韓丹 許琰

[摘要] 目的 通過對(duì)渝東北地區(qū)1583例新生兒耳聾基因篩查結(jié)果進(jìn)行分析，探討耳聾易感基因突變位點(diǎn)在新生兒中的攜帶率與致病性。方法 方便選取2015年1月—2019年1月渝東北地區(qū)接受耳聾基因篩查的1 583例新生兒作為研究對(duì)象。采集新生兒足跟血液樣本進(jìn)行基因檢測(cè)，利用飛行時(shí)間質(zhì)譜分析技術(shù)對(duì)常見耳聾易感基因進(jìn)行檢測(cè)分析，統(tǒng)計(jì)1 583例新生兒耳聾易感基因攜帶情況。 結(jié)果 1 583例新生兒血液樣本中檢出耳聾易感基因陽(yáng)性45例，攜帶陽(yáng)性率為2.84%，其中GJB2基因突變陽(yáng)性率最高，檢出陽(yáng)性率高達(dá)1.52%（24/1 583）。結(jié)論 通過耳聾易感基因篩查能夠早期、及時(shí)發(fā)現(xiàn)并預(yù)測(cè)新生兒耳聾，通過制定針對(duì)性干預(yù)策略能夠有效降低新生兒耳聾發(fā)生率，因此在渝東北地區(qū)推廣新生兒耳聾易感基因篩查具有重要的臨床意義。

[關(guān)鍵詞] 渝東北地區(qū);新生兒耳聾;耳聾易感基因篩查;GJB2基因突變;臨床價(jià)值

[中圖分類號(hào)] R764.43? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-0742（2020）03（a）-0183-03

Analysis of Genetic Screening Results for Deafness in 1583 Neonates in Northeast of Chongqing

HAN Dan， XU Yan

Department of Clinical Laboratory， Maternal and Child Health Hospital of Kaizhou District， Chongqing， 404400 China

[Abstract] Objective To investigate the carrying rate and pathogenicity of deafness-susceptible gene mutations in neonates by analyzing the results of screening for deafness in 1 neonates in the northeast of Chongqing. Methods A total of 1583 newborns who were screened for deafness in Northeast Chongqing from January 2015 to January 2019 were convenient selected as the research subjects. Heel blood samples of newborns were collected for genetic testing， and time-of-flight mass spectrometry was used to detect and analyze the common deafness-susceptible genes. Statistics were carried on 1，583 neonatal deafness-susceptible genes. Results 45 cases of deafness-susceptible genes were detected in 1 583 newborn blood samples， and the positive rate was 2.84%. Among them， the positive rate of GJB2 mutation was the highest， and the positive rate was 1.52% （24/1 583）. Conclusion Deafness-susceptible gene screening can detect and predict neonatal deafness early and timely， and the development of targeted intervention strategies can effectively reduce the incidence of neonatal deafness. Therefore， the promotion of neonatal deafness-susceptible gene screening in Northeast Chongqing has clinical significance.

[Key words] Northeast Chongqing; Neonatal deafness; Deafness-susceptible gene screening; GJB2 gene mutation; Clinical value

先天性耳聾是新生兒群體中較為常見的先天性缺陷，近年來流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示全球范圍內(nèi)新生兒耳聾發(fā)病率與患病率呈整體上升趨勢(shì)，我國(guó)新生兒耳聾發(fā)病率高達(dá)3%，2006年中國(guó)殘疾人調(diào)查數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，我國(guó)目前存在聽力功能障礙患者共2 780萬人，并且每年有超過2萬例新生耳聾出現(xiàn)，另還有5萬余例/年遲發(fā)型耳聾患兒被發(fā)現(xiàn)。因此進(jìn)行準(zhǔn)確的新生兒耳聾篩查對(duì)提升新生兒質(zhì)量、降低新生兒耳聾發(fā)病率具有重要的臨床與社會(huì)意義[1]。臨床研究表明[2]，部分耳聾新生兒是由基因與環(huán)境共同作用導(dǎo)致的，并有超過65%的耳聾患者與遺傳因素密切相關(guān)，而其根本因素則為基因突變，有學(xué)者提出通過易感基因篩查可提升新生兒耳聾的早期診斷能力[3]，目前新生兒耳聾基因篩查已在我國(guó)部分地區(qū)開展，但仍處于起步階段，而通過新生兒耳聾基因篩查可對(duì)篩查陽(yáng)性的患兒進(jìn)行提前預(yù)警，并結(jié)合相應(yīng)的干預(yù)措施預(yù)防耳聾的發(fā)生，降低新生兒出生缺陷發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。該組研究則通過對(duì)2015年1月—2019年1月渝東北地區(qū)1 583例新生兒耳聾基因篩查結(jié)果進(jìn)行分析，探討耳聾易感基因突變位點(diǎn)在新生兒中的攜帶率與致病性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便選取渝東北地區(qū)接受耳聾基因篩查的1 583例新生兒作為研究對(duì)象。其中男嬰805例，女嬰778例，均為足月分娩新生兒，其中經(jīng)陰道分娩895例，剖宮產(chǎn)688例，所有新生兒均無任何畸形癥狀或表現(xiàn)，新生兒家長(zhǎng)已簽署知情同意書，已通過該院倫理道德委員會(huì)審核。

