劉宇棲
【中圖分類號(hào)】R859.79 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2095-6851(2020)11--01
前言
奇異變形桿菌已經(jīng)成為醫(yī)院的主要感染菌群之一,藥物治療任然是控制其感染的主要途徑,但因臨床存在長(zhǎng)期大量以及缺乏合理用藥,導(dǎo)致抗生素的使用已嚴(yán)重影響臨床用藥療效同時(shí)易產(chǎn)生多重耐藥問(wèn)題,因此對(duì)臨床分離出的致病奇異變形桿菌進(jìn)行及時(shí)有效的藥敏試驗(yàn)勢(shì)在必行,但不同細(xì)菌的培養(yǎng)時(shí)間存在顯著不同,不同溫育時(shí)間也影響著藥敏結(jié)果的準(zhǔn)確判斷,因此,篩選最適溫育時(shí)間才能獲得合理準(zhǔn)確的藥敏判斷結(jié)果,提供臨床合理規(guī)范用藥。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)不同的溫育時(shí)間判斷呋喃妥因?qū)ζ娈愖冃螚U菌的不同MIC值。
1 材料和方法
1.1 實(shí)驗(yàn)試劑 湖南天地人腸桿菌細(xì)菌生化藥敏實(shí)驗(yàn)卡 型號(hào) TDR ONE-96
1.2 實(shí)驗(yàn)菌株 臨床分離出奇異變形桿菌株及質(zhì)控大腸埃希菌J01010101-2
1.3 實(shí)驗(yàn)器材 湖南天地人自動(dòng)加樣儀 規(guī)格型號(hào) TDR-J100 湖南天地人自動(dòng)微生物分析系統(tǒng) 規(guī)格型號(hào) TDR-300B 天地人細(xì)菌濁度儀 型號(hào)TDR-2200 標(biāo)準(zhǔn)菌株比濁管 接種環(huán) 安全生物柜
1.4 細(xì)菌的分離培養(yǎng) 從臨床標(biāo)本中分離到致病菌在安全生物柜中進(jìn)行純化分離培養(yǎng),接種于BA培養(yǎng)皿37度恒溫孵育18h-20h,校正細(xì)菌比濁儀,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,用接種環(huán)挑取變形桿菌遷徙生長(zhǎng)菌膜研磨至生化培養(yǎng)液中進(jìn)行比濁,調(diào)整細(xì)菌濁度到0.45-0.5麥?zhǔn)蠁挝?,放入TDR自動(dòng)加樣儀中,自動(dòng)加樣至藥敏培養(yǎng)液中調(diào)整濃度至5×105CFU/ml,同時(shí)自動(dòng)完成目標(biāo)菌株的生化藥敏加樣,完成的生化藥敏板放入37度恒溫箱進(jìn)行孵育培養(yǎng)。
2 結(jié)果
2.1 不同時(shí)間對(duì)呋喃妥因MIC值的影響 根據(jù)天地人腸桿菌科細(xì)菌檢測(cè)(TDR ONE-96)規(guī)范16至20小時(shí)培養(yǎng)時(shí)間,作者分別取10h和14h和20h進(jìn)行比較觀察結(jié)果判定,其中54株奇異變形桿菌呋喃妥因在10h溫育后MIC值是64mg/l,延長(zhǎng)溫育時(shí)間至14h和20h觀察結(jié)果MIC≥128mg/l,其中9株奇異變形桿菌呋喃妥因在10h溫育后MIC值是≤32mg/l,延長(zhǎng)溫育時(shí)間至14h和20h觀察結(jié)果MIC≥128mg/l,見(jiàn)下表:
3 討論
3.1 MIC變化規(guī)律
由圖表可知,呋喃妥因不同溫育時(shí)間對(duì)奇異變形桿菌的藥敏MIC值不一樣,其中14h至20hMIC值已達(dá)到最大值且無(wú)明顯變化而縮短溫育時(shí)間采取10h觀察藥敏結(jié)果的MIC值是正常溫育時(shí)間藥敏結(jié)果的1/2甚者1/4倍。
3.2 從細(xì)菌生長(zhǎng)特點(diǎn)及藥物作用機(jī)理方面分析溫育時(shí)間對(duì)MIC值的影響
奇異變形桿菌運(yùn)動(dòng)活潑遷徙性生長(zhǎng),菌落之間能形成抱團(tuán)式生長(zhǎng)菌膜,菌膜是細(xì)菌粘附于接觸表面,通過(guò)胞外多糖基質(zhì)網(wǎng)分泌的多糖,纖維蛋白等;呋喃妥因藥理作用機(jī)理是作用于細(xì)菌的氧化還原酶,破壞其生化系統(tǒng),當(dāng)實(shí)驗(yàn)調(diào)試均等麥?zhǔn)蠞舛染悍湃胪人幬餄舛鹊南嗤琍H、溫度培育條件下反應(yīng),縮短培育時(shí)間影響細(xì)菌生長(zhǎng),藥物易順利進(jìn)入胞內(nèi)影響酶活力,延長(zhǎng)培育時(shí)間奇異變形桿菌形成菌落之間菌膜,藥物達(dá)不破壞程度,產(chǎn)生耐藥現(xiàn)象,但確切原因有待進(jìn)一步研究。
4 結(jié)語(yǔ)
微生物臨床工作中,縮短細(xì)菌的藥敏培育時(shí)間觀察結(jié)果,個(gè)別藥物的MIC無(wú)明顯變化,但不同細(xì)菌生長(zhǎng)特點(diǎn)和藥物的作用機(jī)理不盡相同,《抗微生物藥敏敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)》早以備注奇異變形桿菌對(duì)呋喃妥因天然耐藥,但培育時(shí)間不到位會(huì)產(chǎn)生假陰性易會(huì)給臨床工作帶來(lái)誤導(dǎo),而呋喃諾因也是泌尿道感染的首選用藥,更因該重視其時(shí)間的培育性,給規(guī)范用藥提供參考指導(dǎo)作用。
奇異變形桿菌在自然界中分布廣泛,可寄生在人體、土壤、食物中等,正常情況下不致病,當(dāng)人體免疫力低下時(shí),其遷徙性生物膜,造成久治難愈困擾,特別是久臥在床的老人,奇異變形桿菌在感染處傷口軟組織分離出占的比例較高,是褥瘡標(biāo)本繼銅綠假單胞菌后又一主要感染菌群,同時(shí)是臥床排尿困難患者的主要尿道感染來(lái)源。
參考文獻(xiàn)
趙金鳳,苑麗,潘玉善.培養(yǎng)時(shí)間對(duì)藥敏試驗(yàn)結(jié)果的影響[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索,2012,31(07):23-16,180
邱勝豐.縮短細(xì)菌藥敏孵育時(shí)間對(duì)藥敏試驗(yàn)結(jié)果影響[J].職業(yè)與健康,2007,23(11):970-971
鄧群,雷云雪,鄭慧妮.變形桿菌感染特征及藥敏分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2007,4(7):618-319