蔣祥飛，張 利

（安徽古井貢酒股份有限公司，安徽亳州 236820）

隨著我國(guó)人民生活水平的不斷提高，葡萄酒已經(jīng)逐漸走向普通消費(fèi)者，并成為大眾所喜歡的果酒之一。葡萄酒正在向著營(yíng)養(yǎng)型、健康型、保健型、低濃度型的方向發(fā)展。葡萄酒在正常情況下是穩(wěn)定的，而且酒的顏色、質(zhì)量、理化因素和口感都是很不錯(cuò)的。酒在貯藏的過程中，由于受到各種因素的影響，會(huì)產(chǎn)生渾濁或沉淀，其中鐵等金屬離子超量是葡萄酒發(fā)生化學(xué)渾濁的主要因素。因此，如何控制鐵等金屬離子的含量，對(duì)于保證葡萄酒的穩(wěn)定性顯得尤為重要。葡萄酒中鐵含量的測(cè)定方法為GB/T 15038—2006《葡萄酒、果酒通用分析方法》4.9 鐵（原子吸收分光光度法），對(duì)其所涉及的測(cè)量范圍、線性范圍、檢出限、定量限、精密度、正確度6 個(gè)方法參數(shù)[1]進(jìn)行了檢測(cè)以確保分析數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性、科學(xué)性和嚴(yán)密性。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

1.1.1 樣品

葡萄酒酒樣：赤霞珠西拉干紅葡萄酒，市售，生產(chǎn)日期：2016年8月16日，保質(zhì)期：10年。

1.1.2 試劑及耗材

本方法中所用水應(yīng)符合GB/T 6682—1992 中二級(jí)水規(guī)格，所用試劑為優(yōu)級(jí)純。

硝酸溶液：量取8 mL硝酸，稀釋至1000 mL。

鐵標(biāo)準(zhǔn)貯備液：按GB/T 602配制。

鐵標(biāo)準(zhǔn)使用液：吸取10.00 mL鐵標(biāo)準(zhǔn)貯備液于100 mL 容量瓶中，用硝酸溶液稀釋至刻度，此溶液每毫升含10 μg鐵。

鐵標(biāo)準(zhǔn)系列：分別吸取鐵標(biāo)準(zhǔn)使用液0.00 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL、10.00 mL于5個(gè)100 mL容量瓶中，用硝酸溶液稀釋至刻度，混勻。該系列用于標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制。

1.1.3 儀器設(shè)備

原子吸收分光光度計(jì)，備有鐵空心陰極燈。

1.2 試驗(yàn)方法

采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 15038—2006《葡萄酒、果酒通用分析方法》4.9鐵（原子吸收分光光度法）。

原理：將處理后的試樣導(dǎo)入原子吸收分光光度計(jì)中，在乙炔-空氣火焰中，試樣中鐵被原子化，基態(tài)原子鐵吸收特征波長(zhǎng)（248.3 nm）的光，吸收量的大小與試樣中鐵原子濃度成正比，測(cè)其吸光度，求得鐵含量。

1.3 分析步驟

1.3.1 試樣制備

用硝酸溶液準(zhǔn)確稀釋樣品5～10 倍，搖勻，備用。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制

置儀器于合適的工作狀態(tài)，調(diào)波長(zhǎng)至248.3 nm，導(dǎo)入標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，以零管調(diào)零，分別測(cè)定其吸光度。以鐵的含量對(duì)應(yīng)吸光度繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

1.3.3 試樣的測(cè)定

將試樣導(dǎo)入儀器，測(cè)其吸光度，然后根據(jù)吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得鐵的含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 測(cè)量范圍

依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》中5.2 測(cè)量范圍的驗(yàn)證方法，對(duì)本方法的測(cè)量范圍進(jìn)行驗(yàn)證，對(duì)0.2 mg/L 鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液、0.4 mg/L 鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液、0.5 mg/L 鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液3個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行6 次檢測(cè)分析，其結(jié)果具體如下：

（1）試驗(yàn)所得標(biāo)準(zhǔn)曲線線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)為0.9997，結(jié)果（見表1、圖1 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性）符合GB/T 27417—2017 中對(duì)于準(zhǔn)確定量方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不低于0.99的要求。

（2）精密度以不同濃度的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液6 次檢測(cè)結(jié)果值的室內(nèi)變異系數(shù)表示，其結(jié)果（見表2 標(biāo)準(zhǔn)溶液變異系數(shù)及正確度結(jié)果表）符合GB/T 27417—2017中被測(cè)組分含量為1～10 mg/kg時(shí)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)變異系數(shù)小于11%的要求。

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性

（3）正確度以不同濃度的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液的回收率來表示，即鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液6 次檢測(cè)結(jié)果的平均值與已知濃度的比值，其結(jié)果（見表3 標(biāo)準(zhǔn)溶液變異系數(shù)及正確度結(jié)果表）符合GB/T 27417—2017 中被測(cè)組分含量為0.1～1 mg/kg 時(shí)方法回收率在80 %～110%的要求。

2.2 線性范圍

依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》中5.3 線性范圍的驗(yàn)證方法，對(duì)本方法的線性范圍進(jìn)行驗(yàn)證，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)為0.9997，結(jié)果（見表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性）符合GB/T 27417—2017中對(duì)于準(zhǔn)確定量方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不低于0.99的要求。

2.3 檢出限和定量限

依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》中5.4 檢出限和定量限的驗(yàn)證方法，采用空白標(biāo)準(zhǔn)偏差法對(duì)本方法的檢出限進(jìn)行驗(yàn)證，方法的檢出限為空白試驗(yàn)的平均值與3 倍的標(biāo)準(zhǔn)偏差之和，方法定量限為方法檢出限的3倍。故本方法的方法檢出限為0.0151 mg/L，定量限為0.0453 mg/L（見表3 方法檢出限和定量限結(jié)果表)。

表2 標(biāo)準(zhǔn)溶液變異系數(shù)及正確度結(jié)果表

表3 方法檢出限和定量限結(jié)果表

2.4 正確度

依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》中5.5 正確度的驗(yàn)證方法，采用加標(biāo)回收的方法對(duì)正確度進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果方法回收率（見表4 正確度及精密度結(jié)果表）符合GB/T 27417—2017 中被測(cè)組分含量為1～100 mg/kg 時(shí)方法回收率在90%～110%的要求。

表4 正確度及精密度結(jié)果表

2.5 精密度

依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》中5.6 精密度的驗(yàn)證方法，以不同樣品6 次檢測(cè)結(jié)果值的室內(nèi)變異系數(shù)表示精密度，其結(jié)果（見表4 正確度及精密度結(jié)果表）符合GB/T 27417—2017 中被測(cè)組分含量為1～10 mg/kg時(shí)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)變異系數(shù)小于7.5%的要求。

3 結(jié)論

本次方法驗(yàn)證依據(jù)GB/T 27417—2017《合格評(píng)定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南》對(duì)GB/T 15038—2006《葡萄酒、果酒通用分析方法》4.9 鐵（原子吸收分光光度法）進(jìn)行方法驗(yàn)證，其檢測(cè)過程中所涉及的測(cè)量范圍、線性范圍、檢出限和定量限、正確度及精密度6 個(gè)方法參數(shù)均符合GB/T 27417—2017 和GB/T 15038—2006 的要求，故方法GB/T 15038—2006《葡萄酒、果酒通用分析方法》4.9鐵（原子吸收分光光度法）在本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)可用。