1.2? 研究方法

新生兒家長(zhǎng)簽署知情同意書后，采集新生兒足跟血作為樣本采用飛行時(shí)間質(zhì)譜分析技術(shù)對(duì)常見的耳聾易感基因進(jìn)行檢測(cè)，包括4個(gè)耳聾基因共20個(gè)基因突變位點(diǎn)（GJB2：35delG、167delT、176-191del116GCTGCAAGAAGGTGTG、235- delC、299- 300delAT;GJB3：538C>T、547G>A;SLC26A4（PDS）：281C>T、589G>A、1174A>T、1226G>A、1229C>T、1975G>C、2027T>A、2162C>T、2168A>G、IVS7-2A>G、IVS15+5G>A;MT-RNR1（12SrRNA）：1494C>T、1555A>G）。

2? 結(jié)果

1 583例新生兒血液樣本中檢出耳聾易感基因陽(yáng)性45例，攜帶陽(yáng)性率為2.84%，其中GJB2基因突變陽(yáng)性率最高，檢出陽(yáng)性率高達(dá)1.52%（24/1 583）。見表1。

3? 討論

耳聾在社會(huì)、臨床上均為常見殘疾病種，其致病病因較為復(fù)雜多用，可由細(xì)菌病毒感染、耳毒性藥物、聲損傷等環(huán)境因素導(dǎo)致，但近年來臨床研究證實(shí)超過65%的耳聾患者與遺傳因素密切相關(guān)，其根本致病因素為基因突變，可由單一基因突變或復(fù)合突變所導(dǎo)致。相關(guān)調(diào)查研究顯示[4]，非綜合性耳聾主要是由GJB2、GJB3、SLC26A4以及線粒體12SrRNA等基因突變引起，其中GJB2基因突變是臨床上最為常見的耳聾基因，數(shù)據(jù)調(diào)查結(jié)果顯示GJB2基因突變?cè)谙忍煨灾囟榷@患者中發(fā)生率約為30%～50%，定位13q11-12片段，其作為常染色體隱性遺傳基因主要負(fù)責(zé)編碼Cx26蛋白并分布于耳蝸支持細(xì)胞與結(jié)締組織中，若發(fā)生基因突變可導(dǎo)致Cx26蛋白無功能進(jìn)而引發(fā)感音性神經(jīng)耳聾，GJB2基因目前已知具備100多種突變類型，不同人種GJB2常見的基因突變形式存在較大的差異，白種人以35delC最為常見，北歐猶太人種則以167delT最為常見，而其中國(guó)地區(qū)最為常見的GJB2基因突變位點(diǎn)為235delC，有學(xué)者通過數(shù)據(jù)調(diào)查、分析發(fā)現(xiàn)[5]，235delC型突變是臨床上最為常見的耳聾致病性基因突變位點(diǎn)，其構(gòu)成比接近耳聾基因易感新生兒的40%左右，在所有致病性耳聾基因突變中約占74%，因此235delC型突變是導(dǎo)致中國(guó)地區(qū)耳聾的主要病因，而該組調(diào)查結(jié)果顯示，1583例新生兒血液樣本中檢出耳聾易感基因陽(yáng)性45例，攜帶陽(yáng)性率為2.84%，其中GJB2基因突變陽(yáng)性率最高，檢出陽(yáng)性率高達(dá)1.52%（24/1583），以235delC突變位點(diǎn)最為常見，約占所有基因易感耳聾新生兒的37.78%（17/45），這與既往臨床研究結(jié)果相似。

