Tab.1 Treatments of Ganoderma lucidum cultivation covered with different soil materials

1.2.2 試驗(yàn)方法

在出芝大棚地面上用磚塊圍碼成1.8 m×1.6 m的長方形試驗(yàn)小區(qū)，每個(gè)小區(qū)面積2.88 m2，每種試驗(yàn)處理使用3個(gè)小區(qū)，共計(jì)18個(gè)小區(qū)，用于排放靈芝菌棒。

將備好的菌棒放入小區(qū)內(nèi)，脫去菌棒塑料袋，每個(gè)小區(qū)均勻排放菌棒75 kg。

除CK2外，其余均在菌棒之上和菌棒之間分別覆蓋和填滿相應(yīng)覆土材料，之后向覆蓋材料一次性澆透水，凹陷處補(bǔ)足覆蓋材料，平整覆蓋層表面。

每個(gè)小區(qū)為1次重復(fù)，使用覆土材料100 kg，覆蓋厚度約1.5 cm，3次重復(fù)共使用覆土材料300 kg（注：CK2不覆土）。小區(qū)之間隨機(jī)排列見圖1。

1.2.3 出芝管理

參照譚偉等[4]靈芝的段木栽培中出芝管理方法進(jìn)行溫度、光照、水分和空氣環(huán)境調(diào)控管理。溫度28℃～32℃，棚內(nèi)相對(duì)濕度保持在85%～90%。芝柄伸長期應(yīng)減少通風(fēng)次數(shù)，并適當(dāng)調(diào)整光照強(qiáng)度，約為300 lx～1 000 lx。芝蓋形成期，當(dāng)菌柄長至5 cm，要及時(shí)加大通風(fēng)，并適當(dāng)增加光照強(qiáng)度。子實(shí)體成熟期，盡量少噴水，僅保持土壤濕潤狀態(tài)，光照強(qiáng)度可繼續(xù)增大，并有充足的氧氣供應(yīng)。

1.2.4 芝體采收

當(dāng)靈芝子實(shí)體邊緣黃白色生長圈消失，開始彈射孢子時(shí)，標(biāo)志著靈芝子實(shí)體已成熟[4]，此時(shí)可采收供試小區(qū)內(nèi)的靈芝子實(shí)體。

1.3 測定方法

1.3.1 子實(shí)體產(chǎn)量及性狀

常規(guī)方法測量供試處理小區(qū)的靈芝子實(shí)體產(chǎn)量和菌蓋直徑、菌蓋厚度、菌柄長度等形態(tài)性狀。

1.3.2 子實(shí)體活性物質(zhì)含量

參照《中華人民共和國藥典》中靈芝多糖測定法、三萜測定法測定供試靈芝子實(shí)體多糖、三萜含量[1]。

1.4 數(shù)據(jù)分析

利用SPSS 20數(shù)據(jù)處理軟件，對(duì)供試靈芝子實(shí)體產(chǎn)量及大小、多糖及三萜含量等數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 靈芝子實(shí)體產(chǎn)量

不同覆土材料靈芝產(chǎn)量及其差異性見表2，供試處理靈芝子實(shí)體發(fā)生比較見圖2。

表2 不同材料覆蓋菌棒處理的靈芝產(chǎn)量及其差異性Tab.2 Ganoderma lucidum yields and differences of different treatments

由表2、圖2可知，供試6個(gè)處理栽培“川圓芝1號(hào)”，每個(gè)小區(qū)子實(shí)體干品平均單產(chǎn)為64.40 g～1 567.73 g，極差為 1 502.60 g。平均單產(chǎn)由低至高順序依次為CK2＜紫色土＜水稻土＜CK1河沙＜石灰?guī)r土＜黃壤，其中，CK2不覆土處理的單產(chǎn)最低為64.40 g，與其他處理相比呈極顯著差異；覆蓋黃壤處理單產(chǎn)最高達(dá)1 567.73 g，與覆蓋石灰?guī)r土、CK1河沙的單產(chǎn)無顯著差異；覆蓋黃壤、石灰?guī)r土、CK1河沙處理的單產(chǎn)顯著高于覆蓋紫色土、水稻土以及CK2不覆土。結(jié)果表明，不同類型的覆土材料對(duì)段木栽培靈芝產(chǎn)量存在不同影響，不覆土栽培（CK2） 的靈芝產(chǎn)量僅為覆土處理的4.11%～5.96%。

