摘 要：苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸是日常生活中最傳統(tǒng)、最高性價比的防腐劑和甜味劑。本文通過檢驗分析，建立同時分析糕點中苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸的檢驗方法。

關(guān)鍵詞：糕點;苯甲酸;山梨酸;糖精鈉;脫氫乙酸;檢驗方法

近年來，隨著人們生活水平的提高，糕點越來越受到人們的喜愛，其樣式和品種越來越多，這在很大程度上為糕點行業(yè)的發(fā)展提供了十分有利的條件[1]。國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則中，糕點的檢驗項目中基本都包含了苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸這幾個指標(biāo)。依據(jù)國家食品安全監(jiān)督抽檢實施細(xì)則，這4個指標(biāo)的檢驗方法是GB 5009.28-2016和GB 5009.121-2016，兩種方法都是使用超高效液相色譜進(jìn)行分離，考慮到這幾種物質(zhì)的化學(xué)性質(zhì)，可以考慮使用同一種前處理方法來提高檢驗的初篩速度，從而提高檢驗工作效率。為了迅速、準(zhǔn)確地對上述參數(shù)進(jìn)行檢測，本文研究了同時檢驗糕點中苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸的方法。

1 材料與方法

1.1 儀器

高效液相色譜（賽默飛U3000，配DAD），0.22 μm有機(jī)濾膜，離心機(jī)（安亭），超聲波清洗器（安譜）。

1.2 試劑

苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：濃度均為1 000 mg/L，中國計量科學(xué)研究院;甲醇、乙腈為HPLC級（TEDIA）;乙酸銨為優(yōu)級純，實驗室用水（娃哈哈，杭州）。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配置

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（200 mg/L）

分別吸取1 000 mg/L的苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液10 mL，用水定容至50 mL，混勻。于4 ℃貯存，保存期為3個月。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

分別吸取標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（1.3.1）0、0.05、0.25、0.50、1.00、2.50、5.00 mL和10.0mL，用水定容至10 mL，配制成質(zhì)量濃度分別為0、1.00、5.00、10.0、20.0、50.0、100 mg/L和200 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液，臨配現(xiàn)用。

1.4 色譜條件

色譜柱：C18柱，流動相：甲醇+乙酸銨溶液=4+96，柱溫：35 ℃，流速：1 mL/min，檢測波長：230 nm，進(jìn)樣量：10 μL。

1.5 樣品前處理方法

準(zhǔn)確稱取約2 g樣品，置于50 mL離心管中，加水約20 mL，渦旋混勻，超聲20 min，加亞鐵氰化鉀溶液和乙酸鋅溶液各2 mL，渦旋混勻，4 000 r/min離心5 min，將水相轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中，在殘渣中加水20 mL，渦旋混勻，4 000 r/min離心5 min，將水相轉(zhuǎn)移前一步驟的容量瓶中，用水定容至刻度，混合均勻，經(jīng)過0.22μm水系濾膜過濾，供進(jìn)樣。

2 結(jié)果與討論

2.1 樣品前處理的選擇

糕點的種類比較多，基質(zhì)相對比較復(fù)雜，按照GB 5009.28-2016[2]中的規(guī)定，糕點按照一般性試樣進(jìn)行前處理，通過蛋白質(zhì)沉淀劑作用除去樣品中的蛋白質(zhì)，從而減少基質(zhì)中蛋白質(zhì)對檢樣出峰及峰型的干擾。而脫氫乙酸按照GB 5009.121-2016[3]的方法，利用硫酸鋅、氫氧化鈉溶液進(jìn)行蛋白沉淀后，用正己烷進(jìn)行除脂。本實驗過程對糕點樣品進(jìn)行加標(biāo)檢驗，使用GB 5009.28-2016中的蛋白質(zhì)沉淀劑（亞鐵氰化鉀和乙酸鋅）沉淀后離心，取上清液定容進(jìn)樣。

2.2 色譜條件選擇

在涉及苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸的相關(guān)檢測標(biāo)準(zhǔn)中，流動相主要為甲醇、乙酸銨。本實驗測試了甲醇+0.02 mol/L乙酸銨兩種流動相體系，通過不同流動相比例來分離這4種物質(zhì)。通過試驗發(fā)現(xiàn)甲醇+0.02 mol/L乙酸銨（4+96）在本實驗洗脫程序下能夠較好分離這4種物質(zhì)。

2.3 方法的線性范圍和檢出限

本實驗采用直接配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制工作曲線，對標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定，來考察方法的線性范圍和檢出限，以信噪比10∶1作為該方法定量下線，具體見表1。

2.4 方法精密度與回收率

選用糕點中較為典型的面包和月餅兩種樣品，將兩種樣品分兩組分別加入一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，配制成50、100、200 mg/L、400 mg/L濃度水平，進(jìn)行回收試驗，計算其回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。測定結(jié)果表明，這4種物質(zhì)的回收率在92.7%～99.6%，RSD小于10%。

3 結(jié)論

通過檢驗分析，探討建立同時分析糕點中的苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸的檢驗方法。經(jīng)檢驗發(fā)現(xiàn)，通過常規(guī)的蛋白質(zhì)沉淀后離心進(jìn)樣，基本可以滿足檢驗要求。該方法在后期實驗室大批量篩查檢驗過程中可以得到應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

[1]楊靜，陳遂，李佩斯，等.論糕點食品行業(yè)質(zhì)量安全問題及應(yīng)對措施[J]食品界，2017（4）：40-41.

[2]中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.GB 5009.28-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2016.

[3]中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.GB 5009.121-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脫氫乙酸的測定[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2016.

作者簡介：薛佳佳（1993—），女，漢族，江蘇省鹽城人，本科。研究方向：食品檢驗。