莊 偉，車敬斌，王建民，高 鵬，張加賓

(濟(jì)南市人民醫(yī)院：1.檢驗(yàn)科；2.眼科，山東濟(jì)南 271100)

甲狀腺相關(guān)眼病(TAO)臨床發(fā)病率較高，可對患者視覺功能及正常生活造成嚴(yán)重影響。自身免疫性甲狀腺病患者為TAO高發(fā)群體，尤其是Graves 病，有調(diào)查顯示，Graves 病患者中，高達(dá)25%～50%可產(chǎn)生TAO[1]。當(dāng)前普遍認(rèn)為，人體內(nèi)分泌功能障礙與TAO有關(guān)。以往報(bào)道稱，可溶性黏附分子參與TAO的發(fā)病[2]。亦有報(bào)道指出，TAO影響因素包括眼眶內(nèi)皮細(xì)胞受到損傷、存在炎性細(xì)胞浸潤現(xiàn)象等，內(nèi)皮細(xì)胞受損主要變化為黏附分子表達(dá)異常增加[3-4]。為進(jìn)一步明確可溶性細(xì)胞間黏附分子1(sICAM-1)以及可溶性血管細(xì)胞黏附分子1(sVCAM-1)在TAO發(fā)展中表達(dá)情況，本研究納入TAO病例150例，分析血清sICAM-1、sVCAM-1表達(dá)水平及其與TAO病情關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 將本院2016年8月至2018年3月期間收治的150例TAO患者納入研究，入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)與歐洲GO研究組(EUGOGO)提出的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]相符；(2)有確切甲亢病史或合并甲狀腺功能性疾??；(3)首次發(fā)病，近6個月未接受免疫抑制劑、抗甲狀腺素藥物或者糖皮質(zhì)激素治療；(4)年齡≥18歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)伴隨造血系統(tǒng)疾病或者肝腎功能異常；(2)合并腫瘤、自身免疫性疾病或者感染性疾病。包括男68例、女82例，患者年齡19～67歲，平均(50.79±6.47)歲，病程0.08～0.33年，平均(0.21±0.03)年。并將同期80例接受健康體檢者納入并作為對照組，包括男34例、女46例，年齡20～66歲，平均(50.23±6.40)歲。全部納入研究者知情且自愿參與研究。

1.2方法 將TAO患者依據(jù)臨床活動度評分(CAS)差異進(jìn)行分組，CAS評分達(dá)到4分即為活動期，否則為非活動期，其中活動期組83例，非活動期組67例。同時按TAO病情嚴(yán)重程度進(jìn)行分組，可以分為輕度組(n=48)、中重度組(n=55)、極重度組(n=47)。記錄所有納入研究者的一般資料[包括性別、年齡、病程、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)等]，采集納入研究者空腹靜脈血3 mL，經(jīng)過10 min離心處理后，獲得上層血清，將其置于EP冷凍管之中，且存儲于溫度為-80 ℃冰箱內(nèi)，然后酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)雙抗體夾心法完成sICAM-1、sVCAM-1濃度測定，采取美國R&D公司生產(chǎn)的檢測試劑盒。選擇Multiskan MS全自動酶標(biāo)儀(購自美國Thermo Scientific公司)，調(diào)節(jié)波長450 nm，進(jìn)行吸光度(A)值測定，以繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線方式獲得sICAM-1以及sVCAM-1水平計(jì)算結(jié)果。

1.3觀察指標(biāo) 比較活動期組、非活動期組與對照組、不同病情程度亞組的一般資料、血清sICAM-1、sVCAM-1水平，并進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1CAS分組及對照組間的比較 活動期組血清sICAM-1、sVCAM-1顯著高于其余兩組(P<0.05)，且非活動期組與對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

2.2不同病情程度組及對照組間的比較 不同病情程度組與對照組性別、年齡、BMI比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；不同病情程度亞組間病程比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表1 CAS分組及對照組間的比較

注：與對照組比較，#P<0.05；與非活動期比較，*P<0.05；-表示該項(xiàng)無數(shù)據(jù)

表2 不同病情程度組及對照組間一般資料的比較

注：-表示該項(xiàng)無數(shù)據(jù)

2.3不同病情程度和CAS分期的患者及對照組sICAM-1、sVCAM-1水平比較 不同病情程度組中，活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平顯著高于同組內(nèi)非活動期患者及對照組(P<0.05)，并且在極重度組、中重度組以及輕度組中水平的依次降低，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 不同病情程度亞組CAS分期患者與對照組sICAM-1、sVCAM-1比較

注：與對照組比較，▲P<0.05；與同組內(nèi)非活動期比較，#P<0.05；與輕度組活動期比較，*P<0.05；與中重度組活動期比較，△P<0.05

2.4相關(guān)性分析 非活動期患者病情程度與血清sICAM-1、sVCAM-1無顯著相關(guān)性(P>0.05)；活動期患者病情程度與血清sICAM-1、sVCAM-1呈正相關(guān)(P<0.05)。見表4。

