劉艷嬌

【摘要】目的：檢測(cè)分析CDC20、TOP2在食管磷癌組織中的表達(dá)情況及其與食管癌患者生存的關(guān)系。方法：使用熒光定量PCR（RT-qPCR）和免疫組化檢測(cè)60對(duì)食管磷癌患者癌組織和癌旁組織中CDC20、TOP2A的表達(dá)，并統(tǒng)計(jì)分析CDC20、TOP2A與食管癌患者TNM分期、淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系;隨訪，調(diào)查患者5年生存率與CDC20、TOP2A的關(guān)系。結(jié)果：RT-qPCR及免疫組化結(jié)果顯示CDC20和TOP2A在食管癌組織中表達(dá)水平顯著高于癌旁組織中表達(dá)水平（P<0.05）。CDC20、TOP2A陽(yáng)性表達(dá)與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、5年生存率呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：CDC20、TOP2A是食管癌發(fā)生的致癌因子，可能促進(jìn)食管磷癌的進(jìn)展，也是食管磷癌患者預(yù)后生存的危險(xiǎn)因子。

【關(guān)鍵詞】食管癌;CDC20;TOP2A;表達(dá);生存率

【中圖分類號(hào)】 R322.4+3

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B

【文章編號(hào)】2095-6851（2020）03-114-01

食管癌（Esophageal carcinomas）是世界上常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，其死亡率高，食管癌的病理類型主要是食管鱗癌（Esophageal squamous cell carcinomas，ESCC）[1]。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)ESCC的發(fā)生和進(jìn)展及遠(yuǎn)期生存率受多因素影響，如腫瘤的位置、大小、浸潤(rùn)程度及促癌因子等[2]。因此，對(duì)ESCC相關(guān)因子的研究對(duì)ESCC的進(jìn)展和預(yù)后生存有著重要的意義。本文研究CDC20、TOP2A在食管鱗癌中的表達(dá)情況及其與患者生存的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選我院2016年6月-2018年6月食管鱗癌患者60例，術(shù)前均未放療和化療，男性36例，女性24例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移24例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移36例;TNMⅠ期29例，TNMⅡ期16例，TNMⅢ期8例，TNMⅣ期7例。

1.2 方法

用RNA提取試劑盒提取組織RNA，再使用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒將提取RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，進(jìn)行RT-qPCR反應(yīng)。用公式Relative=power （2，△Ct） *100進(jìn)行計(jì)算。將術(shù)中切除食管癌組織和癌旁組織制作成蠟塊，再制作成石蠟切片，使用CDC20及TOP2A不同的抗體進(jìn)行免疫組化染色，最后在顯微鏡下觀察組織中CDC20及TOP2A表達(dá)情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。組間差異表達(dá)用x2試驗(yàn)進(jìn)行比較分析。P <0.05認(rèn)為是具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CDC20、TOP2A mRNA在食管鱗癌組織和癌旁組織的表達(dá)情況 RT-qPCR結(jié)果示CDC20、TOP2A在食管癌中表達(dá)水平明顯高于癌旁組織表達(dá)水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P <0.05，見圖1。

2.2 CDC20、TOP2A蛋白水平在食管鱗癌組織和癌旁組織的表達(dá)情況。免疫組化結(jié)果示CDC20、TOP2A蛋白在食管磷癌中表達(dá)水平明顯高于癌旁組織表達(dá)水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P <0.05，見表1。

2.3 CDC20、TOP2A表達(dá)與食管鱗癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期及5年生存率的關(guān)系 CDC20、TOP2A陽(yáng)性表達(dá)與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、5年生存率呈負(fù)相關(guān)（P<0.05），見表2。

3 討論

食管癌是我國(guó)高發(fā)的消化道惡性腫瘤之一，據(jù)病理研究調(diào)查顯示我國(guó)食管癌主要是ESCC。地區(qū)分布是ESCC發(fā)病的顯著特點(diǎn)，我國(guó)發(fā)病主要在河南、甘肅等，特別是河南安陽(yáng)是極高發(fā)地帶。所以，對(duì)導(dǎo)致食管癌發(fā)生、發(fā)展因素的研究極為重要。

CDC20是細(xì)胞周期蛋白，有研究表明CDC20異常表達(dá)能夠促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖，也有研究發(fā)現(xiàn)CDC20可以減慢癌細(xì)胞凋亡的速度[3]。TOP2A是一種蛋白酶，能夠調(diào)節(jié)染色質(zhì)的分離及DNA的轉(zhuǎn)錄等。多個(gè)研究顯示TOP2A在癌組織（肺、胃、乳腺等）的表達(dá)明顯高于癌旁組織[4]。

本研究發(fā)現(xiàn)CDC20和TOP2A在ESCC組織中表達(dá)高于癌旁組織，同時(shí)發(fā)現(xiàn)CDC20、TOP2A陽(yáng)性表達(dá)與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、5年生存率呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。這些結(jié)果提示CDC20、TOP2A可能促進(jìn)食管癌的發(fā)生和發(fā)展，是食管鱗癌的潛在生物標(biāo)志物，為食管鱗癌的進(jìn)一步研究提供了理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 韓書婧，魏文強(qiáng)，張澍田，等.食管癌高發(fā)地區(qū)人群危險(xiǎn)因素的調(diào)查研究[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2012，15（32）：3745—3748..

[2] 中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)食管癌專業(yè)委員會(huì).食管癌規(guī)范化診治指南[M].第2版.北京：中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社，2013：94-96.

[3] 張萍，覃文新.CDC20在細(xì)胞分裂周期中的作用[J].生命的化學(xué)，2006，26（4）：297—299.

[4] 趙艷姣，劉堯邦，劉新蘭. TOP2A 蛋白在乳腺癌中的表達(dá)及其臨床意義[J]. 寧夏醫(yī)學(xué)雜志，2018，40（11）：6，16-18.