2.2 靈芝子實(shí)體性狀

不同覆土材料靈芝子實(shí)體性狀見表3。

表3 不同覆土材料靈芝子實(shí)體性狀及其差異性Tab.3 Morphological index and differences of Ganoderma lucidum fruiting bodies of different treatments

由表3可知，不同覆土材料靈芝子實(shí)體菌蓋直徑 （菌蓋徑面的最大長度）[7]為 20.02 mm～60.61 mm，極差為40.59 mm。菌蓋平均直徑由小至大依次為CK2＜紫色土＜水稻土＜石灰?guī)r土＜黃壤＜CK1，其中，不覆土處理（CK2）的菌蓋直徑最小，與其他處理差異顯著；覆蓋河沙（CK1）處理的菌蓋直徑最大，并與覆蓋黃壤處理的菌蓋直徑差異不顯著，但顯著大于其他處理。

不同覆土材料靈芝子實(shí)體菌蓋厚度（菌蓋最厚處的厚度），其子實(shí)體菌蓋平均厚度為6.97 mm～13.23 mm，極差為 6.26 mm。供試各個(gè)處理子實(shí)體菌蓋平均厚度由薄至厚順序依次為CK2＜水稻土＜紫色土＜石灰?guī)r土＜黃壤＜CK1。其中，不覆土處理的菌蓋最薄，而且與其他處理差異顯著；覆蓋河沙處理的菌蓋最厚，并與覆蓋紫色土、水稻土、黃壤和石灰?guī)r土的菌蓋厚度差異不顯著。

不同覆土材料靈芝子實(shí)體菌柄平均長度為83.23 mm～89.31 mm，極差為 6.08 mm。子實(shí)體菌柄平均長度由短至長順序依次為CK2＜CK1＜水稻土＜黃壤＜紫色土＜石灰?guī)r土。其中，不覆土處理的菌柄最短，石灰?guī)r土處理的菌柄最長，但各處理間菌柄長度差異不顯著。

2.3 子實(shí)體多糖含量

不同覆土材料靈芝子實(shí)體多糖含量見表4。

表4 不同覆土材料靈芝子實(shí)體多糖含量及其差異性Tab.4 Polysaccharide contents and differences of Ganoderma lucidum fruiting bodies of different treatments

由表4可知，不同覆土材料靈芝子實(shí)體多糖含量為 0.50%～0.87%，極差為 0.37%。子實(shí)體多糖含量由低至高依次為CK1＜石灰?guī)r土＜黃壤＜水稻土＜CK2＜紫色土。其中，CK1河沙覆蓋菌棒處理的靈芝多糖含量最低為0.50%；紫色土處理的靈芝多糖含量最高為0.87%，并顯著高于CK1河沙處理。

2.4 子實(shí)體三萜含量

不同覆土材料靈芝子實(shí)體三萜含量見表5。

表5 不同覆土材料靈芝子實(shí)體三萜含量及其差異性Tab.5 Triterpenoid contents and differences of Ganoderma lucidum fruiting bodies of different treatments

由表5可知，不同覆土材料靈芝子實(shí)體三萜含量為 0.72%～1.15%，極差為 0.43%。子實(shí)體三萜含量由低至高依次為CK1＜石灰?guī)r土＜黃壤=紫色土＜水稻土＜CK2。其中，CK1河沙覆蓋菌棒處理的靈芝三萜含量最低為0.72%；CK2不覆土栽培靈芝三萜含量最高為1.15%，且極顯著高于其他處理。

3 討論

3.1 靈芝子實(shí)體產(chǎn)量及活性物質(zhì)含量差異

3.1.1 不同覆土材料覆蓋靈芝菌棒對(duì)子實(shí)體產(chǎn)量的影響

不覆土處理的靈芝子實(shí)體產(chǎn)量僅為覆土處理的4.11%～5.96%；覆土材料以黃壤、石灰?guī)r土和河沙為宜，其靈芝產(chǎn)量顯著高于覆蓋紫色土和水稻土。結(jié)果為靈芝段木覆土高產(chǎn)栽培提供了科學(xué)依據(jù)和數(shù)據(jù)支持，同時(shí)驗(yàn)證了菌棒覆土栽培確實(shí)是靈芝段木栽培一項(xiàng)增產(chǎn)技術(shù)措施；既為靈芝段木覆土高產(chǎn)栽培選擇適宜土壤類型提供了科學(xué)依據(jù)，又為段木靈芝生產(chǎn)者選擇適宜覆蓋土壤種類提供指導(dǎo)。