而通過進(jìn)一步回顧分析可知，GJB2基因突變中235delC純合突變于新生兒時(shí)期便可表現(xiàn)出不同程度的聽力損失，是最為直接、嚴(yán)重導(dǎo)致新生兒耳聾的基因突變類型之一，當(dāng)235位點(diǎn)C堿基純合性出現(xiàn)缺失將誘發(fā)移碼突變[6]，產(chǎn)生無功能Cx26蛋白從而導(dǎo)致鉀離子在淋巴結(jié)中的循環(huán)受到阻礙，繼發(fā)性導(dǎo)致Corti器鉀中毒，從而誘發(fā)新生兒出現(xiàn)感音性神經(jīng)耳聾[7]，因此對(duì)于檢測(cè)出235delC純合突變陽(yáng)性的新生兒應(yīng)及早予以相應(yīng)的治療干預(yù)，減少聽力功能障礙的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[8-9]。GJB3突變則可引起常染色體顯性遺傳、隱形遺傳性非綜合癥型遺傳性耳聾，其中538C>T發(fā)生突變可引起終止密碼子提前出現(xiàn)，進(jìn)而引起基因的表達(dá)出現(xiàn)異常[10]。而在分析耳聾易感基因篩查方面認(rèn)為[11]，耳聾易感基因的出現(xiàn)與發(fā)展是新生兒先天性耳聾研究的重大進(jìn)展與突破，其可實(shí)現(xiàn)及早診斷并提升臨床確診率，并可在早期實(shí)現(xiàn)疾病的診斷與治療，為降低新生兒先天性耳聾發(fā)生率提供了客觀理論依據(jù)[12]。

而近年來有關(guān)耳聾遺傳學(xué)與分子流行病學(xué)的相關(guān)數(shù)據(jù)使人們?cè)絹碓街匾曔z傳基因在保護(hù)聽力健康與篩查聽力異常中的重要性，近十年來遺傳性耳聾的發(fā)病機(jī)制及其分子流行病學(xué)也成為人類耳聾研究的總要內(nèi)容之一。結(jié)合該組研究結(jié)果認(rèn)為GJB2基因突變與遲發(fā)型進(jìn)行性聽力衰退密切相關(guān)，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)12SrRNA155G、C1494T、SLC26A4基因突變患者在出生時(shí)也不一定表現(xiàn)出聽力損失，因此結(jié)合目前臨床實(shí)際情況來看，對(duì)新生兒進(jìn)行聽力損失的GJB2、SLC26A4、1555A-G、1494C-T基因的檢測(cè)具有重要的臨床意義，同時(shí)聯(lián)合巨細(xì)胞病毒感染的篩查能夠進(jìn)一步提升新生兒遲發(fā)型聽力損傷的早期診斷與病因診斷，可有效做到早發(fā)現(xiàn)、早預(yù)防、早治療，進(jìn)而提升新生兒質(zhì)量并消減兒童先天性疾病治療方面的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

綜上所述，耳聾基因的發(fā)現(xiàn)與檢測(cè)是臨床耳科研究的重要突破，將耳聾的臨床診斷由影像學(xué)與聽力學(xué)推升至分子水平，極大程度提升了耳聾的早期診斷與預(yù)防能力，通過耳聾易感基因篩查能夠早期、及時(shí)發(fā)現(xiàn)并預(yù)測(cè)新生兒耳聾，通過制定針對(duì)性干預(yù)策略能夠有效降低新生兒耳聾發(fā)生率，渝東北地區(qū)新生兒耳聾現(xiàn)象頗為嚴(yán)峻，應(yīng)在渝東北地區(qū)推廣新生兒耳聾易感基因的篩查工作，進(jìn)而達(dá)到早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷與及時(shí)治療，降低渝東北地區(qū)新生兒出生缺陷的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，真正做到優(yōu)生優(yōu)育、提升新生兒質(zhì)量。

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（收稿日期：2019-12-09）