表4 相關(guān)性分析

3 討論

當(dāng)前，醫(yī)學(xué)界尚未闡明TAO具體發(fā)病機(jī)制，考慮到眼眶屬于無淋巴器官部位，故臨床對其研究通常將免疫細(xì)胞與免疫分子作為重點(diǎn)[6-8]。免疫球蛋白超家族包括sVCAM-1與sICAM-1，這兩種物質(zhì)常見于多種細(xì)胞膜以及細(xì)胞外基質(zhì)，生理與病理機(jī)制中，sVCAM-1與sICAM-1分子主要由配體-受體結(jié)合途徑發(fā)揮自身作用。以往報(bào)道稱，sVCAM-1與sICAM-1對于白細(xì)胞識別、有效轉(zhuǎn)導(dǎo)以及黏附起著介導(dǎo)作用，而白細(xì)胞與相應(yīng)血管內(nèi)皮細(xì)胞均通過黏附方式形成級聯(lián)反應(yīng)，從而對機(jī)體免疫系統(tǒng)起到調(diào)節(jié)功效[9-10]。血清sICAM-1的來源普遍認(rèn)為有兩種學(xué)說：其中一種是認(rèn)為細(xì)胞膜表面合成并分泌細(xì)胞間黏附分子1(ICAM-1)，同時于細(xì)胞膜結(jié)合部位產(chǎn)生蛋白水解反應(yīng)，膜外部分主要脫落進(jìn)入血液系統(tǒng)，并以sICAM-1形式存在；另一種則認(rèn)為人體內(nèi)編碼ICAM-1的相應(yīng)mRNA可以經(jīng)剪切作用將編碼跨膜區(qū)域以及胞內(nèi)區(qū)堿基有效去除，然后翻譯形成sICAM-1。有報(bào)道指出，病變組織處合成與分泌的ICAM-1存在一定獨(dú)特性，能夠進(jìn)入血液系統(tǒng)轉(zhuǎn)變?yōu)閟ICAM-1分子，同時結(jié)合體內(nèi)淋巴功能相關(guān)抗原1(LFA-1)配體，作用于淋巴細(xì)胞，使得靜息狀態(tài)、未激活狀態(tài)相應(yīng)免疫活性細(xì)胞大量黏附于病變處，從而發(fā)揮定靶功能[11-12]。在體內(nèi)血液循環(huán)帶動下，淋巴細(xì)胞可以移動至靶器官，sICAM-1分子會結(jié)合淋巴細(xì)胞表面LFA-1，從而對淋巴細(xì)胞有效釋放膜信號，最終跨膜游出[13-14]。

本研究通過觀察發(fā)現(xiàn)，對照組血清樣本內(nèi)有sICAM-1、sVCAM-1檢出，提示健康人體血清里面存在一定水平的sICAM-1、sVCAM-1。由于自身免疫性疾病的發(fā)生可導(dǎo)致黏附分子表達(dá)水平提高及脫落增加，造成血清中檢測出的可溶性黏附分子呈現(xiàn)異常升高趨勢，因此TAO評估指證可能包括可溶性黏附分子變化。本研究中，活動期組血清樣本sICAM-1、sVCAM-1表達(dá)明顯高于對照組及非活動期組，同時對照組與非活動期組表達(dá)無顯著差異，與趙勇[15]研究觀點(diǎn)相符。說明TAO活動期患者眼瞼部位、甲狀腺局部存在炎癥，可加快黏附分子生成速率，但是TAO非活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1表達(dá)正常，可能因?yàn)樵摃r期炎癥細(xì)胞浸潤已經(jīng)開始消退。本研究中，不同病情程度組中活動期患者血清sICAM-1、sVCAM-1表達(dá)水平較對照組顯著增高，而且在極重度組、中重度組以及輕度組中呈依次降低，表明活動期TAO病情越嚴(yán)重，血清sICAM-1、sVCAM-1表達(dá)水平越高，對于TAO活動期患者而言，病情程度能影響sICAM-1、sVCAM-1表達(dá)。本文相關(guān)性分析顯示，活動期患者病情程度與血清sICAM-1、sVCAM-1表達(dá)呈顯著正相關(guān)，而非活動期患者則無此相關(guān)性，與張曉斌等[16]觀點(diǎn)一致。說明TAO活動期，隨著病情加重，將導(dǎo)致sICAM-1、sVCAM-1水平隨之升高。

4 結(jié)論

TAO活動期病情越嚴(yán)重，血清sICAM-1、sVCAM-1表達(dá)水平越高，對其進(jìn)行檢測能為TAO診治提供參考。