3.1.2 不同覆土材料覆蓋靈芝菌棒對(duì)靈芝子實(shí)體外觀品質(zhì)的影響

不覆土處理的靈芝子實(shí)體菌蓋小，覆蓋河沙和黃壤的菌蓋較大。段木栽培靈芝生產(chǎn)上若以獲得大菌蓋靈芝為生產(chǎn)目的，則可使用河沙或黃壤作為覆土材料。不覆土處理的靈芝菌蓋較??；覆蓋水稻土、紫色土、石灰?guī)r土、黃壤和河沙對(duì)可顯著增厚靈芝菌蓋。不同材料覆蓋菌棒對(duì)靈芝菌柄的長短無顯著影響。

3.1.3 不同覆土材料覆蓋靈芝菌棒對(duì)靈芝子實(shí)體內(nèi)在品質(zhì)的影響

覆蓋紫色土的靈芝子實(shí)體多糖含量最高為0.87%，并顯著高于覆蓋河沙處理。段木栽培靈芝生產(chǎn)上若以獲得子實(shí)體高多糖含量為生產(chǎn)目的，可使用紫色土作為覆土材料。不覆土處理的靈芝子實(shí)體三萜含量最高為1.15%，而且極顯著高于覆土處理。但綜合考慮，覆土栽培的靈芝生物量較高，其中，覆蓋黃壤栽培的靈芝產(chǎn)量為不覆土處理的24.34倍，而該處理子實(shí)體三萜含量為不覆土處理的72.17%，因此，段木栽培靈芝生產(chǎn)上若以獲得子實(shí)體高三萜含量為生產(chǎn)目的，可使用黃壤覆土栽培。

3.2 四川段木靈芝的適宜栽培區(qū)域

選用紫色土、水稻土、黃壤和石灰?guī)r土覆土材料為四川省的主要土壤類型，其中紫色土主要分布于盆地各市及涼山州、雅安市，水稻土主要分布于盆地各市和涼山州、攀枝花市，黃壤主要分布于達(dá)州市和瀘州市，石灰?guī)r土主要分布于雅安市、涼山州和廣元市[8]。基于四川主要土壤類型自然分布情況，結(jié)合試驗(yàn)研究結(jié)果分析，段木栽培靈芝若以獲得子實(shí)體高產(chǎn)為生產(chǎn)目的，則達(dá)州市、瀘州市、雅安市和涼山州為四川段木靈芝高產(chǎn)栽培的適宜區(qū)域；若以獲得子實(shí)體高多糖含量為生產(chǎn)目的，則盆地各市及涼山州、雅安市為四川段木靈芝高多糖含量栽培的適宜區(qū)域。根據(jù)生產(chǎn)目的，擇優(yōu)段木靈芝栽培區(qū)域，就地取土覆蓋栽培，既科學(xué)又便捷，實(shí)現(xiàn)低成本和高效生產(chǎn)。

4 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果為靈芝段木覆土高產(chǎn)栽培提供了科學(xué)依據(jù)和數(shù)據(jù)支持，為段木靈芝生產(chǎn)者開展高產(chǎn)栽培或高多糖含量栽培覆土材料提供了適宜的土壤類型供選擇，也進(jìn)一步分析了依據(jù)土壤類型分布和不同生產(chǎn)目的及在四川省適宜栽培區(qū)域開展段木靈芝栽培的方法，不僅豐富靈芝段木栽培學(xué)技術(shù)內(nèi)容，而且對(duì)段木靈芝生產(chǎn)具有重要指導(dǎo)作用。但不同覆土材料對(duì)段木栽培靈芝產(chǎn)量及活性物質(zhì)影響的機(jī)制、覆土材料的理化性質(zhì)等還有待深入研究，從而揭示其增產(chǎn)提質(zhì)機(jī)制或原理。